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定点突变改造谷胱甘肽合成相关酶及高效催化生产谷胱甘肽
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作者 张秀春 王骏之 +1 位作者 徐华栋 沈美华 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第6期91-96,共6页
谷胱甘肽(glutathione,GSH)是一种含有γ-酰胺键和巯基的三肽化合物,广泛应用于医药、食品和化妆品等领域。谷胱甘肽的生物合成主要由γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,GSHA)和谷胱甘肽合成酶(glutathione synth... 谷胱甘肽(glutathione,GSH)是一种含有γ-酰胺键和巯基的三肽化合物,广泛应用于医药、食品和化妆品等领域。谷胱甘肽的生物合成主要由γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,GSHA)和谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,GSHB)两步催化得到。在利用天然酶催化生产谷胱甘肽的过程中,发现天然酶的催化效果较差,其中GSHA为反应过程中的限速酶,该酶会受到产物的反馈抑制。该文对来自大肠杆菌(Escherichia coli)的GSHA进行分子改造,对GSHA中参与转化的活性位点进行分析,通过丙氨酸扫描对关键氨基酸进行替换。对蛋白质表面非活性区域的氨基酸进行分析,引入带负电荷的氨基酸提高稳定性。将酶活力提升的突变位点进行组合,获得了催化效果较高的突变体Y131A-A511D,相比于野生型酶活力提高了6倍,并对最佳突变体的酶学性质进行分析。将突变体Y131A-A511D用于催化合成谷胱甘肽,在8 h内合成了76.8 mmol/L的谷胱甘肽,达到了高效催化生产谷胱甘肽的目的。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 γ-谷氨酸半胱氨酸连接酶 定点突变 丙氨酸扫描 酶催化
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基于质谱的单细胞蛋白质组学分析策略与应用
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作者 李国星 魏星 +1 位作者 陈明丽 王建华 《分析测试学报》 CAS 北大核心 2025年第1期99-105,共7页
细胞间异质性已被证明存在于各类生物体及其发育过程中。传统对于群体细胞的测量所得到的平均结果往往无法用于单细胞异质性的分析,因此开展单细胞水平的研究对于单个细胞的生理状态至关重要。蛋白质作为生命活动的主要承担者,进行单细... 细胞间异质性已被证明存在于各类生物体及其发育过程中。传统对于群体细胞的测量所得到的平均结果往往无法用于单细胞异质性的分析,因此开展单细胞水平的研究对于单个细胞的生理状态至关重要。蛋白质作为生命活动的主要承担者,进行单细胞蛋白质组学分析对于准确研究信号分子与相关信号通路之间的关系具有重要意义。常规的免疫荧光等技术受限于抗体的结合特异性与可用性,且仅限于分析预先选定的蛋白质。该文综述了近年来基于质谱的单细胞蛋白质组学中的常用方法,根据分析策略的不同,将其分为自下而上、自上而下与天然蛋白质组学3种方法,在介绍研究方法的同时对蛋白质样品预处理的进展进行了讨论。最后,对基于质谱的单细胞蛋白质组学研究所面临的挑战以及发展方向进行了总结与展望。 展开更多
关键词 质谱(MS) 蛋白质组学 单细胞 样品预处理
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cGAS-STING通路在肿瘤免疫治疗中的作用机制与研究进展
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作者 王适豪 石万瑞 +1 位作者 刘轶 张皓 《高等学校化学学报》 北大核心 2025年第1期66-75,共10页
环磷酸鸟苷酸合成酶[Cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate(GMP-AMP)synthase,cGAS蛋白]-干扰素刺激因子(Stimulator of interferon genes,STING蛋白)(cGAS-STING)信号通路是识别细胞质中异常DNA、激活先天免疫应答... 环磷酸鸟苷酸合成酶[Cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate(GMP-AMP)synthase,cGAS蛋白]-干扰素刺激因子(Stimulator of interferon genes,STING蛋白)(cGAS-STING)信号通路是识别细胞质中异常DNA、激活先天免疫应答系统的重要通路.cGAS蛋白在识别细胞质内异常DNA后,可催化三磷酸腺苷(ATP)和三磷酸鸟苷(GTP)合成环状鸟苷酸二磷酸腺苷(Cyclic GMP-AMP,cGAMP).cGAMP作为第二信使激活STING蛋白,促进I型干扰素的释放,从而引起一系列免疫反应.cGAS-STING通路可以调控肿瘤的转移和增长,参与抗肿瘤的先天免疫反应,探究cGAS-STING通路的作用机制在肿瘤免疫治疗中具有重要意义.本综合评述介绍了cGAS-STING通路的作用机制,概述了目前在抗肿瘤免疫治疗中激活cGAS-STING通路的各类策略. 展开更多
关键词 环磷酸鸟苷酸合成酶-干扰素刺激因子信号通路 肿瘤 免疫治疗 纳米药物
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基于识别竞争策略的SERS传感器用于快速和同时检测结直肠癌相关miRNA
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作者 陈峰松 蔡瑞 +3 位作者 曹小卫 张烁丰 盛金鑫 王小永 《分析测试学报》 北大核心 2025年第2期265-274,共10页
基于识别竞争策略和金十二面体(AuNDs)阵列,构建了表面增强拉曼光谱(SERS)传感器,并实现了健康人和结直肠癌(CRC)患者血清中两种miRNA的高效检测。通过将拉曼信号分子和适配体互补链修饰到金纳米双锥(AuNBP)表面,制备了两种标记探针,并... 基于识别竞争策略和金十二面体(AuNDs)阵列,构建了表面增强拉曼光谱(SERS)传感器,并实现了健康人和结直肠癌(CRC)患者血清中两种miRNA的高效检测。通过将拉曼信号分子和适配体互补链修饰到金纳米双锥(AuNBP)表面,制备了两种标记探针,并将其结合在适配体功能化AuNDs阵列上构建SERS传感器。目标miRNAs能够特异性结合适配体,使标记探针从AuNDs阵列表面竞争性脱落,进而使得SERS信号降低。该方法对血清中miR-21和miR-92a的检出限分别低至5.7 pmol/L和8.4 pmol/L,反应时间仅需6 min。临床检测结果显示,相对于健康人,CRC患者血清中miR-21和miR-92a的表达水平显著升高。SERS结果与实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)一致,证实了其准确性。该方法为miRNA的快速、高灵敏、同时检测提供了新的策略,在CRC的早期诊断中具有巨大的临床潜在价值。 展开更多
关键词 表面增强拉曼散射 金十二面体 MIRNA 核酸适配体 结直肠癌 识别竞争策略
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氟离子敏感疏水标签辅助连续流动绿色合成胸腺五肽
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作者 刘冬梅 徐元强 +2 位作者 夏超 郑晶晶 苏贤斌 《高等学校化学学报》 北大核心 2025年第4期26-34,共9页
设计并合成了一种新型氟离子敏感的羧基保护基——2-苯基-2-三乙基硅乙醇(PTESE)作为疏水性标签,结合连续流动化学技术,在微反应器中实现了高效绿色的多肽药物合成.该策略采用绿色溶剂乙酸乙酯替代传统固相合成中使用的环境不友好溶剂N... 设计并合成了一种新型氟离子敏感的羧基保护基——2-苯基-2-三乙基硅乙醇(PTESE)作为疏水性标签,结合连续流动化学技术,在微反应器中实现了高效绿色的多肽药物合成.该策略采用绿色溶剂乙酸乙酯替代传统固相合成中使用的环境不友好溶剂N,N-二甲基甲酰胺,避免了潜在的生殖毒性风险.实验中使用Cbz保护的氨基酸进行偶联反应,并通过连续流钯碳填充柱加氢实现快速、清洁的脱保护,有效规避了Fmoc脱保护中对受控试剂哌啶的依赖.基于该方法快速高效地合成了高纯度的胸腺五肽(粗品纯度>98%),与传统固相合成方法相比,过程质量强度(PMI)大幅度降低.同时,正交保护基团PTESE可通过氟离子试剂有效脱除,为全保护肽链的合成提供一种新策略,并在绿色可持续多肽合成领域具有巨大的应用潜力. 展开更多
关键词 氟离子敏感 疏水标签 胸腺五肽 连续流动液相多肽合成
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蛋白质组学在生物植物逆境适应中的作用研究
6
作者 白建瑞 《现代农业研究》 2025年第2期47-49,共3页
本文对蛋白质组学在植物逆境适应中的作用进行了研究,重点关注干旱、盐碱、高温和低温逆境下的蛋白质变化及其调控机制。研究表明,蛋白质组学技术,包括质谱分析、二维凝胶电泳和液相色谱,能够全面揭示植物在不同逆境条件下的蛋白质表达... 本文对蛋白质组学在植物逆境适应中的作用进行了研究,重点关注干旱、盐碱、高温和低温逆境下的蛋白质变化及其调控机制。研究表明,蛋白质组学技术,包括质谱分析、二维凝胶电泳和液相色谱,能够全面揭示植物在不同逆境条件下的蛋白质表达谱和功能变化。结果显示,在干旱条件下,植物体内热激蛋白和抗氧化酶显著上调,有助于应对水分胁迫;在盐碱逆境中,离子通道蛋白和渗透调节蛋白的变化增强了植物的盐碱耐受性;而高温和低温逆境下,热激蛋白和冷激蛋白的表达变化则帮助植物抵御温度极端的影响。这些发现为理解植物的逆境应对机制和提升作物抗逆性提供了重要依据。 展开更多
关键词 蛋白质组学 生物植物 生物学反应 干旱逆境
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小分子肽在农业中的应用
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作者 郭勇军 张柔 +6 位作者 张博深 沈芯羽 张妍 许锋 江学顶 吕道飞 陈忻 《现代农业研究》 2025年第2期43-46,共4页
【目的】探讨小分子肽在农业中的应用现状及其对植物的影响机制,以期为其在农业领域的广泛应用提供理论基础。【方法】本文综述了小分子肽的种类及其在农业中的应用,重点分析了小分子肽在植物生长调节、抗菌及抗逆性诱导等方面的作用机... 【目的】探讨小分子肽在农业中的应用现状及其对植物的影响机制,以期为其在农业领域的广泛应用提供理论基础。【方法】本文综述了小分子肽的种类及其在农业中的应用,重点分析了小分子肽在植物生长调节、抗菌及抗逆性诱导等方面的作用机制。【结果】研究表明,小分子肽相比氨基酸更易被植物吸收,能够显著促进植物生长、增强植物抗逆性和抗菌能力。然而,目前对小分子肽的作用机理尚不完全明确,影响其应用效果的因素还需进一步研究。【结论】小分子肽在农业中具有广泛的应用前景,但其作用机制的复杂性和不确定性仍是当前研究的挑战。本文为未来的研究方向提供了参考,以期推动小分子肽在农业领域的深入研究与应用。 展开更多
关键词 小分子肽 农业 作用机制
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基于适配体-MOF模拟酶比色检测bPAG9
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作者 卢春霞 刘长彬 +2 位作者 张振良 卢守亮 吴世嘉 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期714-721,共8页
该研究基于金属有机框架Fe-MIL-101和双适配体夹心原理建立了一种比色检测牛妊娠相关糖蛋白9(bPAG9)的新方法。将生物素化适配体1固定在微孔板上作为捕获探针,Fe-MIL-101功能化的适配体2作为信号探针,当测试样品中含有bPAG9时,适配体1... 该研究基于金属有机框架Fe-MIL-101和双适配体夹心原理建立了一种比色检测牛妊娠相关糖蛋白9(bPAG9)的新方法。将生物素化适配体1固定在微孔板上作为捕获探针,Fe-MIL-101功能化的适配体2作为信号探针,当测试样品中含有bPAG9时,适配体1和适配体2与bPAG9结合,在固相载体表面形成双适配体夹心结构,随后适配体2偶联的Fe-MIL-101催化无色过氧化物酶底物产生比色输出信号,通过比色信号的变化即可实现对bPAG9的定性和定量分析。结果显示:在优化条件下,bPAG9在缓冲液中的线性检测范围为0.5~50 ng/mL(r=0.996),检出限为0.13 ng/mL。bPAG9在空白血清中的加标回收率为89.4%~104%,相对标准偏差小于10%。将该方法应用于人工受精28 d的奶牛血清检测,妊娠诊断结果显示,该法的诊断敏感性、特异性和准确率分别为92.5%、90.0%和91.5%。所建方法具有无创、简便、经济等特点,在奶牛早孕检测领域具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 妊娠相关糖蛋白 适配体 金属有机框架 妊娠诊断 奶牛
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响应型荧光探针检测神经递质的研究进展
9
作者 付信悦 张良伟 +2 位作者 刘姝菂 李金花 陈令新 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期107-117,共11页
神经递质是一类在神经系统中起重要作用的化学物质,其异常表达与多种神经系统疾病相关。荧光探针因高选择、高灵敏和可视化特性在众多神经递质检测方法中具有突出优势。该文主要综述了2019年以来响应型荧光探针在神经递质检测方面的新进... 神经递质是一类在神经系统中起重要作用的化学物质,其异常表达与多种神经系统疾病相关。荧光探针因高选择、高灵敏和可视化特性在众多神经递质检测方法中具有突出优势。该文主要综述了2019年以来响应型荧光探针在神经递质检测方面的新进展,介绍了6类神经递质,包括胆碱类、生物胺类、氨基酸类、神经肽类、嘌呤类以及气体信号分子。在分析各类神经递质结构和反应特点的基础上,介绍了相应探针的设计思路和反应机理。这些研究为神经递质的精确检测提供了重要的方法和理论支持,有望在神经系统疾病的早期诊断和治疗中发挥关键作用。最后展望了响应型荧光探针未来的发展趋势。 展开更多
关键词 荧光探针 神经递质 胆碱 生物胺 氨基酸 神经肽 嘌呤 气体
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电裂解芯片及其在细菌核酸分析中的应用
10
作者 程洁 蔡霜霜 +2 位作者 王其友 陈缵光 童艳丽 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期373-381,共9页
近年来,由于各种细菌引起的疾病不断爆发,细菌核酸检测已成为常用的实验室诊断方法。细菌核酸提取是细菌分类和鉴定的关键步骤,也是医学诊断、药物筛选的重要技术之一。目前的细菌核酸提取以化学裂解方法为主,其存在明显的缺点,如样品... 近年来,由于各种细菌引起的疾病不断爆发,细菌核酸检测已成为常用的实验室诊断方法。细菌核酸提取是细菌分类和鉴定的关键步骤,也是医学诊断、药物筛选的重要技术之一。目前的细菌核酸提取以化学裂解方法为主,其存在明显的缺点,如样品量大、化学试剂污染等。因此,研究快速、简单、无化学污染的检测装置具有重要意义。该研究设计了一种微流控芯片在直流电场下裂解各种细菌并提取核酸。研究了电场强度、电极间距、裂解时间、氧化铟锡电极方阻及电极宽度对核酸提取的影响。结果表明,在3.0 kV/mm的电场强度下,该芯片可在3 s内裂解大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、肺炎克雷伯氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和铜绿假单胞菌等多种细菌,并释放出核酸。提取的核酸无需纯化,可直接用于PCR检测。该芯片与实时荧光定量PCR联用检测细菌DNA的线性范围为10-18~10^(-10)mol/L,检出限低至4.2×10^(-18)mol/L。不同类型的细菌需根据其性质适当调整最佳裂解条件。该研究为病原体分析和细菌感染的医学诊断提供了一种简单、快速、高效且无化学试剂污染的核酸提取方法。 展开更多
关键词 微流控芯片 电裂解 核酸提取 直流电场 多种细菌
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生物体中氨基酸单体碳稳定同位素测试方法研究 被引量:1
11
作者 梁建鑫 尹希杰 +2 位作者 苏静 林锡煌 李玉红 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期447-454,共8页
氨基酸作为蛋白质的基本组成单位,是重要的生命物质,其单体碳同位素研究在生物地球化学、生态学、生物体代谢和环境科学等领域具有重要意义。该文优化了海参和海藻氨基酸提取和纯化流程,通过N新戊酰基-O-异丙酯(NPP)方法衍生化后,分别... 氨基酸作为蛋白质的基本组成单位,是重要的生命物质,其单体碳同位素研究在生物地球化学、生态学、生物体代谢和环境科学等领域具有重要意义。该文优化了海参和海藻氨基酸提取和纯化流程,通过N新戊酰基-O-异丙酯(NPP)方法衍生化后,分别用气相色谱-质谱(GC-MS)和气相色谱-燃烧-同位素比值质谱(GC-C-IRMS)测试其浓度和碳同位素组成。结果显示,15种氨基酸单体的分离效果较好,回收率为46.4%~96.3%,各氨基酸在1.0~16.0µmol/L范围内线性关系良好(r^(2)为0.987~0.999)。15种氨基酸单体衍生物δ^(13)C值的标准偏差均小于0.30‰(n=10),在0.6~2.0 mmol/L浓度范围内δ^(13)C的平均误差为±0.24‰,方法检出限为0.6 nmol。海参和海藻样品各氨基酸单体δ^(13)C值的范围分别为-31.10‰~-8.58‰和-30.53‰~-13.76‰,标准偏差均在0.33‰以内,可满足生物体氨基酸单体碳同位素的测试精度需求。 展开更多
关键词 气相色谱-燃烧-同位素比值质谱(GC-C-IRMS) N-新戊酰基-O-异丙酯(NPP) 氨基酸 碳稳定同位素
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Advancing energy storage with nitrogen containing biomaterials utilizing amino acid, peptide and protein: Current trends and future directions
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作者 Madan R.Biradar Harshad A.Mirgane +1 位作者 Sidhanath V.Bhosale Sheshanath V.Bhosale 《Journal of Energy Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第12期253-276,共24页
As the climate crisis continues to escalate, there has been a growing emphasis on the development of electrode materials that are environmentally friendly and sustainable. Biomolecules, such as proteins,peptides, and ... As the climate crisis continues to escalate, there has been a growing emphasis on the development of electrode materials that are environmentally friendly and sustainable. Biomolecules, such as proteins,peptides, and amino acids, have emerged as promising alternatives to metal oxide and metal hydroxide-based energy storage systems. These biomolecules offer several advantages, such as high safety, non-toxicity, abundant raw material sources, and ease of device fabrication. In this review, we highlighted the recent advancements in amino acid, peptide, and protein-based materials for lithiumion batteries, supercapacitors, and fuel cells. We delve into the synthetic strategies employed and their impact on factors such as active potential window, solubility in the electrolyte, and electrochemical performance. Our focus is on the development, composition, and performance of biomolecules, as well as the various approaches taken for their application in batteries, supercapacitors, and fuel cells. Finally, we discuss key considerations that must be taken into account to promote the design, synthesis and development for future practical applications of lithium-ion batteries, supercapacitors, and fuel cells. 展开更多
关键词 Amino acid Battery Electrolytes PEPTIDE PROTEIN SUPERCAPACITOR Fuel cell
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10种有机酸对电子烟中陶瓷雾化芯的重金属迁移影响
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作者 杨文武 王晶 +5 位作者 张倩 余忠瑾 韦健 孙小彤 韦惠静 况利平 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期413-420,共8页
为研究10种有机酸对电子烟中陶瓷雾化芯的重金属迁移影响,配制不同含量有机酸的电子烟烟液,采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对陶瓷雾化芯在加速老化条件下迁移至烟液及气溶胶中的金属元素进行测定,评估重金属在该陶瓷芯中的雾化效... 为研究10种有机酸对电子烟中陶瓷雾化芯的重金属迁移影响,配制不同含量有机酸的电子烟烟液,采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对陶瓷雾化芯在加速老化条件下迁移至烟液及气溶胶中的金属元素进行测定,评估重金属在该陶瓷芯中的雾化效率及有机酸的影响。结果表明:烟液、气溶胶方法中各元素的检出限分别均<10µg/kg、≤0.055µg/100口;不同类型和含量的有机酸对重金属的迁移影响不一,柠檬酸、乳酸、苹果酸、乙酸对金属元素的迁移影响相对较大。各元素在气溶胶中的雾化效率为21.2%~45.9%。与未添加有机酸的空白对照组相比,柠檬酸、乳酸、乙酸、苯甲酸、苹果酸对气溶胶中Ni含量提升有显著影响(P<0.05),柠檬酸对气溶胶中Cu含量提升有显著影响,5种酸对其他元素无显著性差异(P>0.05)。该方法准确可靠,适用于评估电子烟烟液及气溶胶中有机酸对陶瓷芯的重金属迁移影响。 展开更多
关键词 陶瓷雾化芯 电子烟 烟液 气溶胶 重金属 电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)
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荧光探针在蛋白磷酸化和糖基化检测中的应用
14
作者 常永新 李军荣 +2 位作者 邵娟 杨新迪 卿光焱 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期157-165,共9页
蛋白质翻译后修饰在细胞内起着关键的调控作用,对细胞的功能和代谢具有重要影响。近年来,荧光探针在研究蛋白质翻译后修饰中的应用不断发展。该文重点介绍了荧光探针在蛋白磷酸化和糖基化等修饰中的应用,包括其原理、设计策略以及在细... 蛋白质翻译后修饰在细胞内起着关键的调控作用,对细胞的功能和代谢具有重要影响。近年来,荧光探针在研究蛋白质翻译后修饰中的应用不断发展。该文重点介绍了荧光探针在蛋白磷酸化和糖基化等修饰中的应用,包括其原理、设计策略以及在细胞和生物体内的应用。荧光探针的发展为研究蛋白质翻译后修饰提供了强有力的工具,有望深化对这些修饰过程的理解,并为药物研发和疾病诊断提供新的途径。 展开更多
关键词 荧光探针 蛋白质 翻译后修饰 磷酸化 糖基化
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质谱技术在脑卒中生物标志物发现中的应用
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作者 周旭 赵洪慰 +3 位作者 孙昕昊 谢锋 李博岩 张进 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期798-804,共7页
脑卒中是指由于脑部供血突然降低或中断导致脑组织损伤的一类疾病,具有发病率高、死亡率高和致残率高的特点。近年来,质谱技术凭借高灵敏度和特异性的特点,在疾病生物标志物的发现中展现出巨大潜力。在脑卒中临床确诊前到康复期间,患者... 脑卒中是指由于脑部供血突然降低或中断导致脑组织损伤的一类疾病,具有发病率高、死亡率高和致残率高的特点。近年来,质谱技术凭借高灵敏度和特异性的特点,在疾病生物标志物的发现中展现出巨大潜力。在脑卒中临床确诊前到康复期间,患者体内会发生大量代谢物和蛋白质的变化,这可能为基于质谱的临床前诊断、院前急救和预后评估提供契机。该文主要综述了近十年质谱技术在脑卒中代谢和蛋白生物标志物发现中的代表性工作。在代谢生物标志物方面,梳理了与脑卒中相关的能量代谢物、氨基酸和脂质等;在蛋白生物标志物方面,梳理了与脑卒中相关的基质金属蛋白酶、金属蛋白和纤维蛋白原等。该文对揭示脑卒中的病理生理机制及推动质谱技术在脑卒中临床辅助诊断中的应用具有重要意义。 展开更多
关键词 脑卒中 质谱 生物标志物 代谢组学 蛋白组学
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黄色短杆菌中L-异亮氨酸同位素丰度及分布的分析方法研究
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作者 赵雅梦 范若宁 雷雯 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期496-500,共5页
随着代谢组学、蛋白质组学等生命科学领域的迅猛发展,稳定同位素标记试剂,尤其是标记氨基酸,因无放射性、与非标记化合物理化性质一致等优势得到广泛应用。该文建立了一种稳健、快速的氨基酸同位素丰度分析方法。方法采用Hypersil Gold ... 随着代谢组学、蛋白质组学等生命科学领域的迅猛发展,稳定同位素标记试剂,尤其是标记氨基酸,因无放射性、与非标记化合物理化性质一致等优势得到广泛应用。该文建立了一种稳健、快速的氨基酸同位素丰度分析方法。方法采用Hypersil Gold Vanquish(100 mm×2.1 mm,1.9µm)色谱柱,以水和含0.1%甲酸的甲醇为流动相,正离子模式下进行液相色谱-高分辨质谱联用(LC-HRMS)分析;测得细菌发酵液中L异亮氨酸-15N的同位素丰度为98.58%,相对标准偏差为0.03%,可应用于不同稳定同位素(15N或^(13)C)示踪的黄色短杆菌中L-异亮氨酸同位素丰度及分布的准确测定。该方法具有简便、灵敏、稳健等优点,有望在合成生物学、同位素示踪代谢流等研究中发挥重要作用。 展开更多
关键词 同位素标记氨基酸 液相色谱-高分辨质谱(LC-HRMS) 黄色短杆菌 同位素分布及丰度
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茶多酚锰合成、表征及络合和诱导肿瘤细胞凋亡的研究 被引量:15
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作者 黄河宁 李安章 +5 位作者 翁露娜 林庆梅 黄河清 郑忠辉 李棋福 蔡宗苇 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1072-1076,共5页
合成了茶多酚锰(TP-Mn)和茶多酚锗(TP-Ge),并采用红外光谱法及液相色谱质谱联用技术表征TP-Mn的理化特性.选用反向液相色谱(RP-HPLC)和电感藕合等离子体质谱(ICP-MS)技术研究牛血清白蛋白(BSA)络合TP-Mn的能力,指出BSA可直接络合于TP-Mn... 合成了茶多酚锰(TP-Mn)和茶多酚锗(TP-Ge),并采用红外光谱法及液相色谱质谱联用技术表征TP-Mn的理化特性.选用反向液相色谱(RP-HPLC)和电感藕合等离子体质谱(ICP-MS)技术研究牛血清白蛋白(BSA)络合TP-Mn的能力,指出BSA可直接络合于TP-Mn.采用MTT法研究TP和TP-Mn诱导Hela卵巢癌细胞的凋亡率.结果表明,TP和TP-Mn均能诱导Hela卵巢癌细胞凋亡,但TP-Mn诱导凋亡率约为TP的2倍.比较TP-Ge和TP-Mn诱导Raji人B淋巴瘤细胞凋亡率发现,两者诱导肿瘤细胞的凋亡率几乎相同,均高达86%左右.人血清白蛋白(HSB)可作为输送TP-Ge和TP-Mn的药物载体. 展开更多
关键词 茶多酚锰 茶多酚锗 肿瘤细胞 凋亡率 电感藕合等离子体质谱
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不同裂解条件对天冬酰胺主要裂解产物的影响 被引量:12
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作者 郝菊芳 郭吉兆 +2 位作者 谢复炜 夏巧玲 谢剑平 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期519-526,共8页
采用在线裂解气相色谱-质谱联用技术(Py/GC-MS)对不同条件下天冬酰胺的主要裂解产物进行分析,并通过裂解同位素标记样品,计算主要含氮裂解产物中的同位素比例,推测其形成途径,研究裂解条件对主要裂解产物形成的影响。结果表明:温度对天... 采用在线裂解气相色谱-质谱联用技术(Py/GC-MS)对不同条件下天冬酰胺的主要裂解产物进行分析,并通过裂解同位素标记样品,计算主要含氮裂解产物中的同位素比例,推测其形成途径,研究裂解条件对主要裂解产物形成的影响。结果表明:温度对天冬酰胺裂解影响较大,主要裂解产物在低温和高温下生成量变化较大。300℃时,马来酰亚胺和琥珀酰亚胺为主要的裂解产物,300~600℃时生成量显著增加,600~900℃时马来酰亚胺生成量缓慢增加而琥珀酰亚胺逐渐降低;随着温度升高,酸类和酰胺类物质生成量持续增加;腈类和吡咯类物质在高温下生成量明显增加。此外,温度对含氮裂解产物的形成途径也有较大影响。马来酰亚胺、乙酰胺在低温下N主要来源于标记的酰胺N,而在高温下主要来源于未标记的氨基N。氢氰酸、乙腈和丙烯腈中的N原子均主要由未标记的氨基转变而来,且随着温度升高,这种生成途径所占比例越高。而裂解气氛和裂解时间对天冬酰胺主要裂解产物的生成量及途径影响较小。 展开更多
关键词 天冬酰胺 热裂解 气相色谱-质谱联用 裂解条件 影响
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谷胱甘肽与D型氨基酸非共价复合物的质谱 被引量:9
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作者 储艳秋 潘婷婷 +3 位作者 戴兆云 俞卓伟 郑松柏 丁传凡 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1981-1987,共7页
为了研究谷胱甘肽和D型氨基酸的非共价相互作用,将一定化学剂量比的还原型谷胱甘肽与D-苯丙氨酸、D-组氨酸或D-谷氨酰胺在室温下混合后,温育1h,使反应达到平衡.电喷雾质谱测量结果表明,在生理pH条件下,谷胱甘肽可以和D型氨基酸经反应生... 为了研究谷胱甘肽和D型氨基酸的非共价相互作用,将一定化学剂量比的还原型谷胱甘肽与D-苯丙氨酸、D-组氨酸或D-谷氨酰胺在室温下混合后,温育1h,使反应达到平衡.电喷雾质谱测量结果表明,在生理pH条件下,谷胱甘肽可以和D型氨基酸经反应生成非共价复合物.串级质谱中的碰撞诱导解离(CID)以及紫外光谱进一步确认了非共价复合物的生成.为了避免严重的离子化效率和质谱信号相互抑制作用,对谷胱甘肽和D-谷氨酰胺的相互作用作了定量的评估.配制一系列不同初始浓度的谷胱甘肽和D型氨基酸的混合溶液,并用电喷雾质谱测定混合溶液中不同质点的质谱峰强度,计算了谷胱甘肽与三个D型氨基酸结合形成的复合物的解离常数.计算结果表明,谷胱甘肽可以和D型氨基酸结合形成不同键合强度的非共价复合物,其稳定性按照D-谷氨酰胺、D-苯丙氨酸、D-组氨酸的次序逐渐增大. 展开更多
关键词 D-氨基酸 谷胱甘肽 非共价复合物 电喷雾质谱 解离常数
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水杨醛缩赖氨酸Schiff碱金属配合物的合成和表征 被引量:19
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作者 林秋月 冯旭文 +1 位作者 胡瑞定 张萍华 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期547-548,共2页
Nickel(Ⅱ),Copper(Ⅱ),Zinc(Ⅱ),and Cadmium(Ⅱ)complexes derived from schiff base of N-Salicylidenelysine acid were synthesized.These complexes were characterized by elemental analysis,conductivity measurement,IR and e... Nickel(Ⅱ),Copper(Ⅱ),Zinc(Ⅱ),and Cadmium(Ⅱ)complexes derived from schiff base of N-Salicylidenelysine acid were synthesized.These complexes were characterized by elemental analysis,conductivity measurement,IR and electronic spectra.The anti-bacterium activity of the complexes were tested. 展开更多
关键词 赖氨酸 SCHIFF碱 配合物 合成 抗菌活性
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