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虾夷马粪海胆TNFAIP3基因的克隆与表达分析

Cloning and Expression Analysis of TNFAIP3 Gene in Strongylocentrotus intermedius
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摘要 采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得一条虾夷马粪海胆(Strongylocentrotus intermedius) SiTNFAIP3基因cDNA全长序列。实时定量PCR检测了SiTNFAIP3基因在组织中的分布及在经脂多糖(LPS)、肽聚糖(PGN)、聚肌胞苷酸(poly I: C)、强壮弧菌(Vibrio fortis)和葡聚糖(WGP)刺激后的表达情况。结果表明:SiTNFAIP3的cDNA全长为3990 bp,5’-UTR为209 bp,开放阅读框为3567 bp,3’-UTR为214 bp,编码1188个氨基酸,具有1个OTU结构域和8个ZnF-A20结构域;qRT-PCR结果显示SiTNFAIP3在检测的各组织中均有表达,卵巢中的表达量显著高于其它组织(p <0.05);经PGN、V. fortis刺激后,体腔细胞中SiTNFAIP3表达量显著上升,在刺激后12 h达到最高值(p <0.05);经LPS、poly I: C刺激后,体腔细胞中SiTNFAIP3表达变化较小;而经WGP刺激后,体腔细胞中SiTNFAIP3表达出现下调。研究表明,SiTNFAIP3基因参与了虾夷马粪海胆的NLR、TLR和RLR信号通路,但主要参与了NLR信号通路。SiTNFAIP3基因在海胆的先天免疫中发挥重要作用。
机构地区 大连海洋大学
出处 《海洋科学前沿》 2018年第4期144-154,共11页 Advances in Marine Sciences
基金 国家自然科学基金“海胆天然免疫分子NLR家族的免疫应答机制研究”(31101923) 辽宁省自然科学基金“海胆抗菌肽的基因克隆、表达特征分析及原核表达”(2015020761) 农业部北方海水增养殖重点实验室开放课题(2014-MSENC-KF-08)。
作者简介 通讯作者:刘洋
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