摘要
旨在建立一种针对猪大肠埃希菌和沙门氏菌的特异、高效的双重PCR检测方法并应用于临床样品检测。本研究针对大肠埃希菌保守序列16SrRNA基因和沙门氏菌的特异性基因侵袭蛋白A基因(invA),采用Primer 3.0 Plus分别设计合成两对特异性引物,在此基础上建立并优化双重PCR反应体系。结果显示,该双重PCR检测方法能有效扩增出猪大肠埃希菌和沙门氏菌的144 bp和610 bp的特异性片段,PCR产物测序结果为目标片段;对副猪嗜血杆菌、产气荚膜梭菌、巴氏杆菌、波氏杆菌、链球菌的扩增结果均为阴性。将该方法应用于临床样品检测,对55例病猪的血液和组织样品进行分离检测,检测出大肠埃希菌12例,沙门氏菌4例,混合感染1例,与已报道的PCR检测方法符合率为98.20%。表明该研究建立的双重PCR体系可为临床猪大肠埃希菌、沙门氏菌及混合感染提供一种灵敏且高效的检测方法。
出处
《浙江农业科学》
2023年第4期957-963,共7页
Journal of Zhejiang Agricultural Sciences
基金
浙江省重点研发计划项目(2021C02007)。
作者简介
徐翔飞(1997-),男,安徽合肥人,硕士生,研究畜禽细菌病,E-mail:xxf428359139@163.com;通信作者:鲍国连,研究员,硕士生导师,E-mail:baoguolian@163.com;通信作者:刘燕,研究员,E-mail:ly-liuyan@163.com。
