摘要
目的探讨shRNA沉默软骨素聚合因子(ChPF)基因对脑胶质瘤细胞活性的影响及可能作用机制。方法使用携带有靶向ChPF基因shRNA(ChPF-shRNA)的重组慢病毒转染人脑胶质瘤A172细胞,RT-PCR和Western印迹检测细胞中ChPF mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞周期及凋亡水平。进一步使用单核细胞趋化蛋白(CCL2)-shRNA转染人脑胶质瘤A172细胞,RT-PCR和Western印迹检测细胞中CCL2、ChPF mRNA和蛋白表达水平。结果ChPF-shRNA组ChPF mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组和Nc-shRNA组(P<0.01)。ChPF-shRNA转入人脑胶质瘤A172细胞后,与空白对照组、Nc-shRNA组相比,ChPF-shRNA组细胞增殖能力明显减弱(P<0.05)。ChPF-shRNA组S期、G2/M期的细胞比例明显低于空白对照组、Nc-shRNA组,G0/G1期的细胞比例明显高于空白对照组、Nc-shRNA组(P<0.05)。ChPF-shRNA组细胞凋亡率明显高于空白对照组、Nc-shRNA组(P<0.01)。ChPF-shRNA组穿过小室膜的细胞数明显少于空白对照组、Nc-shRNA组(P<0.01)。ChPF-shRNA组人脑胶质瘤A172细胞CCL2 mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组与Nc-shRNA组(P<0.01)。转染CCL2-shRNA后,CCL2-shRNA组人脑胶质瘤A172细胞CCL2 mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组与Nc-shRNA组(P<0.01);ChPF mRNA和蛋白相对表达量在各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论ChPF基因表达下调可能通过调控CCL2来抑制人脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭,促进细胞凋亡。
出处
《中国老年学杂志》
CAS
北大核心
2021年第7期1466-1470,共5页
Chinese Journal of Gerontology
基金
贵州省医药卫生学科平台项目(2018ZD008)。
作者简介
第一作者:吴海涛(1979-),男,博士,副主任医师,主要从事颅脑创伤及颅底肿瘤研究。
