摘要
鸭圆环病毒(DuCV)感染引起淋巴细胞凋亡,其ORF3蛋白是唯一具有凋亡活性的病毒蛋白,但目前ORF3特异性抗体的缺乏限制了其生物学功能的深入研究。DuCV包含基因I型和基因II型两种基因型,利用软件分析两基因型ORF3同源性,选取保守性肽段进行多肽合成,并与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联,多次加强免疫兔子,采集血清并纯化IgG后制备ORF3多克隆抗体。ELISA检测发现此抗体能特异性与ORF3保守肽段反应,并具有较高的效价,间接免疫荧光(IFA)显示此抗体能特异性识别两基因型ORF3蛋白,但并不能用于westernblot检测,说明此多抗主要识别ORF3空间构象的表位。总之,我们成功制备了特异性识别两种基因型DuCVORF3蛋白的抗体,为今后深入探究DuCVORF3蛋白的生物学功能提供了良好的研究工具。
出处
《家禽科学》
2019年第3期36-40,共5页
Poultry Science
基金
国家自然科学青年基金(3160130233)
国家大学生创新训练项目(201810452012)
山东省家禽疫病诊断与免疫重点实验室开放课题基金(SDPDI201802)
河南科技学院大学生创新训练计划项目(201710467009,2017CX031)
作者简介
通讯作者:王鑫(1985-)女,博士,教授,主要从事分子病原学方向研究。
