摘要
目的探讨胰岛素及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)途径对NO生成的影响。方法检测胰岛素、葡萄糖以及PI3-K活性不可逆的抑制剂(Wortmannin)对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)PI3-K表达以及NO、超氧阴离子(O_2^-)产生和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响。实验分为对照组、10 mU/L胰岛素组、100 mU/L胰岛素组、甘露醇组、5 mmol/L葡萄糖+10 mU/L胰岛素组(5 mmol/L G1组)、25 mmol/L葡萄糖+100 mU/L胰岛素组(25 mmol/L G2组)、50 nmol/L Wortmannin组(50 nmol/L W组)、50 nmol/L Wortmannin+10 mU/L胰岛素组(50 nmol/L W1组)和50 nmol/L Wortmannin+100 mU/L胰岛素组(50 nmol/L W2组)。结果与对照组比较,不同浓度胰岛素组eNOS活性及NO水平显著升高(P<0.01);25 mmol/L G2组、50 nmol/L W组、50 nmol/LW1组和50 nmol/L W2组eNOS活性及NO水平均显著降低,O_2^-生成明显增加(P<0.01);与对照组比较,不同浓度胰岛组、50 nmol/L W组、50 nmol/L W1组和50 nmol/L W2组PI3-K蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论 PI3-K信号途径对于促进NO产生、维持血管内皮细胞的正常功能具有重要作用,在高糖、高胰岛素状态下该条途径受损并由此引发内皮功能障碍。
Objective To elucidate the effect of insulin/phosphatidylinositol 3-kinase（PI3-K） signaling pathway on endothelial nitric oxide（NO） production. Methods The effects of insulin,glucose and wortmannin（inhibitor of PI3-K） on the PI3-K expression,the generation of NO and superoxide anion（O2^-） in human umbilical vein endothelial cells（HUVECs） were investigated. The experiment included 9 groups： control group, 10 mU/L insulin, 100 mU/L insulin, mannitol, 5 mmol/L glucose＋ 10 mU/L insulin, 25 mmol/L glucose＋ 100 mU/L insulin, 50 nmol/L wortmannin,50 nmol/L wortmannin＋10 mU/L insulin and 50 nmol/L wortmannin＋100 mU/L insulin. Results Different dosages of insulin（10 mU/L, 100 mU/L） significantly increased NO production and endothelial nitric oxide synthase（eNOS） activity in HUVECs as compared with control group. In the presence of 25 mrnol/L glucose＋100 mU/L insulin,wortmannin and wortmannin＋insulin（10 mU/L, 100 mU/L）, NO production and eNOS activity significantly decreased （P 〈 0.01 vs controls,respectively） accompanied by elevated O2^- production （P 〈 0.01 vs controis, respectively）. Compared with controls, insulin （10 mU/L, 100 mU/L） and wortmannin, wortmannin＋insulin（10 mU/L,100 mU/L） promoted PI3-K expression. Conclusions PI3-K signaling pathway plays an important role in NO production and maintenance of endothelial function. In insulin-resistant state, this pathway is damaged, leading to endothelial dysfunction.
出处
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
北大核心
2009年第8期606-609,共4页
Chinese Journal of Geriatric Heart,Brain and Vessel Diseases
