摘要
应用L9(34)正交表建立了适合于樟树ISSR-PCR的优化反应体系,即20μL ISSR反应体系中含有1×PCR buffer、dNTP0.25 mmol/L、引物0.3μmol/L、Mg2+2.0 mmol/L、Taq酶1 U和模板DNA50 ng.适宜的扩增条件为:94℃预变性4 min;94℃变性40 s,58℃退火1 min,72℃延伸2 min,42个循环;72℃延伸10 min;4℃保存.
The optimal reaction ISSR-PCR system in Camphor was established with L9（34） orthogonal diagram.It is a 20 μL ISSR-PCR system containing 1×PCR buffer,0.25 mmol/L dNTP,0.3 μmol/L Primer,2.0 mmol/L Mg2＋,1 U Taq DNA polymerase,50 ng template DNA and 0.5 μg/μL BSA.The suitable PCR procedure is one cycle denaturing at 94 ℃ for 4 min,42 cycles each involving denaturing at 94 ℃ for 40 s,annealing at 58 ℃ for 1 min,extending at 72 ℃ for 2 min,one cycle extending at 72 ℃ for 10 min,and then remaining at 4 ℃.
出处
《中南林业科技大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期44-48,共5页
Journal of Central South University of Forestry & Technology
基金
上海市科委自然基金项目"上海市绿化基调树种-香樟黄化发生的种内遗传分析及种源筛选研究"(项目编号:05ZR14108)
作者简介
冯杰（1980-），男，甘肃合水人．硕士研究生，研究方向：林木遗传育种．E—mail：fengjie56@126．com
通讯作者：陈香波，研究方向：园林植物遗传育种．E—mail：cxb666@hotmail．com
