摘要
通过调整Mg2+、DNA模板、引物、T aqDNA聚合酶和dNTPs的浓度及PCR反应循环次数,建立并优化了家蚕来源肠球菌的RAPD-PCR反应体系及条件。结果表明,在25μl反应体系下,当Mg2+的浓度为3.5 mmol/L、DNA模板加入量为50 ng、引物浓度为15 pmol/L、T aqDNA聚合酶加入量为3U、PCR反应循环次数为45时,扩增结果最好。在本实验室,为家蚕来源肠球菌的遗传多样性研究建立了一种最佳RAPD分析模型。
The influences of concentration of Mg^2＋ , DNA template, primer, T aq polymerase, dNTPs and number of cycles had been tested for the amplification of random amplified polymorphic DNA （RAPD） in Enterococci of Bombyx mori. The results showed that when Mg^2＋ at 3.5 mmol/L,DNA template at 50 ng, primer at 15 pmol/L, Taq polymerase at 3U,dNTPs at 200 mmol/L and the number of cycles was 45, the amplification performed perfectly. An optimization RAPD analysis pattern for the genetic research in Enterococci of Bombyx mori was established.
出处
《河北林果研究》
2006年第1期78-80,82,共4页
Hebei Journal of Forestry and Orchard Research
基金
国家茧丝绸风险基金资助项目(国茧协办[2005]45号)
关键词
家蚕
肠球菌
随机扩增DNA多态性分析
条件优化
Bombyx mori
Enterococci
random amplified polymorphic DNA （RAPD）
conditions optimization
作者简介
宋连花（1980-）．女，山东昌乐人，山东农业大学在读硕士研究生。
通讯作者：王彦文（1962-），男．辽宁康平人，教授。E—mail：ywang@sdau．edu．cn。
