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不同浓度二十二碳六烯酸对正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道的激活作用及其机制
1
作者
夏大云
钱玲玲
+9 位作者
郁志明
孙曼青
汤徐
吴莹
党时鹏
季圆
王湘芸
柴强
陆彤
王如兴
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期169-173,共5页
目的:探讨不同浓度二十二碳六烯酸(DHA)对正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾离子通道(BK通道)的激活作用及其机制。方法:酶消化法分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞。采用全细胞膜片钳实验技术记录在未孵育与孵育细胞色素P450环...
目的:探讨不同浓度二十二碳六烯酸(DHA)对正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾离子通道(BK通道)的激活作用及其机制。方法:酶消化法分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞。采用全细胞膜片钳实验技术记录在未孵育与孵育细胞色素P450环氧化酶抑制剂SKF525A并灌流不同浓度DHA条件下BK通道电流密度变化;采用单通道膜片钳实验技术记录灌流不同浓度DHA时BK单通道开放概率的变化。结果:0.01~1.00μmol/L(定义为低浓度)DHA激活BK通道的半效浓度(EC50)为(0.24±0.05)μmol/L,但经SKF525A孵育后激活作用消失;3.00~10.00μmol/L(定义为高浓度)DHA激活BK通道的EC50为(2.38±0.22)μmol/L,经SKF525A孵育后,激活作用仍存在,且EC50无明显变化。在电极外液钙离子浓度为1μmol/L和刺激电位60 m V条件下,DHA浓度为0、0.01、0.03、0.10、0.30、1.00μmol/L时,BK通道开放概率分别为(0.095 2±0.009 5)、(0.093 9±0.012 6)、(0.098 6±0.016 9)、(0.099 5±0.014 7)、(0.097 5±0.010 4)和(0.102 3±0.020 6)(P>0.05,n=5),提示低浓度DHA不能激活BK单通道;继续增加DHA浓度,当浓度为3、10μmol/L时,BK单通道开放概率分别为(0.700 3±0.013 2)和(0.892 7±0.052 3)(P<0.05,n=5),提示高浓度DHA呈浓度依赖性激活BK单通道,EC50为(3.37±0.10)μmol/L。结论:不同浓度DHA激活BK通道的机制不同,低浓度DHA通过细胞色素P450环氧化酶途径激活BK通道,高浓度DHA可能通过与BK通道结合后直接激活。
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关键词
二十二碳六烯酸
冠状动脉平滑肌细胞
大电导钙激活钾离子通道
膜片钳
细胞色素P450环氧化酶
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职称材料
PI3K/Akt调控糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道的作用机制
被引量：
1
2
作者
焦国庆
李明秋
+4 位作者
吴莹
王如兴
胡亚玲
纪丽
LU Tong
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期166-170,199,共6页
目的:探讨PI3K/Akt对糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道的调节作用。方法:采用正常糖浓度(5 mmon/L)、高糖浓度(15 mmon/L)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂GKT137831、PI3K抑制剂Wortmannin作用于人冠状动脉平滑肌细胞(human...
目的:探讨PI3K/Akt对糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道的调节作用。方法:采用正常糖浓度(5 mmon/L)、高糖浓度(15 mmon/L)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂GKT137831、PI3K抑制剂Wortmannin作用于人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)。以GKT137831喂饲链脲霉素(streptozocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠,免疫印迹测定HCASMC、大鼠冠状动脉PI3K超家族DNA-Pkcs、Akt、p-Akt(S473)及BK-α亚基、BK-β1亚基的表达,2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯测定HCASMC及大鼠冠状动脉ROS表达。结果:高糖浓度下HCASMC及糖尿病大鼠冠状动脉ROS、DNA-Pkcs、Akt、p-Akt(S473)表达量增高,BK-β1表达量降低(P<0.05)。GKT137831作用后的HCASMC及糖尿病大鼠冠状动脉中,ROS、DNA-Pkcs、Akt、p-Akt(S473)表达量降低,BK-β1表达量明显增高(P<0.05)。Wortmannin作用后的HCASMC p-Akt(S473)表达量降低,BK-β1表达量明显增加(P<0.05)。结论:PI3K/Akt通路参与糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道的调控。
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关键词
糖尿病
大电导钙激活钾通道β1亚基
冠状血管
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职称材料
题名
不同浓度二十二碳六烯酸对正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道的激活作用及其机制
1
作者
夏大云
钱玲玲
郁志明
孙曼青
汤徐
吴莹
党时鹏
季圆
王湘芸
柴强
陆彤
王如兴
机构
南京医科大学附属无锡市人民医院心内科
山东省医学科学院基础医学
研究
所心血管病
研究室
mayo
clinic
医院
细胞
电
生理
研究室
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期169-173,共5页
基金
国家自然科学基金(81370303,81500249,81500323)
江苏省自然科学基金(BK20151110)
+1 种基金
江苏省人事厅“六大人才高峰”第七批高层次项目(006)
江苏省医学重点人才资助项目(RC201134)
文摘
目的:探讨不同浓度二十二碳六烯酸(DHA)对正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾离子通道(BK通道)的激活作用及其机制。方法:酶消化法分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞。采用全细胞膜片钳实验技术记录在未孵育与孵育细胞色素P450环氧化酶抑制剂SKF525A并灌流不同浓度DHA条件下BK通道电流密度变化;采用单通道膜片钳实验技术记录灌流不同浓度DHA时BK单通道开放概率的变化。结果:0.01~1.00μmol/L(定义为低浓度)DHA激活BK通道的半效浓度(EC50)为(0.24±0.05)μmol/L,但经SKF525A孵育后激活作用消失;3.00~10.00μmol/L(定义为高浓度)DHA激活BK通道的EC50为(2.38±0.22)μmol/L,经SKF525A孵育后,激活作用仍存在,且EC50无明显变化。在电极外液钙离子浓度为1μmol/L和刺激电位60 m V条件下,DHA浓度为0、0.01、0.03、0.10、0.30、1.00μmol/L时,BK通道开放概率分别为(0.095 2±0.009 5)、(0.093 9±0.012 6)、(0.098 6±0.016 9)、(0.099 5±0.014 7)、(0.097 5±0.010 4)和(0.102 3±0.020 6)(P>0.05,n=5),提示低浓度DHA不能激活BK单通道;继续增加DHA浓度,当浓度为3、10μmol/L时,BK单通道开放概率分别为(0.700 3±0.013 2)和(0.892 7±0.052 3)(P<0.05,n=5),提示高浓度DHA呈浓度依赖性激活BK单通道,EC50为(3.37±0.10)μmol/L。结论:不同浓度DHA激活BK通道的机制不同,低浓度DHA通过细胞色素P450环氧化酶途径激活BK通道,高浓度DHA可能通过与BK通道结合后直接激活。
关键词
二十二碳六烯酸
冠状动脉平滑肌细胞
大电导钙激活钾离子通道
膜片钳
细胞色素P450环氧化酶
Keywords
docosahexaenoic acid
coronary smooth muscle cell
BK channel
patch-clamp
cytochrome P450 epoxygenase
分类号
R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
PI3K/Akt调控糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道的作用机制
被引量：
1
2
作者
焦国庆
李明秋
吴莹
王如兴
胡亚玲
纪丽
LU Tong
机构
无锡市转化医学
研究
所
南京医科大学附属无锡人民医院心脏外科
mayo clinic细胞电生理研究室
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期166-170,199,共6页
基金
江苏省自然科学基金(BK20171151)。
文摘
目的:探讨PI3K/Akt对糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道的调节作用。方法:采用正常糖浓度(5 mmon/L)、高糖浓度(15 mmon/L)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂GKT137831、PI3K抑制剂Wortmannin作用于人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)。以GKT137831喂饲链脲霉素(streptozocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠,免疫印迹测定HCASMC、大鼠冠状动脉PI3K超家族DNA-Pkcs、Akt、p-Akt(S473)及BK-α亚基、BK-β1亚基的表达,2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯测定HCASMC及大鼠冠状动脉ROS表达。结果:高糖浓度下HCASMC及糖尿病大鼠冠状动脉ROS、DNA-Pkcs、Akt、p-Akt(S473)表达量增高,BK-β1表达量降低(P<0.05)。GKT137831作用后的HCASMC及糖尿病大鼠冠状动脉中,ROS、DNA-Pkcs、Akt、p-Akt(S473)表达量降低,BK-β1表达量明显增高(P<0.05)。Wortmannin作用后的HCASMC p-Akt(S473)表达量降低,BK-β1表达量明显增加(P<0.05)。结论:PI3K/Akt通路参与糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道的调控。
关键词
糖尿病
大电导钙激活钾通道β1亚基
冠状血管
Keywords
diabetes
large conductance calcium activated potassium channelβ1 subunit
coronal vessels
分类号
R329.26 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
不同浓度二十二碳六烯酸对正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道的激活作用及其机制
夏大云
钱玲玲
郁志明
孙曼青
汤徐
吴莹
党时鹏
季圆
王湘芸
柴强
陆彤
王如兴
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
PI3K/Akt调控糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道的作用机制
焦国庆
李明秋
吴莹
王如兴
胡亚玲
纪丽
LU Tong
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022
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