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CTLA-4在大肠杆菌中的克隆和表达
1
作者
王朝健
Li Yuan
李元
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期154-157,共4页
目的 在原核表达系统大肠杆菌中表达具有生物活性的人毒性 T淋巴细胞相关蛋白-4可溶性部分 (human soluble CTLA-4)。方法 PCR扩增获得 CTLA-4编码基因，利用表达载体 pGEX-2T构建重组质粒 2TC，在 BL21(DE3)宿主菌中表达。观察不同 IPT...
目的 在原核表达系统大肠杆菌中表达具有生物活性的人毒性 T淋巴细胞相关蛋白-4可溶性部分 (human soluble CTLA-4)。方法 PCR扩增获得 CTLA-4编码基因，利用表达载体 pGEX-2T构建重组质粒 2TC，在 BL21(DE3)宿主菌中表达。观察不同 IPTG浓度及诱导时间对蛋白表达的影响并测定其免疫活性。结果 PCR扩增所获 DNA片段与文献报道 CTLA-4序列一致。在重组大肠杆菌中 0.10 mmol/L IPTG诱导 4 h可大量生成相对分子质量 40 000的 GST-CTLA4融合蛋白。 Western blot分析表明原核表达产物 CTLA-4具抗原抗体结合活性。结论 hsCTLA-4可在原核表达系统中表达并具有免疫活性。
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关键词
CTLA-4
基因克隆
原核表达
大肠杆菌
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职称材料
题名
CTLA-4在大肠杆菌中的克隆和表达
1
作者
王朝健
Li Yuan
李元
机构
中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所生物工程室
Department
of
Bioengineering
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期154-157,共4页
文摘
目的 在原核表达系统大肠杆菌中表达具有生物活性的人毒性 T淋巴细胞相关蛋白-4可溶性部分 (human soluble CTLA-4)。方法 PCR扩增获得 CTLA-4编码基因，利用表达载体 pGEX-2T构建重组质粒 2TC，在 BL21(DE3)宿主菌中表达。观察不同 IPTG浓度及诱导时间对蛋白表达的影响并测定其免疫活性。结果 PCR扩增所获 DNA片段与文献报道 CTLA-4序列一致。在重组大肠杆菌中 0.10 mmol/L IPTG诱导 4 h可大量生成相对分子质量 40 000的 GST-CTLA4融合蛋白。 Western blot分析表明原核表达产物 CTLA-4具抗原抗体结合活性。结论 hsCTLA-4可在原核表达系统中表达并具有免疫活性。
关键词
CTLA-4
基因克隆
原核表达
大肠杆菌
Keywords
CTLA-4； gene cloning
prokaryotic expression
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CTLA-4在大肠杆菌中的克隆和表达
王朝健
Li Yuan
李元
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
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