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浓缩苹果汁中扩展青霉菌实时PCR快速检测条件的优化
被引量：
1
1
作者
樊明涛
毕静莹
+2 位作者
刘邻渭
Mansel W Graffith
Haifeng Wang
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第11期84-89,共6页
为了研究苹果汁生产中棒曲霉素产生菌的快速检测,利用实时PCR方法快速检测扩展青霉的可能性,对扩增条件进行优化。在polygatacturonase基因引物设计和传统PCR扩增扩展青霉DNA的基础上,研究实时PCR扩增时退火温度、引物浓度以及底物质量...
为了研究苹果汁生产中棒曲霉素产生菌的快速检测,利用实时PCR方法快速检测扩展青霉的可能性,对扩增条件进行优化。在polygatacturonase基因引物设计和传统PCR扩增扩展青霉DNA的基础上,研究实时PCR扩增时退火温度、引物浓度以及底物质量浓度对扩增效果的影响,以获得最佳的参数。结果表明,用Lightercy-cler实时PCR扩增扩展青霉DNA的最佳退火温度为61℃,最佳引物浓度为0.20-0.40μmol/L,底物质量浓度对实时PCR扩增的影响较小。在以上参数下,可以获得良好的PCR扩增曲线、产物溶解曲线以及清晰的产物条带。研究获得的快速检测扩展青霉的实时PCR参数,可用于浓缩苹果汁工业化生产中扩展青霉的快速检测,也可作为其他微生物实时PCR检测时的方法学参考。
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关键词
苹果汁
扩展青霉
PCR检测
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职称材料
利用T4快速检测T4宿主型大肠杆菌初探
2
作者
刘邻渭
杨公明
Mansel Griffiths
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2008年第12期181-186,共6页
【目的】建立一种定量检测噬菌体宿主菌的简捷方法。【方法】按体积比1∶9将4.4×109pfu/mL的T4工作液和已知活菌浓度的T4宿主型大肠杆菌工作液混合形成模拟样品,立即在37℃150 r/min下作用5 min完成侵染,接着采用离心、微滤分离技...
【目的】建立一种定量检测噬菌体宿主菌的简捷方法。【方法】按体积比1∶9将4.4×109pfu/mL的T4工作液和已知活菌浓度的T4宿主型大肠杆菌工作液混合形成模拟样品,立即在37℃150 r/min下作用5 min完成侵染,接着采用离心、微滤分离技术清除样品中直径0.22μm以下的物质(包括游离T4),同时将颗粒物(包括受侵染的大肠杆菌)截留在微滤膜中。待受侵染大肠杆菌裂解后,用SM缓冲液将子代T4从微滤膜中洗滤出来,收集滤液得到转换样品。通过噬菌斑计数法测出转换样品子代T4数量,分析其与模拟样品T4宿主型大肠杆菌活菌数量的定量关系。【结果】模拟样品T4宿主型大肠杆菌活菌数的对数和转换样品子代T4数量的对数呈一元线性关系;参试菌株和试验条件决定着方程的斜率和截距。【结论】按照上述方法转换样品,并根据转换样品子代T4数量和上述一元线性关系,可以快速测定样品中T4宿主型大肠杆菌的活菌含量。
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关键词
大肠杆菌
T4噬菌体
定量检测
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职称材料
题名
浓缩苹果汁中扩展青霉菌实时PCR快速检测条件的优化
被引量：
1
1
作者
樊明涛
毕静莹
刘邻渭
Mansel W Graffith
Haifeng Wang
机构
西北农林科技大学食品科学与工程学院
canadian research institute for food safety
and
food
Science Department
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第11期84-89,共6页
基金
国家留学基金项目
国家科技支撑计划项目(2006BAK02A24)
陕西省科技攻关项目(2007K01-12)
文摘
为了研究苹果汁生产中棒曲霉素产生菌的快速检测,利用实时PCR方法快速检测扩展青霉的可能性,对扩增条件进行优化。在polygatacturonase基因引物设计和传统PCR扩增扩展青霉DNA的基础上,研究实时PCR扩增时退火温度、引物浓度以及底物质量浓度对扩增效果的影响,以获得最佳的参数。结果表明,用Lightercy-cler实时PCR扩增扩展青霉DNA的最佳退火温度为61℃,最佳引物浓度为0.20-0.40μmol/L,底物质量浓度对实时PCR扩增的影响较小。在以上参数下,可以获得良好的PCR扩增曲线、产物溶解曲线以及清晰的产物条带。研究获得的快速检测扩展青霉的实时PCR参数,可用于浓缩苹果汁工业化生产中扩展青霉的快速检测,也可作为其他微生物实时PCR检测时的方法学参考。
关键词
苹果汁
扩展青霉
PCR检测
Keywords
apple juice
Penicillium expansum
PCR detection
分类号
Q555 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
利用T4快速检测T4宿主型大肠杆菌初探
2
作者
刘邻渭
杨公明
Mansel Griffiths
机构
西北农林科技大学食品学院
华南农业大学食品学院
canadian research institute for food safety
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2008年第12期181-186,共6页
文摘
【目的】建立一种定量检测噬菌体宿主菌的简捷方法。【方法】按体积比1∶9将4.4×109pfu/mL的T4工作液和已知活菌浓度的T4宿主型大肠杆菌工作液混合形成模拟样品,立即在37℃150 r/min下作用5 min完成侵染,接着采用离心、微滤分离技术清除样品中直径0.22μm以下的物质(包括游离T4),同时将颗粒物(包括受侵染的大肠杆菌)截留在微滤膜中。待受侵染大肠杆菌裂解后,用SM缓冲液将子代T4从微滤膜中洗滤出来,收集滤液得到转换样品。通过噬菌斑计数法测出转换样品子代T4数量,分析其与模拟样品T4宿主型大肠杆菌活菌数量的定量关系。【结果】模拟样品T4宿主型大肠杆菌活菌数的对数和转换样品子代T4数量的对数呈一元线性关系;参试菌株和试验条件决定着方程的斜率和截距。【结论】按照上述方法转换样品,并根据转换样品子代T4数量和上述一元线性关系,可以快速测定样品中T4宿主型大肠杆菌的活菌含量。
关键词
大肠杆菌
T4噬菌体
定量检测
Keywords
E. coli
T4
quantitative detection
分类号
R155.5 [医药卫生—营养与食品卫生学]
R378.21 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
浓缩苹果汁中扩展青霉菌实时PCR快速检测条件的优化
樊明涛
毕静莹
刘邻渭
Mansel W Graffith
Haifeng Wang
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
利用T4快速检测T4宿主型大肠杆菌初探
刘邻渭
杨公明
Mansel Griffiths
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2008
0
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职称材料
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