目的研究外源性肿瘤坏死因子β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6和IL-23对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响,并初步探讨其在器官移植免疫中的调节机制。方法用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)刺激小鼠脾单个核细胞4h,将细胞因子与脾单...目的研究外源性肿瘤坏死因子β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6和IL-23对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响,并初步探讨其在器官移植免疫中的调节机制。方法用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)刺激小鼠脾单个核细胞4h,将细胞因子与脾单个核细胞共培养72h,根据加入细胞因子的不同,将培养细胞分为空白对照组、TGF-β组、TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组。流式细胞术分析各组Th17细胞比例,半定量RT-PCR检测各组细胞核孤儿受体mRNA(RORγt mRNA)和IL-17mRNA的表达变化,ELISA测定各组细胞培养上清液中IL-17蛋白浓度。结果空白对照组及TGF-β组未见Th17细胞和RORγt mRNA的表达,TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组Th17细胞比例差异具有统计学意义(0.30%±0.14%vs 0.51%±0.11%,P<0.01),RORγt mRNA的表达差异具有统计学意义(0.217±0.038 vs 0.458±0.127,P<0.01)。空白对照组与TGF-β组IL-17mRNA表达强度差异无统计学意义(0.868±0.222 vs 0.799±0.205,P>0.05),IL-17蛋白浓度差异无统计学意义(90.04±22.56pg/ml vs125.38±27.58pg/ml,P>0.05),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA差异具有统计学意义(1.396±0.359 vs 2.415±0.604,P<0.01),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17蛋白浓度差异具有统计学意义(973.32±217.33pg/ml vs 1498.46±317.27pg/ml,P<0.01)。TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA表达强度、IL-17蛋白浓度均高于空白组与TGF-β组(P<0.01)。结论 TGF-β+IL-6在体外能促进小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌,IL-23能明显增强这种作用。展开更多
目的对临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的肺炎克雷伯菌的耐药性及同源性进行了研究,探讨其流行特点。方法收集2014-2015两年的呼吸病房分离的肺炎克雷伯菌115株,按照NC-CLS/CLSI推荐的确诊试验方法进行产ESBLs的菌株筛选。用纸片扩...目的对临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的肺炎克雷伯菌的耐药性及同源性进行了研究,探讨其流行特点。方法收集2014-2015两年的呼吸病房分离的肺炎克雷伯菌115株,按照NC-CLS/CLSI推荐的确诊试验方法进行产ESBLs的菌株筛选。用纸片扩散(K-B)法,用常见的26种抗生素纸片对分离的产ESBLs的肺炎克雷伯菌进行药敏检测(操作及结果判断参照NCCLS/CLSI2015年标准)。采用凝胶脉冲场电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)对产ESBLs菌株进行染色体DNA分型。结果115株肺炎克雷伯菌产ESBLs60株,药敏结果产ESBLs 60株菌对亚胺培南,美罗培南敏感率为100%;对氨曲南,氨苄西林,哌拉西林及一到四代头孢菌素类基本均耐药。PFGE将产ESBLs肺炎克雷伯菌基因分14个型(A^N),其中A型为流行菌株(35%,21/60)。结论在呼吸病房中产ESBLs的肺炎克雷伯菌比例较大,耐药性严重,并存在着同源性的肺炎克雷伯菌株的流行,应给予足够的重视。PFGE是一种稳定、精确的基因分型方法,适合用作院内感染的同源性分析。展开更多
文摘目的研究外源性肿瘤坏死因子β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6和IL-23对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响,并初步探讨其在器官移植免疫中的调节机制。方法用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)刺激小鼠脾单个核细胞4h,将细胞因子与脾单个核细胞共培养72h,根据加入细胞因子的不同,将培养细胞分为空白对照组、TGF-β组、TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组。流式细胞术分析各组Th17细胞比例,半定量RT-PCR检测各组细胞核孤儿受体mRNA(RORγt mRNA)和IL-17mRNA的表达变化,ELISA测定各组细胞培养上清液中IL-17蛋白浓度。结果空白对照组及TGF-β组未见Th17细胞和RORγt mRNA的表达,TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组Th17细胞比例差异具有统计学意义(0.30%±0.14%vs 0.51%±0.11%,P<0.01),RORγt mRNA的表达差异具有统计学意义(0.217±0.038 vs 0.458±0.127,P<0.01)。空白对照组与TGF-β组IL-17mRNA表达强度差异无统计学意义(0.868±0.222 vs 0.799±0.205,P>0.05),IL-17蛋白浓度差异无统计学意义(90.04±22.56pg/ml vs125.38±27.58pg/ml,P>0.05),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA差异具有统计学意义(1.396±0.359 vs 2.415±0.604,P<0.01),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17蛋白浓度差异具有统计学意义(973.32±217.33pg/ml vs 1498.46±317.27pg/ml,P<0.01)。TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA表达强度、IL-17蛋白浓度均高于空白组与TGF-β组(P<0.01)。结论 TGF-β+IL-6在体外能促进小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌,IL-23能明显增强这种作用。
文摘目的对临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的肺炎克雷伯菌的耐药性及同源性进行了研究,探讨其流行特点。方法收集2014-2015两年的呼吸病房分离的肺炎克雷伯菌115株,按照NC-CLS/CLSI推荐的确诊试验方法进行产ESBLs的菌株筛选。用纸片扩散(K-B)法,用常见的26种抗生素纸片对分离的产ESBLs的肺炎克雷伯菌进行药敏检测(操作及结果判断参照NCCLS/CLSI2015年标准)。采用凝胶脉冲场电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)对产ESBLs菌株进行染色体DNA分型。结果115株肺炎克雷伯菌产ESBLs60株,药敏结果产ESBLs 60株菌对亚胺培南,美罗培南敏感率为100%;对氨曲南,氨苄西林,哌拉西林及一到四代头孢菌素类基本均耐药。PFGE将产ESBLs肺炎克雷伯菌基因分14个型(A^N),其中A型为流行菌株(35%,21/60)。结论在呼吸病房中产ESBLs的肺炎克雷伯菌比例较大,耐药性严重,并存在着同源性的肺炎克雷伯菌株的流行,应给予足够的重视。PFGE是一种稳定、精确的基因分型方法,适合用作院内感染的同源性分析。
