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PCDHA13基因启动子甲基化与乳腺癌的相关性
被引量：
7
1
作者
朱文斌
温宪春
+5 位作者
于海涛
葛斌
刘军
曹维海
刘雷
岳丽玲
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2018年第10期1026-1032,共7页
目的目前关于PCDHA13启动子甲基化在乳腺癌中的作用机制尚未阐明,文中探讨PCDHA13基因启动子甲基化在乳腺癌发生发展中的作用。方法应用MassARRAY质谱甲基化测序检测人乳腺癌组织PCDHA13基因启动子甲基化状态,用培养基配置100μmol/L的5...
目的目前关于PCDHA13启动子甲基化在乳腺癌中的作用机制尚未阐明,文中探讨PCDHA13基因启动子甲基化在乳腺癌发生发展中的作用。方法应用MassARRAY质谱甲基化测序检测人乳腺癌组织PCDHA13基因启动子甲基化状态,用培养基配置100μmol/L的5-氮杂胞苷储存液,取融合度60%的ZR-75-1细胞分别加入终浓度为5μmol/L(低浓度组)和10μmol/L(高浓度组)的5-氮杂胞苷储存液,对照组仅加入未经处理的培养基,重亚硫酸盐测序法和甲基化特异性PCR法检测人乳腺癌细胞中PCDHA13基因启动子甲基化状态,并结合半定量RT-PCR的方法分析PCDHA13基因甲基化状态与其mRNA表达的关系。Western blot、MTT以及DAPI染色检测5-Aza处理对乳腺癌ZR-75-1细胞增殖和凋亡的影响。结果乳腺癌组织中PCDHA13基因启动子在第1,4-6,9,10,11个Cp G位点甲基化程度明显高于正常乳腺组织[(0.263 9±0.157 5) vs (0.161 2±0.170 6)、(0.250 9±0.137 7) vs (0.168 8±0.099 2)、(0.420 4±0.208 7) vs (0.262 1±0.173 1)、(0. 376 1±0.140 7) vs (0.282 4±0.148 6)、(0.392 2±0.129 4) vs (0.307 2±0.149 6)],差异有统计学意义(P <0.05),MDA-MB-231细胞和Bcap-37细胞中PCDHA13基因启动子CG位点甲基化率在40%～100%; MCF-7细胞中PCDHA13基因启动子甲基化率在10%～50%之间,呈现低甲基化状态,ZR-75-1细胞中PCDHA13基因启动子表现为高甲基化状态,第4个CG位点甲基化率为60%,第1、8、12个CG位点甲基化率为90%,其余CG位点甲基化率全部为100%,PCDHA13基因在MDA-MB-231和Bcap-37细胞系中低表达,MCF-7细胞系中高表达,而在ZR-75-1中表达缺失;对照组ZR-75-1细胞仅扩增出甲基化PCR产物,而经5-Aza处理的ZR-75-1细胞甲基化和非甲基化引物均扩增出特异性条带,并且高浓度组明显高于低浓度组(P>0.05)。对照组ZR-75-1细胞PCHDA13基因mRNA表达缺失,经5-Aza处理后,ZR-75-1细胞PCDHA13基因mRNA重新恢复表达,高浓度组PCDHA13基因mRNA表达明显高于低浓度组(P>0.05)。对照组ZR-75-1细胞PCHDA13蛋白表达缺失,经5-Aza处理后,ZR-75-1细胞PCDHA13蛋白重新恢复表达,而且高浓度组PCDHA13蛋白表达水平明显高于低浓度组(P>0.05)。经5-Aza处理后24、48和72 h后,低浓度组细胞生长抑制率均较高浓度组降低(P<0.05)。未经药物处理的ZR-75-1细胞核形态基本正常,未出现细胞凋亡。经5-Aza处理后,部分ZR-75-1细胞出现核固缩、染色质凝集、着色较重的现象。结论乳腺癌中PCDHA13启动子高甲基化状态与其mRNA低表达或缺失有关,ZR-75-1细胞PCDHA13表达可被5-Aza逆转,PCHAD13基因重新表达后不仅抑制细胞增殖,而且促进细胞凋亡。PCDHA13基因异常甲基化有望成为乳腺癌潜在的肿瘤生物标志物。
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关键词
PCDHA13
基因启动子
甲基化
乳腺癌
5-氮杂胞苷
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职称材料
消结安胶囊联合心理及饮食疗法综合治疗乳腺增生100例分析
被引量：
1
2
作者
张玉荣
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期449-449,共1页
关键词
乳腺增生
综合治疗
饮食疗法
消结安
心理
胶囊
2009年
在线阅读
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职称材料
题名
PCDHA13基因启动子甲基化与乳腺癌的相关性
被引量：
7
1
作者
朱文斌
温宪春
于海涛
葛斌
刘军
曹维海
刘雷
岳丽玲
机构
齐齐哈尔
医学院医药科学研究院
齐齐哈尔
医学院基础医学院
齐齐哈尔市第一医院乳腺外科
齐齐哈尔市
第一
医院
病理科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2018年第10期1026-1032,共7页
基金
黑龙江省自然科学基金(H2014100)
文摘
目的目前关于PCDHA13启动子甲基化在乳腺癌中的作用机制尚未阐明,文中探讨PCDHA13基因启动子甲基化在乳腺癌发生发展中的作用。方法应用MassARRAY质谱甲基化测序检测人乳腺癌组织PCDHA13基因启动子甲基化状态,用培养基配置100μmol/L的5-氮杂胞苷储存液,取融合度60%的ZR-75-1细胞分别加入终浓度为5μmol/L(低浓度组)和10μmol/L(高浓度组)的5-氮杂胞苷储存液,对照组仅加入未经处理的培养基,重亚硫酸盐测序法和甲基化特异性PCR法检测人乳腺癌细胞中PCDHA13基因启动子甲基化状态,并结合半定量RT-PCR的方法分析PCDHA13基因甲基化状态与其mRNA表达的关系。Western blot、MTT以及DAPI染色检测5-Aza处理对乳腺癌ZR-75-1细胞增殖和凋亡的影响。结果乳腺癌组织中PCDHA13基因启动子在第1,4-6,9,10,11个Cp G位点甲基化程度明显高于正常乳腺组织[(0.263 9±0.157 5) vs (0.161 2±0.170 6)、(0.250 9±0.137 7) vs (0.168 8±0.099 2)、(0.420 4±0.208 7) vs (0.262 1±0.173 1)、(0. 376 1±0.140 7) vs (0.282 4±0.148 6)、(0.392 2±0.129 4) vs (0.307 2±0.149 6)],差异有统计学意义(P <0.05),MDA-MB-231细胞和Bcap-37细胞中PCDHA13基因启动子CG位点甲基化率在40%～100%; MCF-7细胞中PCDHA13基因启动子甲基化率在10%～50%之间,呈现低甲基化状态,ZR-75-1细胞中PCDHA13基因启动子表现为高甲基化状态,第4个CG位点甲基化率为60%,第1、8、12个CG位点甲基化率为90%,其余CG位点甲基化率全部为100%,PCDHA13基因在MDA-MB-231和Bcap-37细胞系中低表达,MCF-7细胞系中高表达,而在ZR-75-1中表达缺失;对照组ZR-75-1细胞仅扩增出甲基化PCR产物,而经5-Aza处理的ZR-75-1细胞甲基化和非甲基化引物均扩增出特异性条带,并且高浓度组明显高于低浓度组(P>0.05)。对照组ZR-75-1细胞PCHDA13基因mRNA表达缺失,经5-Aza处理后,ZR-75-1细胞PCDHA13基因mRNA重新恢复表达,高浓度组PCDHA13基因mRNA表达明显高于低浓度组(P>0.05)。对照组ZR-75-1细胞PCHDA13蛋白表达缺失,经5-Aza处理后,ZR-75-1细胞PCDHA13蛋白重新恢复表达,而且高浓度组PCDHA13蛋白表达水平明显高于低浓度组(P>0.05)。经5-Aza处理后24、48和72 h后,低浓度组细胞生长抑制率均较高浓度组降低(P<0.05)。未经药物处理的ZR-75-1细胞核形态基本正常,未出现细胞凋亡。经5-Aza处理后,部分ZR-75-1细胞出现核固缩、染色质凝集、着色较重的现象。结论乳腺癌中PCDHA13启动子高甲基化状态与其mRNA低表达或缺失有关,ZR-75-1细胞PCDHA13表达可被5-Aza逆转,PCHAD13基因重新表达后不仅抑制细胞增殖,而且促进细胞凋亡。PCDHA13基因异常甲基化有望成为乳腺癌潜在的肿瘤生物标志物。
关键词
PCDHA13
基因启动子
甲基化
乳腺癌
5-氮杂胞苷
Keywords
PCDHA13
gene promoter
methylation
breast cancer
5-azacitidine
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
消结安胶囊联合心理及饮食疗法综合治疗乳腺增生100例分析
被引量：
1
2
作者
张玉荣
机构
黑龙江省
齐齐哈尔市
第一
医院
肿瘤
乳腺
外科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期449-449,共1页
关键词
乳腺增生
综合治疗
饮食疗法
消结安
心理
胶囊
2009年
分类号
R269.558 [医药卫生—中西医结合]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PCDHA13基因启动子甲基化与乳腺癌的相关性
朱文斌
温宪春
于海涛
葛斌
刘军
曹维海
刘雷
岳丽玲
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2018
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
消结安胶囊联合心理及饮食疗法综合治疗乳腺增生100例分析
张玉荣
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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