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hsa_circ_0007534/miR-498对NSCLC细胞增殖和迁移及侵袭的作用机制 被引量:3
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作者 漆毅 姚檬娜 +2 位作者 隋洪婷 林志国 岳丽玲 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第6期605-611,共7页
目的环状RNA(circRNA)是人类癌症的关键调节因子,circRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床价值和功能研究非常有限。文章旨在评估hsa_circ_0007534对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法将A549细胞接种于12孔板中(1×... 目的环状RNA(circRNA)是人类癌症的关键调节因子,circRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床价值和功能研究非常有限。文章旨在评估hsa_circ_0007534对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法将A549细胞接种于12孔板中(1×105个/孔),待细胞生长融合度约70%时,将细胞依次分为:NC组(不做任何处理)、NC-siRNA组(转染NC-siRNA)、hsa_circ_0007534-siRNA-3组(转染hsa_circ_0007534-siRNA-3)、hsa_circ_0007534-siRNA-3+NC-inhibitor组(转染hsa_circ_0007534-siRNA-3和NC-inhibitor)及hsa_circ_0007534-siRNA-3+miR-498-inhibitor组(转染hsa_circ_0007534-siRNA-3和miR-498-inhibitor)。qRT-PCR检测中hsa_circ_0007534、miR-498的相对表达水平,CCK-8和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,免疫印迹(Western blot)检测Ki-67、E-cadherin及N-cadherin蛋白水平。裸鼠异种移植肿瘤记录肿瘤组织的重量和体积,免疫组化检测肿瘤组织中Ki-67、E-cadherin及N-cadherin的表达。结果hsa_circ_0007534与miR-498存在靶向结合位点。与hsa_circ_0007534-WT+NC-mimics组细胞双荧光素酶活性(1.02±0.10)相比,hsa_circ_0007534-WT+miR-498-mimics组(0.46±0.08)显著降低(P<0.01)。与NC-siRNA组相比,hsa_circ_0007534-siRNA-3组A549细胞中miR-498相对表达水平、E-cadherin阳性细胞率增高(P<0.05),细胞增殖活力及集落形成数量、迁移及侵袭数量、Ki-67和N-Cadherin蛋白水平、肿瘤组织重量和体积、Ki-67与N-Cadherin阳性细胞率均显著降低(P<0.05);与hsa_circ_0007534-siRNA-3+NC-inhibitor组相比,hsa_circ_0007534-siRNA-3+miR-498-inhibitor组A549细胞中miR-498相对表达水平、E-cadherin阳性细胞率降低(P<0.05),细胞增殖活力及集落形成数量、迁移及侵袭数量、Ki-67和N-Cadherin蛋白水平、肿瘤组织重量和体积、Ki-67与N-Cadherin阳性细胞率均显著升高(P<0.05)。结论下调hsa_circ_0007534通过靶向上调miR-498抑制NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 hsa_circ_0007534 非小细胞肺癌 微小RNA-498 增殖 迁移 侵袭
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AGR2对毒胡萝卜素作用下人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响
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作者 林志国 刘佳 +8 位作者 杜娟 刘振艳 彭瑶 皮秀杰 王玉凤 战文娜 李德海 刘颖 邓志会 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1690-1695,共6页
目的:观察anterior gradient 2(AGR2)基因在内质网应激诱导剂毒胡萝卜素作用下对人肺癌NCIH460细胞增殖能力及凋亡的影响。方法:通过慢病毒介导的shRNA建立AGR2基因沉默的稳定细胞系;采用集落形成实验检测AGR2在毒胡萝卜素作用下对细胞... 目的:观察anterior gradient 2(AGR2)基因在内质网应激诱导剂毒胡萝卜素作用下对人肺癌NCIH460细胞增殖能力及凋亡的影响。方法:通过慢病毒介导的shRNA建立AGR2基因沉默的稳定细胞系;采用集落形成实验检测AGR2在毒胡萝卜素作用下对细胞增殖能力的影响;流式细胞术分析在毒胡萝卜素作用下AGR2对细胞凋亡的影响。结果:成功构建AGR2基因沉默的稳定细胞系,Western blot结果显示AGR2的蛋白表达水平显著降低(P<0.01);在未经药物处理条件下,AGR2基因缺失对NCI-H460细胞集落形成率及凋亡无显著影响;毒胡萝卜素作用24 h后,AGR2基因沉默的细胞集落形成率远低于对照组(P<0.05);流式细胞术检测结果显示AGR2基因缺失提高了毒胡萝卜素诱导的细胞凋亡率(P<0.05)。结论:AGR2基因缺失不影响正常条件下NCI-H460细胞的存活及凋亡能力,但可使毒胡萝卜素作用下细胞的增殖能力显著下降,细胞凋亡率显著提高。本研究揭示了AGR2在内质网应激状态下促进肺癌细胞增殖和减轻细胞凋亡的作用,为进一步探讨AGR2在肺癌发生发展及耐药性中的作用提供了理论依据。 展开更多
关键词 AGR2基因 内质网应激 毒胡萝卜素 细胞凋亡 肺癌
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