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一种新型具有纤溶活性的沙蚕金属蛋白酶的分离纯化及鉴定 被引量:13
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作者 邓志会 孙贺 +3 位作者 林岩 王国忠 金莉 洪敏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期768-774,共7页
通过硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose FF阴离子交换色谱、CM-Sepharose FF阳离子交换色谱和Sephacryl S-100 HR凝胶过滤色谱,从沙蚕体内分离纯化出一种新型的具有纤溶活性的金属蛋白酶,命名为NVMP.采用SDS-PAGE和MALDI-TOF MS质谱检测,... 通过硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose FF阴离子交换色谱、CM-Sepharose FF阳离子交换色谱和Sephacryl S-100 HR凝胶过滤色谱,从沙蚕体内分离纯化出一种新型的具有纤溶活性的金属蛋白酶,命名为NVMP.采用SDS-PAGE和MALDI-TOF MS质谱检测,该酶是一种分子质量为28~32 kD的单链蛋白,等电聚焦电泳显示其等电点为8.0.NVMP酶活性被EGTA完全性抑制,表明其是一种典型的金属蛋白酶,最适温度为40℃,最适pH为6,Cu2+、Co2+和Zn2+可阻断其酶活性,而Ca2+和Mg2+可增强蛋白酶活性.经肽指纹图谱分析发现,NVMP是一种未知的新蛋白.NVMP可直接水解纤维蛋白,也可通过激活纤溶酶原转变成纤溶酶的方式,间接水解纤维蛋白.因此,NVMP对预防和治疗血栓性疾病具有一定的药用价值. 展开更多
关键词 沙蚕 金属蛋白酶 纯化与鉴定 纤维蛋白水解活性
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