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HO-1不同活性真核表达载体的构建及鉴定
1
作者
高涵
周涛
+2 位作者
张春晶
李淑艳
陈宏月
《中国卫生产业》
2014年第25期79-80,共2页
目的构建含有HO-1基因的重组载体并将其稳定转染到肝癌细胞系HepG2中。方法采用PCR技术扩增wtHO-1/mHO-1G143H基因片断,EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后连接pcDNA3.1(+)载体与目的片段,转化DH5a菌株感受细胞,获得阳性重组质粒。采用脂质体法转染H...
目的构建含有HO-1基因的重组载体并将其稳定转染到肝癌细胞系HepG2中。方法采用PCR技术扩增wtHO-1/mHO-1G143H基因片断,EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后连接pcDNA3.1(+)载体与目的片段,转化DH5a菌株感受细胞,获得阳性重组质粒。采用脂质体法转染HepG2细胞系,G418筛选抗性克隆,利用半定量RT-PCR、Western blot检测转染细胞系中HO-1基因的表达。结果成功制作了HO-1活性增高和降低的细胞模型。结论 HO-1不同活性真核表达载体的成功构建,为进一步研究HO-1的功能奠定了基础。
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关键词
HO-1
真核表达载体
稳定转染
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题名
HO-1不同活性真核表达载体的构建及鉴定
1
作者
高涵
周涛
张春晶
李淑艳
陈宏月
机构
齐齐哈尔
医学院
生物化学与分子生物学教研室
齐齐哈尔医学院第一附属医院普通外科
出处
《中国卫生产业》
2014年第25期79-80,共2页
基金
黑龙江省教育厅项目(12541929)
文摘
目的构建含有HO-1基因的重组载体并将其稳定转染到肝癌细胞系HepG2中。方法采用PCR技术扩增wtHO-1/mHO-1G143H基因片断,EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后连接pcDNA3.1(+)载体与目的片段,转化DH5a菌株感受细胞,获得阳性重组质粒。采用脂质体法转染HepG2细胞系,G418筛选抗性克隆,利用半定量RT-PCR、Western blot检测转染细胞系中HO-1基因的表达。结果成功制作了HO-1活性增高和降低的细胞模型。结论 HO-1不同活性真核表达载体的成功构建,为进一步研究HO-1的功能奠定了基础。
关键词
HO-1
真核表达载体
稳定转染
分类号
R318 [医药卫生—生物医学工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HO-1不同活性真核表达载体的构建及鉴定
高涵
周涛
张春晶
李淑艳
陈宏月
《中国卫生产业》
2014
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