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抗人蔗糖酶卵黄抗体的制备及其稳定性和体外活性研究 被引量:4
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作者 邵敏 王新颖 +5 位作者 卢毓璁 王敏 冯昆 魏妮娜 杜凤霞 周鹤峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1785-1789,共5页
目的:制备抗人蔗糖酶(Sucrase,SUC)卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin Y,Ig Y)并对其稳定性、体外活性进行研究。方法:采用人SUC蛋白为抗原,免疫海兰灰蛋鸡,水稀释和盐析法提取纯化Ig Y;间接ELISA法监测抗体效价变化并评价其稳定... 目的:制备抗人蔗糖酶(Sucrase,SUC)卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin Y,Ig Y)并对其稳定性、体外活性进行研究。方法:采用人SUC蛋白为抗原,免疫海兰灰蛋鸡,水稀释和盐析法提取纯化Ig Y;间接ELISA法监测抗体效价变化并评价其稳定性;SDS-PAGE和Western blot分析Ig Y的纯度和特异性;PNPG法测Ig Y对α-葡萄糖苷酶的体外抑制效果。结果:初次免疫10 d后检测到Ig Y,40 d后效价最高达到1∶12 800;提取的Ig Y重链和轻链分别在65 k D和25 k D处,且能够与抗原蛋白特异性结合;29~69℃范围内水浴15 min和p H 4~7之间37℃水浴4 h,抗体效价无变化;胰蛋白酶与胃蛋白酶作用Ig Y2 h,抗体效价降至一半,延长作用时间,Ig Y对胃蛋白酶耐受力较胰蛋白酶耐受力更强;Ig Y对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,呈现剂量相关性,半抑制浓度(IC50)值为0.540 mg/ml。结论:抗人蔗糖酶卵黄抗体(S-Ig Y)的成功制备为后续用于2型糖尿病大鼠模型体内实验研究奠定基础。 展开更多
关键词 蔗糖酶 卵黄抗体 稳定性
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6种中药挥发油体外抑杀人体蠕形螨活性及安全性研究 被引量:6
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作者 刘继鑫 李朝品 +1 位作者 张浩 孙艳宏 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1048-1051,共4页
目的:筛选体外抗螨有效的中药挥发油。方法:采用透明胶带粘贴法获取蠕形螨,镜下观察不同中药挥发油对毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨的抑杀作用,并设立新肤螨灵软膏为阳性对照、生理盐水为阴性对照,进行体外抗螨活性筛选。应用健康家兔进行皮... 目的:筛选体外抗螨有效的中药挥发油。方法:采用透明胶带粘贴法获取蠕形螨,镜下观察不同中药挥发油对毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨的抑杀作用,并设立新肤螨灵软膏为阳性对照、生理盐水为阴性对照,进行体外抗螨活性筛选。应用健康家兔进行皮肤刺激实验和急性皮肤毒性实验。结果:丁香、枳壳、细辛、桂皮、良姜和花椒6种中药的挥发油具有较好的抑杀蠕形螨效果,对2种蠕形螨均有明显的抑杀作用,其中丁香、细辛2种中药挥发油对毛囊蠕形螨的抑杀效果优于皮脂蠕形螨(P<0.05)。丁香挥发油对家兔完整皮肤的刺激评分为0.2,破损皮肤的刺激评分为0.3,无明显毒性。结论:丁香、枳壳等6种中药挥发油具有良好的体外抑杀蠕形螨活性,其中丁香挥发油具有较强的体外抗蠕形螨活性且具有皮肤安全性。 展开更多
关键词 中草药 挥发油 人体蠕形螨 抗寄生虫药
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不同提取方法对丁香精油体外杀螨效果的影响 被引量:8
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作者 刘继鑫 李朝品 孙艳宏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期628-631,635,共5页
目的探讨不同提取方法获取的丁香精油对蠕形螨的体外抑杀效果。方法采用水蒸气蒸馏法、乙醇回流法和超临界二氧化碳萃取法获取丁香精油;采用挤黏结合法获取蠕形螨;镜下观察丁香精油对人体蠕形螨的抑杀效果。结果3种提取方法获取的丁... 目的探讨不同提取方法获取的丁香精油对蠕形螨的体外抑杀效果。方法采用水蒸气蒸馏法、乙醇回流法和超临界二氧化碳萃取法获取丁香精油;采用挤黏结合法获取蠕形螨;镜下观察丁香精油对人体蠕形螨的抑杀效果。结果3种提取方法获取的丁香精油对蠕形螨均有较好的抑杀效果,差异无统计学意义,但是超临界二氧化碳萃取法与水蒸气蒸馏法对两种人体蠕形螨抑杀效果比较,差异有统计学意义(P〈0.005),3种提取方法获取的丁香精油对两种人体蠕形螨的抑杀效果与对照组比较,差异均有统计学意义(P〈0.005)。超临界二氧化碳萃取法获取的丁香精油含量最高,3~5min内抑杀效果优于其他方法。结论超临界二氧化碳萃取法因提取率高,提取时间短,无溶剂残留,抑杀蠕形螨效果好,是选择和应用含挥发油类中药材进行抑杀蠕形螨实验的一种首选提取方法。 展开更多
关键词 提取方法 丁香精油 蠕形螨 抑杀
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黄芪皂苷Ⅱ通过阻断NOX/ROS/AKT/mTOR信号通路抑制低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增生 被引量:1
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作者 金海峰 姚立杰 +6 位作者 杜凤霞 姜杨 李雪梅 张彧婷 王冠 刘吉成 周忠光 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期219-224,共6页
目的探讨黄芪皂苷Ⅱ(AS-Ⅱ)对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)过度增生的抑制作用及相关机制。方法将大鼠原代PASMC分为常氧组、低氧组、低氧联合(20、40、80)μmol/L AS-Ⅱ处理组、低氧联合还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(N... 目的探讨黄芪皂苷Ⅱ(AS-Ⅱ)对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)过度增生的抑制作用及相关机制。方法将大鼠原代PASMC分为常氧组、低氧组、低氧联合(20、40、80)μmol/L AS-Ⅱ处理组、低氧联合还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)抑制剂VAS2870处理组,在常氧(210 mL/L O_(2))或低氧(20 mL/L O_(2))条件下培养24 h。利用CCK-8法检测细胞增殖活性,二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS),Western blot法检测细胞蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的mTOR(p-mTOR)、增殖细胞核抗原(PCNA)以及NOX1、NOX4的蛋白表达。结果与常氧组相比,低氧组PASMC明显增生,细胞内ROS含量显著升高,PCNA、p-AKT、p-mTOR、NOX1、NOX4蛋白均表达增加。AS-Ⅱ处理抑制低氧诱导的PASMC增生,降低细胞ROS水平,并抑制PCNA、p-AKT、p-mTOR、NOX1、NOX4的蛋白表达。VAS2870处理后也有类似改变。结论AS-Ⅱ抑制低氧诱导的PASMC增生,可能与阻断NOX/ROS/AKT/mTOR信号通路相关。 展开更多
关键词 黄芪皂苷Ⅱ(AS-Ⅱ) 缺氧 肺动脉平滑肌细胞(PASMC) 活性氧(ROS) NADPH氧化酶(NOX)
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榄香烯提高肿瘤化疗药物疗效及抗免疫抑制作用的研究 被引量:17
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作者 姚淑娟 刘伯阳 吕丽艳 《中医药学刊》 2006年第3期456-457,共2页
目的:研究榄香烯对荷瘤鼠化疗后免疫功能的影响以及榄香烯与化疗药物联合应用的治疗效果。方法:以H22荷瘤C57BL/6小鼠为模型,系统地研究榄香烯对化疗荷瘤鼠瘤重和脾细胞功能的影响。结果:榄香烯对荷瘤鼠化疗所引起的免疫功能低下具有明... 目的:研究榄香烯对荷瘤鼠化疗后免疫功能的影响以及榄香烯与化疗药物联合应用的治疗效果。方法:以H22荷瘤C57BL/6小鼠为模型,系统地研究榄香烯对化疗荷瘤鼠瘤重和脾细胞功能的影响。结果:榄香烯对荷瘤鼠化疗所引起的免疫功能低下具有明显的恢复作用,可显著提高化疗荷瘤鼠T细胞转化能力,明显促进化疗荷瘤鼠IL-2产生能力;并能协同化疗药物杀伤肿瘤细胞,提高疗效。结论:该结果对临床联合应用榄香烯与化疗药物进行抗肿瘤治疗具有重要指导意义。 展开更多
关键词 榄杳烯 化疗 荷瘤小鼠 白介素-2 肿瘤
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重楼皂苷Ⅰ抑制肺腺癌A549细胞侵袭转移作用机制研究 被引量:8
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作者 牟海军 赵丹 +3 位作者 石寒冰 毕红霞 姜云飞 刘国华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1309-1314,共6页
目的:通过研究重楼皂苷Ⅰ对人肺腺癌A549细胞侵袭转移能力及MMP2、E-cad表达的影响,探讨重楼皂苷Ⅰ抑制肺腺癌A549细胞侵袭转移的作用机制。方法:(1)应用CCK8法检测重楼皂苷Ⅰ对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。(2)应用Transwell及细胞划... 目的:通过研究重楼皂苷Ⅰ对人肺腺癌A549细胞侵袭转移能力及MMP2、E-cad表达的影响,探讨重楼皂苷Ⅰ抑制肺腺癌A549细胞侵袭转移的作用机制。方法:(1)应用CCK8法检测重楼皂苷Ⅰ对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。(2)应用Transwell及细胞划痕实验检测重楼皂苷Ⅰ对人肺腺癌A549细胞侵袭转移能力的影响。(3)应用Western blot、Qrt-PCR检测重楼皂苷Ⅰ对肺腺癌A549细胞MMP2、E-cad表达的影响。结果:(1)细胞增殖实验结果表明浓度为0. 25、0. 5、1、2、4、8、16 mg/L重楼皂苷Ⅰ对肺腺癌A549细胞增殖的抑制率分别为(2. 10±1. 2)%、(11. 98±2. 4)%、(24. 32±3. 5)%、(38. 76±4. 3)%、(49. 25±4. 9)%、(62. 55±5. 3)%、(83. 85±6. 4)%,各抑制率比较差异有统计学意义(P<0. 05);并且随着剂量的增加抑制率升高,抑制率与剂量呈正相关,具有量效关系。(2)Transwell及细胞划痕实验结果表明不同浓度的重楼皂苷Ⅰ与空白对照组比较,划痕愈合距离缩短,穿过的细胞数量减少,具有抑制细胞侵袭转移的能力,随着剂量的增加,抑制作用增强,各组比较差异有统计学意义(P<0. 05)。(3)Western blot、Qrt-PCR实验结果表明不同浓度的重楼皂苷Ⅰ与空白对照组比较,MMP2表达降低,E-cad表达升高,随着剂量的增加,变化幅度增大,各组比较差异有统计学意义(P<0. 05),说明重楼皂苷Ⅰ可以下调MMP2表达,上调E-cad表达,并且有量效依赖关系。结论:重楼皂苷Ⅰ具有抑制肺腺癌A549细胞侵袭转移的能力,作用机制可能为通过下调MMP2的表达、上调E-cad的表达实现。 展开更多
关键词 肺腺癌 重楼皂苷Ⅰ 侵袭转移 MMP2 E-CAD
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益肺解毒方联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的影响 被引量:6
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作者 牟海军 赵丹 +1 位作者 石寒冰 毕红霞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1607-1611,共5页
目的研究益肺解毒方联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的影响。方法 CCK8法、流式细胞术分别检测高剂量益肺解毒方、顺铂、两药联合对A549细胞增殖、凋亡的影响,Transwell、细胞划痕实验检测三者对A549细胞侵袭转移的影响,Western blot、qRT-... 目的研究益肺解毒方联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的影响。方法 CCK8法、流式细胞术分别检测高剂量益肺解毒方、顺铂、两药联合对A549细胞增殖、凋亡的影响,Transwell、细胞划痕实验检测三者对A549细胞侵袭转移的影响,Western blot、qRT-PCR检测三者对A549细胞Bax、Bcl-2、MMP2、E-cad表达的影响。结果高剂量益肺解毒方、顺铂、两药联合对A549细胞增殖均有显著抑制作用(P<0.05),以两药联合最强,联合指数为1.21;三者均可明显诱导A549细胞凋亡(P<0.05),两药联合组更显著(P<0.05)。与空白对照组比较,3组划痕愈合距离缩短,穿过的细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05),两药联合组更显著(P<0.05)。与空白对照组比较,3组Bax、E-cad表达显著升高,Bcl-2、MMP2表达显著降低(P<0.05),两药联合组变化更明显(P<0.05)。结论益肺解毒方联合顺铂对抑制人肺腺癌A549细胞具有联合增效作用,其机制可能与抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡(促进Bax表达,抑制Bcl-2表达)、抑制细胞侵袭转移(下调MMP2表达,上调E-cad表达)有关。 展开更多
关键词 益肺解毒方 顺铂 人肺腺癌A549细胞
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