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UPEC双组分信号系统KguS/KguR调控基因缺失株的构建及其生长特性研究
被引量：
1
1
作者
李国强
朱丽萍
+2 位作者
朱丽臻
陈蕾蕾
颜世敢
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期1113-1117,共5页
[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC) CFT073株的双组分信号系统Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性。[方法]运用Red重组系统将带有c5032—c5037...
[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC) CFT073株的双组分信号系统Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性。[方法]运用Red重组系统将带有c5032—c5037基因同源臂的氯霉素抗性基因取代c5032—c5037基因,在温度敏感型质粒p CP20作用下消除氯霉素抗性基因,构建基因缺失株CFT073Δc5032—c5037,用PCR和基因测序验证基因敲除是否成功,测定有氧和厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中培养不同时间的菌液D600值。[结果]构建了CFT073Δc5032—c5037,PCR验证及基因测序结果均表明已成功敲除c5032—c5037基因;厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中生长比野生型菌株CFT073缓慢,且差异极显著(P<0.01),但在有氧条件下二者的生长无显著差异。[结论]成功构建了基因缺失株CFT073Δc5032—c5037,并试验证实Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因在厌氧条件下参与α-酮戊二酸的利用,为进一步研究Kgu S/KguR在UPEC中的代谢适应机制奠定了基础。
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关键词
尿道致病性大肠杆菌
KguS/KguR
c5032-c5037基因
RED重组系统
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职称材料
题名
UPEC双组分信号系统KguS/KguR调控基因缺失株的构建及其生长特性研究
被引量：
1
1
作者
李国强
朱丽萍
朱丽臻
陈蕾蕾
颜世敢
机构
齐鲁
工业
大学
(
山东省
科学院
)
生物工程
学院
/山东省
微
生物工程
重点
实验室
山东省
临沂市相公中心医院
山东省
农业
科学院
农产品研究所
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期1113-1117,共5页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFC1601404)
山东省自然科学基金项目(ZR2018LC003)
+2 种基金
国家自然科学基金项目(31470243)
山东省重点研发计划项目(2014GSF120006)
山东省研究生教育创新计划项目(SDYY14024)
文摘
[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC) CFT073株的双组分信号系统Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性。[方法]运用Red重组系统将带有c5032—c5037基因同源臂的氯霉素抗性基因取代c5032—c5037基因,在温度敏感型质粒p CP20作用下消除氯霉素抗性基因,构建基因缺失株CFT073Δc5032—c5037,用PCR和基因测序验证基因敲除是否成功,测定有氧和厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中培养不同时间的菌液D600值。[结果]构建了CFT073Δc5032—c5037,PCR验证及基因测序结果均表明已成功敲除c5032—c5037基因;厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中生长比野生型菌株CFT073缓慢,且差异极显著(P<0.01),但在有氧条件下二者的生长无显著差异。[结论]成功构建了基因缺失株CFT073Δc5032—c5037,并试验证实Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因在厌氧条件下参与α-酮戊二酸的利用,为进一步研究Kgu S/KguR在UPEC中的代谢适应机制奠定了基础。
关键词
尿道致病性大肠杆菌
KguS/KguR
c5032-c5037基因
RED重组系统
Keywords
uropathogenic Escherichia coli
KguS/KguR
c5032-c5037 genes
Red recombination system
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
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被引量
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1
UPEC双组分信号系统KguS/KguR调控基因缺失株的构建及其生长特性研究
李国强
朱丽萍
朱丽臻
陈蕾蕾
颜世敢
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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