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基于rDNA测序的连作大豆土壤微生物群落变化规律研究 被引量:1
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作者 曲晓华 戴艳婷 赵晓燕 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期632-640,共9页
为寻找连作障碍与土壤微生物群落之间的联系,从土壤微生物群落生态的角度研究大豆连作障碍的机理,以大豆正茬、连作4,6,8和10年的大豆盛花期土体和根际土壤为研究对象,采用16S/18S rDNA PCR-DGGE方法,对比连作不同年份土壤中细菌和真菌... 为寻找连作障碍与土壤微生物群落之间的联系,从土壤微生物群落生态的角度研究大豆连作障碍的机理,以大豆正茬、连作4,6,8和10年的大豆盛花期土体和根际土壤为研究对象,采用16S/18S rDNA PCR-DGGE方法,对比连作不同年份土壤中细菌和真菌种群结构的变化规律,并对差异性电泳条带进行测序比对。结果显示:聚类分析表明,连作不同年份的土体土聚在一簇,根际土聚在另一簇,土体土细菌和真菌群落结构明显不同于根际土壤;16S rDNA的DGGE图谱表明,土体细菌群落没有发现明显的条带变化,根际细菌种群出现了明显的变化,变化较大的细菌种群经序列比对表明多为Proteobacterium,是一种固氮菌;18S rDNA的DGGE图谱表明,各处理间真菌结构存在一定差异和变化,不同处理间一些条带出现或消失,变化较大的真菌种群经序列比对表明多为Trichosporon pullulans、Temellomycete、Phoma sp.、Cladosporium cladosporioides、Trichosporon pullulans和Cyathus striatus。结果说明细菌和真菌的根际效应很明显,连作大豆细菌种群变化不大,对真菌种群结构影响较大,研究结果可为大豆连作障碍机理研究提供科学依据。 展开更多
关键词 大豆 连作 土壤微生物 细菌 真菌 种群结构 RDNA
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木霉缓解外源草酸对黄瓜幼苗毒害的作用研究
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作者 吴晓青 任何 +4 位作者 吕玉平 赵晓燕 周红姿 张新建 杨合同 《山东农业科学》 北大核心 2022年第8期123-129,共7页
为了研究木霉(Trichoderma)在缓解外源草酸对植物毒害上的作用,本研究以黄瓜幼苗为试材,设置10、20、30、50、80 mmol/L草酸及相应的接种木霉处理,以清水、PDB培养基和木霉发酵滤液处理为对照,通过表型观察和中毒指数计算分析其对黄瓜... 为了研究木霉(Trichoderma)在缓解外源草酸对植物毒害上的作用,本研究以黄瓜幼苗为试材,设置10、20、30、50、80 mmol/L草酸及相应的接种木霉处理,以清水、PDB培养基和木霉发酵滤液处理为对照,通过表型观察和中毒指数计算分析其对黄瓜幼苗生长的影响,同时分析叶片中抗病和抗氧化酶包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。结果表明,草酸浓度低于30 mmol/L时,接种木霉明显缓解了草酸对黄瓜幼苗的毒害作用。相较于PDB培养基对照,添加不同浓度的草酸均显著提高了两种抗病相关酶(PAL和PPO)的活性,显著降低了SOD活性,CAT活性除20、80 mmol/L浓度下显著升高外其余差异不显著;在相应浓度草酸处理中接种木霉后,PAL活性显著降低,PPO活性除在30、50 mmol/L浓度下显著升高外其余均显著降低,SOD活性均不同程度地降低,CAT活性除在10、50 mmol/L浓度下无显著差异外其余均显著降低。综上,接种木霉能有效缓解低浓度(10~20 mmol/L)外源草酸对黄瓜幼苗的毒害,对系统抗性酶活性产生了不同的影响,这为进一步研究木霉对植物响应外源草酸胁迫的影响提供了参考。 展开更多
关键词 木霉 外源草酸 黄瓜幼苗 毒害作用 抗性酶活性
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玉米穗腐病菌的拮抗菌筛选、鉴定及降解DON毒素能力测定 被引量:4
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作者 周红姿 周方园 +6 位作者 段成鼎 吴晓青 赵晓燕 谢雪迎 张广志 范素素 张新建 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2021年第5期1016-1023,共8页
穗腐病是玉米生产上的重要病害,在造成产量损失的同时,产生的毒素严重危害人畜健康。为获得兼具降解毒素功能的玉米穗腐病菌的生防菌株,以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)毒素为靶标,从玉米病穗上分离筛选到一株能够降解该毒素... 穗腐病是玉米生产上的重要病害,在造成产量损失的同时,产生的毒素严重危害人畜健康。为获得兼具降解毒素功能的玉米穗腐病菌的生防菌株,以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)毒素为靶标,从玉米病穗上分离筛选到一株能够降解该毒素的细菌菌株TP,经菌落形态特征、结合16Sr DNA和gyrB基因序列分析,初步鉴定为贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis。对峙试验和复筛共培养结果显示,菌株TP对禾谷镰孢F18的抑制率分别达到70.63%和99.5%。经HPLC检测,TP在含DON的无机盐溶液中培养10 d后,其对DON的降解率为98.97%。以上研究结果表明,贝莱斯芽胞杆菌TP能拮抗禾谷镰孢菌,且能高效降解DON毒素,该菌株在防治禾谷镰孢菌引起的玉米穗腐病以及降低毒素危害中具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 降解 贝莱斯芽胞杆菌 禾谷镰孢菌
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辣椒根际细菌的分离筛选及回接辣椒促生效果 被引量:9
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作者 吴晓青 赵晓燕 +5 位作者 周方园 范素素 张广志 谢雪迎 周红姿 张新建 《山东农业科学》 北大核心 2022年第2期86-94,共9页
为验证在种苗基质培养中添加作物自身根际细菌的促生效应,本研究以辣椒为研究对象,利用16S rDNA高通量测序分析其根际细菌的组成特征,通过平板培养分离纯化辣椒特征细菌群落;对分离的根际细菌采用对峙试验分析其对9种辣椒病原菌的抑制作... 为验证在种苗基质培养中添加作物自身根际细菌的促生效应,本研究以辣椒为研究对象,利用16S rDNA高通量测序分析其根际细菌的组成特征,通过平板培养分离纯化辣椒特征细菌群落;对分离的根际细菌采用对峙试验分析其对9种辣椒病原菌的抑制作用,采用平板筛选的方法分析其解磷、铁载体和IAA活性;利用基质盆栽试验将筛选的活性菌株单独或混合接种同品种辣椒,测定其鲜重、根长和叶面积,验证菌株促生效果。结果表明,在辣椒3个生长期(幼苗期、初花期、结果期)相对丰度均在前30的细菌属有14个,通过平板分离鉴定得到其中7个属的82株细菌。通过抑菌试验及对促生指标的检测,筛选出15株同时具有抑菌及促生活性的细菌进行基质盆栽试验,结果表明,多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)W33等9株菌显著提高根鲜重,解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)W3-F9等13株菌显著提高根长,多粘类芽孢杆菌W33显著提高地上部鲜重,根瘤菌(Rhizobium sp.)W38-2等4株菌显著提高根冠比,其中多粘类芽孢杆菌W33对辣椒的促生作用最显著,混合菌接种的促生效果整体优于单菌接种。 展开更多
关键词 辣椒根际细菌 16S rDNA高通量测序 平板筛选 基质盆栽试验 促生效果
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葱地种蝇幼虫伴生细菌多样性及两种培养基分离效果比较 被引量:5
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作者 刘梅 张新建 周方园 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期84-95,共12页
【目的】探索蒜蛆幼虫伴生细菌的多样性,并比较两种常用培养基对其伴生细菌的分离效果,为开展蒜蛆伴生细菌研究提供技术指导。【方法】采用高通量扩增子测序方法检测蒜蛆幼虫体表和肠道的细菌多样性;使用LB和TSB从蒜蛆幼虫的体表和肠道... 【目的】探索蒜蛆幼虫伴生细菌的多样性,并比较两种常用培养基对其伴生细菌的分离效果,为开展蒜蛆伴生细菌研究提供技术指导。【方法】采用高通量扩增子测序方法检测蒜蛆幼虫体表和肠道的细菌多样性;使用LB和TSB从蒜蛆幼虫的体表和肠道分离细菌,并比较两种培养基分离结果、测序结果和两种培养基分离效果的差异。【结果】高通量测序从蒜蛆幼虫体表和肠道共检测到4个门、66个科、115个属的细菌,其中绝大部分不能够鉴定到种。使用LB培养基从蒜蛆幼虫体表和肠道共分离得到463株细菌,鉴定后共得到29种细菌,分别属于11个科18个属。使用TSB培养基从蒜蛆幼虫体表和肠道分离得到391株细菌,经测序后共鉴定到44种细菌,分别属于19个科28个属。总体来说,TSB分离到的细菌种类更多,部分细菌可同时用LB与TSB分离到;此外,与高通量测序结果相比,两种培养基均只能分离到很小一部分种类的细菌。【结论】在蒜蛆伴生细菌的分离试验中,最好同时使用两种培养基对细菌进行分离,以获得更多种类的细菌。 展开更多
关键词 蒜蛆 肠道菌 分离鉴定 微生物多样性
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基质栽培黄瓜根际细菌多样性及促生细菌的筛选 被引量:6
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作者 周方园 高云霄 +3 位作者 赵晓燕 张广志 谢雪迎 张新建 《山东农业科学》 北大核心 2022年第4期69-81,共13页
根际微生物是筛选作物有益菌的重要来源,以往主要从土壤栽培的健康作物根际分离有益菌。但近年来栽培基质广泛使用,因此,有必要从基质栽培的作物根际筛选有益菌,为未来开发适应基质栽培的菌剂提供材料和技术支持。本研究使用高通量测序... 根际微生物是筛选作物有益菌的重要来源,以往主要从土壤栽培的健康作物根际分离有益菌。但近年来栽培基质广泛使用,因此,有必要从基质栽培的作物根际筛选有益菌,为未来开发适应基质栽培的菌剂提供材料和技术支持。本研究使用高通量测序技术对基质栽培的黄瓜根际细菌进行多样性检测,使用TSB培养基从中分离细菌并结合16S rRNA进行鉴定,随后通过固氮、解磷、产吲哚乙酸、产铁载体、产ACC脱氨酶平板定性筛选促生菌株,最后通过盆栽试验验证促生菌株活性。结果表明,基质栽培黄瓜根际细菌分属于5门6纲16目23科50属,其中丰度较高的属包括假苯基杆菌属(Phenylobacterium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、食酸菌属(Acidovorax)、黄杆菌属(Flavobacterium)、砂单胞菌属(Arenimonas)、新草螺菌属(Noviherbaspirillum)、嗜甲基菌属(Methylophilus)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)等。通过分离得到48株细菌,共26个种,从中筛选到促生细菌共16株,其中固氮菌4株、解磷菌3株、产吲哚乙酸菌3株、产ACC脱氨酶菌9株、产铁载体菌8株。黄瓜盆栽试验表明,上述16株细菌中D10、C4、C9可显著提高根干重;菌株C9、F4、D10、C4等可显著提高茎干重;菌株C4可显著提高根茎比;菌株C9、D10、F4、C4等可显著提高植株干重;菌株D10、C4、C9等可显著提高壮苗指数。总体来说,菌株D10(B.aquimaris)、C9(P.alcaligenes)、C4(B.endophyticus)对黄瓜促生效果明显,可在黄瓜基质栽培中使用。 展开更多
关键词 黄瓜 根际促生菌 多样性 无土栽培 育苗基质
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