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河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析
被引量:
3
1
作者
李思远
付新成
+10 位作者
袁雪松
毛立
蔡旭航
孙心如
黄金
谢玲玲
王府
周华
张琪
李基棕
李彬
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期649-659,共11页
牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还...
牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还会导致母牛生殖功能异常,这些疾病对畜牧业造成巨大的经济损失。为了解牛主要病毒性腹泻病原流行情况,本次试验通过PCR检测方法对我国河北地区323份腹泻牛粪样品进行常见9种病毒性牛腹泻病原进行检测。结果显示,BVDV阳性检出率1.85%(6/323)、BCoV阳性检出率14.24%(46/323)、BRV阳性检出率57.89%(187/323)、BoAstV阳性检出率0.31%(1/323)、BoNeV阳性检出率10.84%(35/323)、BNoV阳性检出率4.33%(14/323)、MRV阳性检出率2.48%(8/323)、BToV阳性检出率4.64%(15/323)、BKoV阳性检出率11.76%(38/323)。混合感染共有76份,占比23.53%(76/323)。HBLF2302株的全基因序列、S、HE、N、M和E基因进行同源性和遗传进化分析发现,HBLF2302与BCoV/NMG1/2022基因同源性最高,为GIIb亚型。基于氨基酸序列比对和HBLF2302的S蛋白三级结构预测发现,在S蛋白中157号位突变为157T,854号位点突变为854I。318V为独特突变,改变了与侧链残基的作用力,与631C形成氢键连接。并发现中国株区别于其它地区的GⅡb亚型,位于ORF1a区域有三个独特位点。本研究丰富了牛腹泻病原的流行病学数据,为牛腹泻病的防控奠定基础。
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关键词
病毒性腹泻
牛冠状病毒
流行病学调查
腹泻病原
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职称材料
开展动物检疫存在的问题及改进措施探讨
2
作者
彭昭录
《中国畜禽种业》
2022年第7期32-33,共2页
动物检疫工作不仅事关动物健康,对食品安全及畜牧业发展具有非常重要的意义。畜牧行业的发展让养殖户获得了巨大的经济效益,但动物疾病却会让养殖户蒙受巨大损失的同时,也为相关制品的安全性带来影响,不利于畜牧业的发展。本文对动物检...
动物检疫工作不仅事关动物健康,对食品安全及畜牧业发展具有非常重要的意义。畜牧行业的发展让养殖户获得了巨大的经济效益,但动物疾病却会让养殖户蒙受巨大损失的同时,也为相关制品的安全性带来影响,不利于畜牧业的发展。本文对动物检疫的重要性进行概述,并分析目前畜牧兽医工作中的动物检疫现状,以及相应的改进措施,为相关工作提供有效参考,减少因动物疾病带来的经济损失。
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关键词
畜牧兽医
动物
检疫
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职称材料
牛冠状病毒S1蛋白的真核表达及间接ELISA方法的建立与应用
被引量:
1
3
作者
黄金
李思远
+6 位作者
毛立
蔡旭航
谢玲玲
王府
周华
李基棕
李彬
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期2050-2060,共11页
为建立一种检测牛冠状病毒(BCoV)的抗体间接ELISA检测方法,本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达BCoV的S1蛋白,并作为包被抗原,建立BCoV的S1蛋白抗体间接ELISA检测方法,应用于临床样品检测。结果显示,S1蛋白大小约100 ku,可表达于昆虫Hi...
为建立一种检测牛冠状病毒(BCoV)的抗体间接ELISA检测方法,本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达BCoV的S1蛋白,并作为包被抗原,建立BCoV的S1蛋白抗体间接ELISA检测方法,应用于临床样品检测。结果显示,S1蛋白大小约100 ku,可表达于昆虫High5细胞培养基上清,经Western blot鉴定S1蛋白抗原性良好;经反应条件优化,确定抗原包被浓度为0.125μg·mL^(-1),血清稀释度为1∶200;采用1%明胶,于37℃封闭3 h;血清样品于37℃孵育30 min;酶标二抗的稀释度1∶25000,37℃孵育45 min;37℃避光显色13 min;临界值为0.297;经检验,该方法特异性良好;批间及批内变异系数均小于10%。当临界值为OD_(450 nm)为0.297时,若以IFA为标准,ELISA的敏感性为96.88%(31/32),特异性为87.50%(7/8),与IFA具有很强的一致性(κ=0.844,P<0.01);若以中和试验为标准,ELISA的敏感性为100.00%(31/31),特异性为88.89%(8/9),与血清中和试验具有很强的一致性(κ=0.925,P<0.01)。采用该方法对303份牛血清进行检测,BCoV阳性率为74.91%。由此说明,本研究建立的ELISA方法特异性强,敏感性高,重复性好,可用于BCoV的血清学调查和临床诊断,并可以应用于替代中和试验检测BCoV免疫后抗体水平。
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关键词
牛冠状病毒
昆虫杆状病毒表达系统
S1蛋白
间接ELISA
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职称材料
题名
河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析
被引量:
3
1
作者
李思远
付新成
袁雪松
毛立
蔡旭航
孙心如
黄金
谢玲玲
王府
周华
张琪
李基棕
李彬
机构
西北农林科技大学
动物
医学院
江苏省农业科学院兽医研究所
南京农业大学
动物
医学院
江苏大学生命科学学院食品与生物工程学院
河北省廊坊
市
农业农村局
贵州省种畜禽种质测定
中心
黔西市动物疫病预防控制中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期649-659,共11页
基金
“十四五”国家重点研发计划(2021YFD1801101)
陕西省重点研发计划一般项目(2022NY-098)
+1 种基金
贵州省种业发展项目(肉牛遗传改良与高效养殖技术研究)
江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(21)3137)。
文摘
牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还会导致母牛生殖功能异常,这些疾病对畜牧业造成巨大的经济损失。为了解牛主要病毒性腹泻病原流行情况,本次试验通过PCR检测方法对我国河北地区323份腹泻牛粪样品进行常见9种病毒性牛腹泻病原进行检测。结果显示,BVDV阳性检出率1.85%(6/323)、BCoV阳性检出率14.24%(46/323)、BRV阳性检出率57.89%(187/323)、BoAstV阳性检出率0.31%(1/323)、BoNeV阳性检出率10.84%(35/323)、BNoV阳性检出率4.33%(14/323)、MRV阳性检出率2.48%(8/323)、BToV阳性检出率4.64%(15/323)、BKoV阳性检出率11.76%(38/323)。混合感染共有76份,占比23.53%(76/323)。HBLF2302株的全基因序列、S、HE、N、M和E基因进行同源性和遗传进化分析发现,HBLF2302与BCoV/NMG1/2022基因同源性最高,为GIIb亚型。基于氨基酸序列比对和HBLF2302的S蛋白三级结构预测发现,在S蛋白中157号位突变为157T,854号位点突变为854I。318V为独特突变,改变了与侧链残基的作用力,与631C形成氢键连接。并发现中国株区别于其它地区的GⅡb亚型,位于ORF1a区域有三个独特位点。本研究丰富了牛腹泻病原的流行病学数据,为牛腹泻病的防控奠定基础。
关键词
病毒性腹泻
牛冠状病毒
流行病学调查
腹泻病原
Keywords
viral diarrhea
bovine coronavirus
epidemiology investigation
diarrhea pathogens
分类号
S852.653 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
开展动物检疫存在的问题及改进措施探讨
2
作者
彭昭录
机构
贵州省
黔西市动物疫病预防控制中心
出处
《中国畜禽种业》
2022年第7期32-33,共2页
文摘
动物检疫工作不仅事关动物健康,对食品安全及畜牧业发展具有非常重要的意义。畜牧行业的发展让养殖户获得了巨大的经济效益,但动物疾病却会让养殖户蒙受巨大损失的同时,也为相关制品的安全性带来影响,不利于畜牧业的发展。本文对动物检疫的重要性进行概述,并分析目前畜牧兽医工作中的动物检疫现状,以及相应的改进措施,为相关工作提供有效参考,减少因动物疾病带来的经济损失。
关键词
畜牧兽医
动物
检疫
分类号
S851.34 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
牛冠状病毒S1蛋白的真核表达及间接ELISA方法的建立与应用
被引量:
1
3
作者
黄金
李思远
毛立
蔡旭航
谢玲玲
王府
周华
李基棕
李彬
机构
江苏省农业科学院兽医研究所
南京农业大学
动物
医学院
江苏大学生命科学学院/食品与生物工程学院
贵州省种畜禽种质测定
中心
黔西市动物疫病预防控制中心
西北农林科技大学
动物
医学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期2050-2060,共11页
基金
“十四五”国家重点研发计划(2021YFD1801101)
贵州省种业发展项目(肉牛遗传改良与高效养殖技术研究)。
文摘
为建立一种检测牛冠状病毒(BCoV)的抗体间接ELISA检测方法,本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达BCoV的S1蛋白,并作为包被抗原,建立BCoV的S1蛋白抗体间接ELISA检测方法,应用于临床样品检测。结果显示,S1蛋白大小约100 ku,可表达于昆虫High5细胞培养基上清,经Western blot鉴定S1蛋白抗原性良好;经反应条件优化,确定抗原包被浓度为0.125μg·mL^(-1),血清稀释度为1∶200;采用1%明胶,于37℃封闭3 h;血清样品于37℃孵育30 min;酶标二抗的稀释度1∶25000,37℃孵育45 min;37℃避光显色13 min;临界值为0.297;经检验,该方法特异性良好;批间及批内变异系数均小于10%。当临界值为OD_(450 nm)为0.297时,若以IFA为标准,ELISA的敏感性为96.88%(31/32),特异性为87.50%(7/8),与IFA具有很强的一致性(κ=0.844,P<0.01);若以中和试验为标准,ELISA的敏感性为100.00%(31/31),特异性为88.89%(8/9),与血清中和试验具有很强的一致性(κ=0.925,P<0.01)。采用该方法对303份牛血清进行检测,BCoV阳性率为74.91%。由此说明,本研究建立的ELISA方法特异性强,敏感性高,重复性好,可用于BCoV的血清学调查和临床诊断,并可以应用于替代中和试验检测BCoV免疫后抗体水平。
关键词
牛冠状病毒
昆虫杆状病毒表达系统
S1蛋白
间接ELISA
Keywords
bovine coronavirus
insect baculovirus expression system
S1 protein
indirect ELISA
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析
李思远
付新成
袁雪松
毛立
蔡旭航
孙心如
黄金
谢玲玲
王府
周华
张琪
李基棕
李彬
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
3
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2
开展动物检疫存在的问题及改进措施探讨
彭昭录
《中国畜禽种业》
2022
0
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职称材料
3
牛冠状病毒S1蛋白的真核表达及间接ELISA方法的建立与应用
黄金
李思远
毛立
蔡旭航
谢玲玲
王府
周华
李基棕
李彬
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
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