Mito-Tempo对双酚A诱导猪卵母细胞线粒体功能障碍的缓解作用

1

作者 金君学 张善龙 +5 位作者 高乐鹏 王坤 任钧 辛海丰 宋军 孙婧陶 《东北农业大学学报》 北大核心 2025年第4期56-63,共8页

研究建立双酚A(BPA)诱导的猪卵母细胞线粒体损伤模型,评估线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对BPA引起线粒体损伤的修复作用及其对卵母细胞成熟的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中,分别添加100μmol·L^(-1)BPA或BPA+0.1μmol·L^(... 研究建立双酚A(BPA)诱导的猪卵母细胞线粒体损伤模型,评估线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对BPA引起线粒体损伤的修复作用及其对卵母细胞成熟的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中,分别添加100μmol·L^(-1)BPA或BPA+0.1μmol·L^(-1)Mito-Tempo(BPA+MT),检测卵丘细胞扩散指数、卵母细胞成熟及线粒体功能相关指标变化水平,并评估后续孤雌胚胎发育潜能。结果表明:与对照组相比,BPA阻碍卵丘细胞扩展、降低线粒体膜电位,增加卵母细胞线粒体应激水平,显著抑制卵母细胞成熟率[对照组为(83.9±1.3)%,BPA组为(62.1±1.7)%]及其后续孤雌胚胎的囊胚形成率[对照组为(41.9±1.0)%,BPA组为(31.5±0.2)%,P<0.05]。补充Mito-Tempo可降低MitoSOX水平,提高膜电位及线粒体功能相关基因表达,增加猪卵丘细胞扩散指数,改善卵母细胞体外成熟率[BPA组为(62.1±1.7)%,BPA+MT组为(79.4±0.2)%]及其后续孤雌胚胎发育能力[BPA组为(31.5±0.2)%,BPA+MT组为(39.4%±0.1)%,P<0.05]。综上,在猪卵母细胞体外成熟阶段添加Mito-Tempo,可有效缓解BPA诱导的线粒体损伤,提升卵母细胞成熟率及其后续孤雌胚胎发育能力。 展开更多

关键词 猪 卵母细胞 线粒体 双酚A Mito-Tempo

在线阅读 下载PDF 职称材料

N-乙酰半胱氨酸对玻璃化冻存小鼠GV期卵母细胞成熟和后续胚胎发育能力影响 被引量：4

2

作者 周佳勃 张宇霆 +4 位作者 岳巍 邢月超 汪顺伟 孙梦 岳顺利 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期76-82,共7页

冷冻保存后的GV期卵母细胞内大量积累ROS,影响胚胎发育。NAC作为一种抗氧化剂,可缓解氧应激造成的损伤。但NAC对冷冻GV期卵母细胞是否存在维持作用尚待研究。为探究NAC在冷冻、解冻后小鼠GV期卵母细胞发育中作用,检测冷冻保存后小鼠GV... 冷冻保存后的GV期卵母细胞内大量积累ROS,影响胚胎发育。NAC作为一种抗氧化剂,可缓解氧应激造成的损伤。但NAC对冷冻GV期卵母细胞是否存在维持作用尚待研究。为探究NAC在冷冻、解冻后小鼠GV期卵母细胞发育中作用,检测冷冻保存后小鼠GV期卵母细胞在添加不同浓度NAC成熟培养液后成熟情况,观察其卵裂率与囊胚率、线粒体分布、ROS水平和受精后胚胎发育等。结果表明,添加1.5 mmol·L^(-1)NAC,冷冻保存后,小鼠GV期卵母细胞,线粒体排布均匀,卵母细胞比例显著提高,ROS水平降低。NAC可改善小鼠GV期卵母细胞经冷冻保存后复苏和体外成熟水平,提高其发育能力。 展开更多

关键词 小鼠 N-乙酰半胱氨酸 玻璃化冷冻保存 卵母细胞 ROS

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪早期胚胎卵裂球发育追踪标记方法的比较

3

作者 杨玉川 齐子成 +3 位作者 吴静 王兆伟 陈雪松 刘忠华 《东北农业大学学报》 北大核心 2025年第2期53-62,共10页

追踪卵裂球的发育过程对研究猪早期胚胎发育机制至关重要,虽然小鼠早期胚胎卵裂球发育追踪方法较成熟,但针对猪等家畜胚胎卵裂球发育的追踪方法尚未完善。根据小鼠和其他模式动物的卵裂球发育追踪方法,选择mCherry mRNA、nls-mCherry m... 追踪卵裂球的发育过程对研究猪早期胚胎发育机制至关重要,虽然小鼠早期胚胎卵裂球发育追踪方法较成熟,但针对猪等家畜胚胎卵裂球发育的追踪方法尚未完善。根据小鼠和其他模式动物的卵裂球发育追踪方法,选择mCherry mRNA、nls-mCherry mRNA和亲脂性羰花青染料(DiI)对猪早期胚胎卵裂球发育进行追踪,探究最佳标记条件,并比较各方法优缺点。结果表明:通过显微注射mCherry和nls-mCherry荧光蛋白mRNA的标记方法,在猪中存在荧光丢失、标记率低等情况,而DiI荧光染料可长时间对分裂的卵裂球进行追踪。因此,在不影响胚胎正常发育的情况下,DiI荧光染料可实现对猪早期胚胎卵裂球细胞膜的稳定追踪。 展开更多

关键词 卵裂球发育追踪 猪 mCherry mRNA nls-mCherry mRNA DII

在线阅读 下载PDF 职称材料

PPARγ在脂肪生成中的遗传和表观遗传调控 被引量：24

4

作者 崔婷婷 邢天宇 +2 位作者 褚衍凯 李辉 王宁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1066-1077,共12页

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)是脂肪生成和脂肪组织发育的关键调控因子,另外在糖脂代谢、炎症和免疫反应等多种生物学过程中也发挥重要作用。近年来,对PPARγ基因的研究一... 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)是脂肪生成和脂肪组织发育的关键调控因子,另外在糖脂代谢、炎症和免疫反应等多种生物学过程中也发挥重要作用。近年来,对PPARγ基因的研究一直是脂肪生物学研究的热点。随着研究的不断深入,人们发现PPARγ基因不仅受遗传调控,还受DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA和染色质重塑等表观遗传调控。本文综述了PPARγ基因在脂肪生成中的遗传和表观遗传调控研究进展,探讨了未来PPARγ基因调控的研究方向和趋势。 展开更多

关键词 PPARΓ 脂肪生成 遗传调控 表观遗传调控 基因表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

Mito-Tempo修复过氧化氢诱导的猪卵母细胞线粒体损伤机制研究 被引量：3

5

作者 金君学 綦新月 +3 位作者 刘子瑜 张吉龙 马祥钧 孙婧陶 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期28-34,共7页

本研究探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对过氧化氢诱导猪卵母细胞线粒体损伤修复的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中添加10 mmol·L^(-1)过氧化氢或过氧化氢+0.1μmol·L^(-1)Mito-Tempo,检测卵丘细胞扩散、卵母细胞成熟及... 本研究探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对过氧化氢诱导猪卵母细胞线粒体损伤修复的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中添加10 mmol·L^(-1)过氧化氢或过氧化氢+0.1μmol·L^(-1)Mito-Tempo,检测卵丘细胞扩散、卵母细胞成熟及线粒体功能相关因子,观察孤雌胚胎发育情况。结果表明,与过氧化氢组相比,添加Mito-Tempo可显著提高卵丘细胞扩散指数,显著降低Mito SOX水平,提高膜电位及线粒体功能基因表达水平,显著改善猪卵母细胞体外成熟率及孤雌胚胎发育能力(P<0.05)。证明Mito-Tempo对过氧化氢诱导的猪卵母细胞线粒体损伤具有修复功能。 展开更多

关键词 猪 卵母细胞 线粒体 过氧化氢 Mito-Tempo

在线阅读 下载PDF 职称材料

单宁酸对猪卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响 被引量：3

6

作者 孙婧陶 姜超前 +6 位作者 刘佳慧 张弛 王传玥 边雅 姜希卿 张琪 金君学 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期3708-3714,共7页

研究旨在探讨单宁酸对猪卵母细胞体外成熟质量及其胚胎发育能力的影响。在猪卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外成熟培养液中添加不同浓度(0、1、10、100μg/mL)单宁酸培养42 h后,检测COCs的扩散程度和卵丘细胞扩散指数,统计COCs的体外成熟率... 研究旨在探讨单宁酸对猪卵母细胞体外成熟质量及其胚胎发育能力的影响。在猪卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外成熟培养液中添加不同浓度(0、1、10、100μg/mL)单宁酸培养42 h后,检测COCs的扩散程度和卵丘细胞扩散指数,统计COCs的体外成熟率,检测成熟卵母细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)的水平,并统计孤雌激活及体外受精胚胎48和168 h的卵裂率、囊胚率及囊胚总细胞数。结果显示,与对照组相比,10μg/mL单宁酸组卵丘细胞扩散指数显著提高(P<0.05),100μg/mL单宁酸组显著降低(P<0.05);1和10μg/mL单宁酸组卵母细胞成熟率差异不显著(P>0.05),100μg/mL单宁酸组卵母细胞成熟率显著降低(P<0.05);1和10μg/mL单宁酸组GSH和GDF9水平显著提高(P<0.05),ROS水平显著降低(P<0.05)。孤雌胚胎和体外受精胚胎发育能力结果显示,与对照组相比,各单宁酸组卵裂率差异不显著(P>0.05),10μg/mL单宁酸组孤雌胚胎囊胚率及体外受精胚胎囊胚率显著提高(P<0.05),100μg/mL单宁酸组孤雌胚胎囊胚细胞数及体外受精胚胎囊胚细胞数均显著低于其他各组(P<0.05)。以上结果表明,10μg/mL单宁酸可通过提高卵丘细胞扩散能力及GSH和GDF9水平、降低卵母细胞内ROS水平,改善猪卵母细胞成熟质量,提高孤雌胚胎及体外受精胚胎的发育能力。 展开更多

关键词 单宁酸 猪 卵丘细胞 卵母细胞 胚胎发育

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸡miR-17-92基因簇上游A/T富集区启动子活性鉴定与分析

7

作者 王宁 靳艳飞 +4 位作者 邢天宇 崔婷婷 黄佳新 闫晓红 李辉 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期57-67,共11页

文章采用基因定点突变和报告基因技术作A/T富集区启动子鉴定和转录调控分析,研究鸡miR-17-92基因簇上游A/T富集区是否具有启动子活性。PromPredict预测分析提示miR-17-92基因簇上游-388^-444 bp处可能是启动子区域。转录因子结合位点分... 文章采用基因定点突变和报告基因技术作A/T富集区启动子鉴定和转录调控分析,研究鸡miR-17-92基因簇上游A/T富集区是否具有启动子活性。PromPredict预测分析提示miR-17-92基因簇上游-388^-444 bp处可能是启动子区域。转录因子结合位点分析发现,A/T富集区存在3个E2F1潜在结合位点,分别位于miR-17-92基因簇上游-1 273 bp(结合位点1)、-1 186 bp(结合位点2)和-753 bp(结合位点3)处。报告基因活性分析发现,鸡miR-17-92基因簇上游A/T富集区具有启动子活性,其中miR-17-92基因簇上游-440/-1区域启动子活性最强。共转染分析显示,转录因子E2F1极显著抑制该A/T富集区启动子活性(P<0.01);进一步定点突变分析表明E2F1通过E2F1结合位点1和2抑制A/T富集区启动子活性。报告基因分析发现,与对A/T富集区启动子作用不同,E2F1促进miR-17-92基因簇宿主基因(MIR17HG)启动子活性。文章首次发现鸡miR-17-92基因簇上游存在一个新的转录调控区,对揭示鸡miR-17-92基因簇转录调控具有重要意义。 展开更多

关键词 鸡 miR-17-92基因簇 A/T富集区 启动子 E2F1

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同浓度二甲双胍对猪精液液态保存效果的影响

8

作者 周佳勃 马思楠 +5 位作者 王娜 李文倩 聂云 邵千朔 王启蒙 岳顺利 《安徽农业科学》 CAS 2018年第20期77-79,82,共4页

[目的]研究不同浓度二甲双胍对猪精液液态保存效果的影响。[方法]在猪精液液态保存液中分别添加不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L)的二甲双胍,测定不同保存时间精子的活力、活率、质膜完整率、顶体完整率等指标。[结果]猪精液液态保... [目的]研究不同浓度二甲双胍对猪精液液态保存效果的影响。[方法]在猪精液液态保存液中分别添加不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L)的二甲双胍,测定不同保存时间精子的活力、活率、质膜完整率、顶体完整率等指标。[结果]猪精液液态保存第3天,在不同浓度二甲双胍作用下各组间精子活力出现差异。第5天,添加1.0 mmol/L二甲双胍的保存液保存的精子活力达到38.03%,精子活率为49.03%,质膜完整率为43.91%,顶体完整率为50.88%,均高于对照组。[结论]添加二甲双胍有助于提高液态保存猪精液的质量,延长保存时间。 展开更多

关键词 猪精液 液态保存 二甲双胍 活力

在线阅读 下载PDF 职称材料

奶牛乳腺中4F2hc基因的表达模式及亮氨酸对其表达的调控研究 被引量：2

9

作者 姜明慧 黄鹤 +3 位作者 段晓宇 江怡 刘灿 侯晓明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第8期2378-2384,共7页

为了研究4F2hc在奶牛乳腺中的表达模式及调控方式,进一步明确氨基酸在奶牛乳腺上皮细胞中的跨膜转运过程,本研究采用Western blotting和实时荧光定量PCR技术检测了4F2hc在泌乳期和干奶期奶牛乳腺组织中的表达变化;在体外培养的泌乳期奶... 为了研究4F2hc在奶牛乳腺中的表达模式及调控方式,进一步明确氨基酸在奶牛乳腺上皮细胞中的跨膜转运过程,本研究采用Western blotting和实时荧光定量PCR技术检测了4F2hc在泌乳期和干奶期奶牛乳腺组织中的表达变化;在体外培养的泌乳期奶牛乳腺上皮细胞中添加亮氨酸,采用Western blotting和实时荧光定量PCR技术检测其对奶牛乳腺上皮细胞中4F2hc表达的影响;采用雷帕霉素抑制剂抑制mTOR信号通路,使用Western blotting方法检测mTOR信号抑制后奶牛乳腺上皮细胞中4F2hc表达以及乳蛋白合成的变化。结果显示,在泌乳期的奶牛乳腺组织中4F2hc的mRNA和蛋白表达水平均显著或极显著高于干奶期(P<0.05,P<0.01);在体外培养的奶牛乳腺上皮细胞中添加亮氨酸可以极显著提高乳腺上皮细胞中4F2hc的mRNA和蛋白质表达水平(P<0.01);亮氨酸刺激可以激活细胞内的mTOR信号通路(P<0.05),而雷帕霉素处理则可以显著抑制mTOR信号分子的磷酸化并极显著抑制亮氨酸诱导的4F2hc的表达(P<0.05,P<0.01),进而极显著抑制β-Casein的合成(P<0.01)。以上研究结果表明,4F2hc基因的表达与奶牛乳腺的泌乳活性之间呈正相关,亮氨酸可以通过激活mTOR信号通路来调节4F2hc基因的表达,进而影响乳蛋白的合成。 展开更多

关键词 奶牛 乳腺 4F2hc基因 泌乳

在线阅读 下载PDF 职称材料

羊毛品质性状相关基因CCNY的验证和分析 被引量：5

10

作者 张文建 马广伟 +7 位作者 张潇飞 褚衍凯 刘静 杨华 闫晓红 李玉茂 李辉 王宁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1389-1400,共12页

旨在验证Cyclin Y(CCNY)基因与羊毛品质性状的相关性,并探索其可能的作用机制。本研究以744只中国美利奴羊(新疆军垦型)为试验材料,采用Sanger法混池测序寻找多态性位点;利用MALDI-TOF-MS方法进行个体基因型鉴定;利用real-time RT-PCR... 旨在验证Cyclin Y(CCNY)基因与羊毛品质性状的相关性,并探索其可能的作用机制。本研究以744只中国美利奴羊(新疆军垦型)为试验材料,采用Sanger法混池测序寻找多态性位点;利用MALDI-TOF-MS方法进行个体基因型鉴定;利用real-time RT-PCR检测基因表达;利用免疫荧光染色技术分析蛋白定位;利用CCK-8方法检测细胞的增殖;利用荧光素酶报告基因技术检测Wnt/β-catenin信号通路的活性。结果表明,本研究鉴定出中国美利奴羊CCNY基因的3个SNPs位点,分别命名为CCNYSNP1(rs613860955)、CCNYSNP2(rs622396422)和CCNYSNP3(rs611417387)。关联分析显示,这3个SNPs及其构建的单倍型均与羊毛细度显著相关(P<0.05);组织表达谱检测分析显示,CCNY基因在睾丸和肺中有较高的表达,在皮肤等组织中有中等程度的表达;免疫荧光分析显示,CCNY主要定位于毛囊的内根鞘和毛母质细胞;CCK-8细胞增殖检测分析显示,过表达CCNY基因显著促进人表皮永生化细胞(HaCaT)和绵羊胎儿成纤维细胞(SFF)的增殖(P<0.05);报告基因分析结果显示,过表达CCNY基因极显著促进Wnt/β-catenin信号通路的活性(P<0.01)。以上结果显示,CCNY是控制羊毛细度的一个重要基因,所鉴定出的CCNY基因3个SNPs有望用于细毛羊的分子辅助选育。 展开更多

关键词 中国美利奴绵羊 CCNY基因 单核苷酸多态性 羊毛品质性状 关联分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

稀释液中添加还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响 被引量：4

11

作者 严子祎 孙琪 +6 位作者 王娜 杨康 汪顺伟 孙梦 岳顺利 孙中桐 周佳勃 《黑龙江动物繁殖》 2017年第3期6-10,共5页

为了研究还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响,实验通过在稀释液中分别添加不同浓度的还原型谷胱甘肽,研究了它对猪精液液态保存后的精子活力、顶体完整率、质膜完整率、DNA损伤率、体外受精卵裂率及囊胚率等影响。结果表明,向稀... 为了研究还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响,实验通过在稀释液中分别添加不同浓度的还原型谷胱甘肽,研究了它对猪精液液态保存后的精子活力、顶体完整率、质膜完整率、DNA损伤率、体外受精卵裂率及囊胚率等影响。结果表明,向稀释液中添加1 mmol/L,5 mmol/L,10 mmol/L GSH均能显著提高精子保存质量。其中添加1 mmol/L还原型谷胱甘肽效果最好,10 mmol/L效果较差,但大部分指标仍显著高于对照组。证实了稀释液中添加还原型谷胱甘肽有助于提高液态保存猪精液的质量。 展开更多

关键词 猪精液 还原型谷胱甘肽(GSH) 人工授精

在线阅读 下载PDF 职称材料