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玉米螟P450基因cDNA的克隆及植物次生物质对其诱导表达
被引量：
6
1
作者
张雨良
曾洪梅
+5 位作者
杨秀芬
杨峰山
刘华
尹富仕
毛建军
邱德文
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期126-131,共6页
昆虫细胞色素P450是一类在生物代谢中起重要作用的基因家族,承担着许多重要的生理功能,包括对植物次生物质代谢和杀虫剂解毒等.本研究以玉米螟5龄幼虫中肠的总RNA为模板,根据不同昆虫P450基因家族保守氨基酸序列,设计并合成简并引物,利...
昆虫细胞色素P450是一类在生物代谢中起重要作用的基因家族,承担着许多重要的生理功能,包括对植物次生物质代谢和杀虫剂解毒等.本研究以玉米螟5龄幼虫中肠的总RNA为模板,根据不同昆虫P450基因家族保守氨基酸序列,设计并合成简并引物,利用RT-PCR扩增出了玉米螟细胞色素P450基因cDNA片段,将其克隆到pMD19-T载体进行序列测定.测序获得了编码213个氨基酸残基的641 bp的DNA片段,命名为OfP450(GenBank登录号:EU807990);与已公布的棉铃虫、家蚕、欧洲防风草结网毛虫、小菜蛾和黑腹果蝇等的细胞色素P450氨基酸序列进行比较,其一致性分别为55%、50%、49%、44%和31%.将植物次生物质棉酚、丁布添加入人工饲料中,对玉米螟进行了饲喂实验,采用优化半定量RT-PCR,以18SrRNA为内标,RT-PCR检测进食棉酚、丁布植物化合物的玉米螟中肠P450基因的转录.结果表明,其转录水平能被棉酚、丁布显著诱导.提示本实验克隆的玉米螟细胞色素P450对植物次生物质的代谢作用与P450表达量呈正相关.该研究为下一步将植物介导的RNA干扰技术应用于害虫生物防治提供坚实的基础.
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关键词
玉米螟
P450基因
克隆
植物次生物质
诱导表达
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职称材料
大麦产量相关基因HvYrg1的克隆及植物RNA干扰载体的构建
被引量：
2
2
作者
张雨良
王希东
+3 位作者
张桦
杨峰山
姚正培
石庆华
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期445-452,共8页
大麦谷粒是受多个数量性状基因(QTL)控制的复杂性状,而RINGE3泛素连接酶在决定大麦产量和蛋白质降解途径中起到极为重要的作用。本研究按照同源克隆的方法,依据水稻、拟南芥、玉米、小麦和酵母等E3泛素连接酶保守区域设计引物,采用RT-PC...
大麦谷粒是受多个数量性状基因(QTL)控制的复杂性状,而RINGE3泛素连接酶在决定大麦产量和蛋白质降解途径中起到极为重要的作用。本研究按照同源克隆的方法,依据水稻、拟南芥、玉米、小麦和酵母等E3泛素连接酶保守区域设计引物,采用RT-PCR方法从西藏大麦中克隆出产量相关基因HvYrg1全长cDNA序列,包括完整的开放阅读框架(ORF)1275bp,编码蛋白为424个氨基酸(GenBank No.EU333863)。同源性比较结果显示,它与GenBank上已报道的水稻GW2基因同源性最高为86%。以植物表达载体pCAMBIA2300-35s-OCS质粒为基础,构建由35s启动子调控的HvYrg1基因的RNA干扰载体pCAM-RNAi-HvYrg1。这一载体的成功构建为研究该基因在作物产量的功能鉴定打下了很好的基础。
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关键词
大麦
HvYrgl基因
克隆
RNA干扰
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职称材料
题名
玉米螟P450基因cDNA的克隆及植物次生物质对其诱导表达
被引量：
6
1
作者
张雨良
曾洪梅
杨秀芬
杨峰山
刘华
尹富仕
毛建军
邱德文
机构
中国农业
科学
院植物保护研究所
新疆农业
大学
农
学院
黑龙江
大学
生命科学
学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期126-131,共6页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划,2003CB114204)
北京市重大项目(D0706005040431)~~
文摘
昆虫细胞色素P450是一类在生物代谢中起重要作用的基因家族,承担着许多重要的生理功能,包括对植物次生物质代谢和杀虫剂解毒等.本研究以玉米螟5龄幼虫中肠的总RNA为模板,根据不同昆虫P450基因家族保守氨基酸序列,设计并合成简并引物,利用RT-PCR扩增出了玉米螟细胞色素P450基因cDNA片段,将其克隆到pMD19-T载体进行序列测定.测序获得了编码213个氨基酸残基的641 bp的DNA片段,命名为OfP450(GenBank登录号:EU807990);与已公布的棉铃虫、家蚕、欧洲防风草结网毛虫、小菜蛾和黑腹果蝇等的细胞色素P450氨基酸序列进行比较,其一致性分别为55%、50%、49%、44%和31%.将植物次生物质棉酚、丁布添加入人工饲料中,对玉米螟进行了饲喂实验,采用优化半定量RT-PCR,以18SrRNA为内标,RT-PCR检测进食棉酚、丁布植物化合物的玉米螟中肠P450基因的转录.结果表明,其转录水平能被棉酚、丁布显著诱导.提示本实验克隆的玉米螟细胞色素P450对植物次生物质的代谢作用与P450表达量呈正相关.该研究为下一步将植物介导的RNA干扰技术应用于害虫生物防治提供坚实的基础.
关键词
玉米螟
P450基因
克隆
植物次生物质
诱导表达
Keywords
Ostrinia furnaealis
P450 gene
clone
seeondary plant metabolite
inducible expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
大麦产量相关基因HvYrg1的克隆及植物RNA干扰载体的构建
被引量：
2
2
作者
张雨良
王希东
张桦
杨峰山
姚正培
石庆华
机构
新疆农业
大学
农
学院
新疆农业
大学
农业
生物
技术
重点
实验室
黑龙江大学生命科学学院黑龙江省高校微生物学重点实验室
出处
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期445-452,共8页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划,2003CB114204)
北京市重大项目(D0706005040431)
文摘
大麦谷粒是受多个数量性状基因(QTL)控制的复杂性状,而RINGE3泛素连接酶在决定大麦产量和蛋白质降解途径中起到极为重要的作用。本研究按照同源克隆的方法,依据水稻、拟南芥、玉米、小麦和酵母等E3泛素连接酶保守区域设计引物,采用RT-PCR方法从西藏大麦中克隆出产量相关基因HvYrg1全长cDNA序列,包括完整的开放阅读框架(ORF)1275bp,编码蛋白为424个氨基酸(GenBank No.EU333863)。同源性比较结果显示,它与GenBank上已报道的水稻GW2基因同源性最高为86%。以植物表达载体pCAMBIA2300-35s-OCS质粒为基础,构建由35s启动子调控的HvYrg1基因的RNA干扰载体pCAM-RNAi-HvYrg1。这一载体的成功构建为研究该基因在作物产量的功能鉴定打下了很好的基础。
关键词
大麦
HvYrgl基因
克隆
RNA干扰
Keywords
Hordeum vulgare
HvYrgl gene
cloning
RNA interfere
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
玉米螟P450基因cDNA的克隆及植物次生物质对其诱导表达
张雨良
曾洪梅
杨秀芬
杨峰山
刘华
尹富仕
毛建军
邱德文
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
大麦产量相关基因HvYrg1的克隆及植物RNA干扰载体的构建
张雨良
王希东
张桦
杨峰山
姚正培
石庆华
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
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职称材料
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