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H3N2亚型猪流感病毒HA基因序列测定及抗原性分析
被引量：
10
1
作者
刘大飞
杨涛
+3 位作者
刘明
刘春国
桑学波
刘大程
《动物医学进展》
CSCD
2008年第3期5-9,共5页
采用RT～PCR技术对4株H3N2亚型猪流感病毒的HA基因进行了扩增，将获得的PCR产物分别与pMD18-T克隆载体连接，进行序列测定。测序结果显示，4个毒株均含有完整的开放阅读框，并且均未发现核苷酸插入或缺失现象；分离毒株间核苷酸同源性...
采用RT～PCR技术对4株H3N2亚型猪流感病毒的HA基因进行了扩增，将获得的PCR产物分别与pMD18-T克隆载体连接，进行序列测定。测序结果显示，4个毒株均含有完整的开放阅读框，并且均未发现核苷酸插入或缺失现象；分离毒株间核苷酸同源性为99．4％～99．7％，氨基酸同源性为98．2％～99．3％。同源性分析表明，4个毒株与2003年的猪流感病毒广东分离株有很高同源性（均在99％以上），说明近段时间我国H3N2亚型的猪流感病毒变异不大，重组的频率不是很高，同时又与人流感病毒香港分离株有较高的同源性（均为99．4％）。交叉血凝抑制试验显示，S3株与其他3毒株抗原性差异明显。鉴于猪在流感病毒传播与复制间的特殊地位，应密切监测猪流感。
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关键词
猪流感病毒
HA基因
克隆
抗原性分析
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职称材料
4株不同亚型流感病毒NP基因的原核表达
被引量：
2
2
作者
刘大飞
杨涛
+4 位作者
刘明
刘春国
何利昆
桑学波
刘大程
《动物医学进展》
CSCD
2007年第12期12-18,共7页
为了进一步研究A型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用,采用RT-PCR技术分别扩增H1N1、H3N2、H5N1、H9N2等4株不同亚型流感病毒的NP基因,分别将其克隆到原核表达载体pET30(a)上,在大肠埃希菌中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot检...
为了进一步研究A型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用,采用RT-PCR技术分别扩增H1N1、H3N2、H5N1、H9N2等4株不同亚型流感病毒的NP基因,分别将其克隆到原核表达载体pET30(a)上,在大肠埃希菌中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,H1N1亚型流感病毒NP蛋白得到表达,并且能分别与H1N1和H5N1亚型流感病毒的鼠高免血清发生特异性反应,具有良好的反应活性;而H3N2、H5N1、H9N2亚型流感病毒的重组NP蛋白未获得表达。本研究结果表明,不同毒株的NP蛋白在大肠埃希菌中的表达具有一定差异性,为把NP蛋白作为诊断抗原的开发、ELISA诊断方法的建立以及蛋白功能的研究奠定了基础。
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关键词
流感病毒
NP基因
原核表达
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职称材料
题名
H3N2亚型猪流感病毒HA基因序列测定及抗原性分析
被引量：
10
1
作者
刘大飞
杨涛
刘明
刘春国
桑学波
刘大程
机构
中国农业科学院
哈尔滨
兽医
研究所
兽医
生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室
黑龙江农垦总局畜牧兽医总站哈尔滨分站
．
黑龙江
哈尔滨
莱阳市城厢
兽医
站
出处
《动物医学进展》
CSCD
2008年第3期5-9,共5页
基金
国家“十一五”科技支撑计划资助项目(2006BAD06A05)
黑龙江省自然科学基金项目(ZJN-0702-02)
文摘
采用RT～PCR技术对4株H3N2亚型猪流感病毒的HA基因进行了扩增，将获得的PCR产物分别与pMD18-T克隆载体连接，进行序列测定。测序结果显示，4个毒株均含有完整的开放阅读框，并且均未发现核苷酸插入或缺失现象；分离毒株间核苷酸同源性为99．4％～99．7％，氨基酸同源性为98．2％～99．3％。同源性分析表明，4个毒株与2003年的猪流感病毒广东分离株有很高同源性（均在99％以上），说明近段时间我国H3N2亚型的猪流感病毒变异不大，重组的频率不是很高，同时又与人流感病毒香港分离株有较高的同源性（均为99．4％）。交叉血凝抑制试验显示，S3株与其他3毒株抗原性差异明显。鉴于猪在流感病毒传播与复制间的特殊地位，应密切监测猪流感。
关键词
猪流感病毒
HA基因
克隆
抗原性分析
Keywords
Swine influenza virus
HA gene
cloning
antigenicity analysis
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
4株不同亚型流感病毒NP基因的原核表达
被引量：
2
2
作者
刘大飞
杨涛
刘明
刘春国
何利昆
桑学波
刘大程
机构
中国农业科学院
哈尔滨
兽医
研究所
兽医
生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室
辽宁省动物疫病预防控制中心
黑龙江农垦总局畜牧兽医总站哈尔滨分站
莱阳市城厢
兽医
站
出处
《动物医学进展》
CSCD
2007年第12期12-18,共7页
基金
国家"973"重点基础研究发展计划资助项目(2005CB523202)
文摘
为了进一步研究A型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用,采用RT-PCR技术分别扩增H1N1、H3N2、H5N1、H9N2等4株不同亚型流感病毒的NP基因,分别将其克隆到原核表达载体pET30(a)上,在大肠埃希菌中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,H1N1亚型流感病毒NP蛋白得到表达,并且能分别与H1N1和H5N1亚型流感病毒的鼠高免血清发生特异性反应,具有良好的反应活性;而H3N2、H5N1、H9N2亚型流感病毒的重组NP蛋白未获得表达。本研究结果表明,不同毒株的NP蛋白在大肠埃希菌中的表达具有一定差异性,为把NP蛋白作为诊断抗原的开发、ELISA诊断方法的建立以及蛋白功能的研究奠定了基础。
关键词
流感病毒
NP基因
原核表达
Keywords
Influenza virus
NP gene
prokaryotic expression
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
H3N2亚型猪流感病毒HA基因序列测定及抗原性分析
刘大飞
杨涛
刘明
刘春国
桑学波
刘大程
《动物医学进展》
CSCD
2008
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
4株不同亚型流感病毒NP基因的原核表达
刘大飞
杨涛
刘明
刘春国
何利昆
桑学波
刘大程
《动物医学进展》
CSCD
2007
2
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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