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小豆锈病分子检测体系的构建及应用
被引量：
1
1
作者
殷丽华
张金鹏
+3 位作者
章国庆
刘国辉
柯希望
左豫虎
《干旱地区农业研究》
CSCD
北大核心
2023年第6期238-244,共7页
由豇豆单胞锈菌(Uromyces vignae Barclay)引起的小豆锈病是小豆生产中危害最为严重的病害之一,建立早期分子检测技术体系对病害早期诊断和及时防控具有重要意义。本研究以豇豆单胞锈菌ITS序列为依据设计引物,结合已报道的单胞锈菌属特...
由豇豆单胞锈菌(Uromyces vignae Barclay)引起的小豆锈病是小豆生产中危害最为严重的病害之一,建立早期分子检测技术体系对病害早期诊断和及时防控具有重要意义。本研究以豇豆单胞锈菌ITS序列为依据设计引物,结合已报道的单胞锈菌属特异检测引物,以豇豆单胞锈菌为目标菌,以茄链格孢、茄丝核菌、禾谷镰刀菌、稻瘟菌、苹果轮纹病菌、半裸镰刀菌、玉米链格孢菌、尖孢镰刀菌和禾顶囊壳等9种常见植物病原真菌为参照菌,采用CTAB法提取上述各菌株的基因组DNA,应用普通PCR技术筛选出豇豆单胞锈菌的特异性检测引物UV-ITS,在此基础上设计巢式PCR引物UV-MX,构建了基于巢式PCR的高灵敏度小豆锈病分子检测体系。该巢式PCR体系在基因组DNA浓度仅为4×10^(-6)ng·μL^(-1)时仍可实现有效扩增,其灵敏度是普通PCR的10万倍。以感病小豆品种‘宝清红’接种锈菌后不同时间的叶片为材料检验检测体系的应用效果发现,接种后12 h的小豆叶片样本即可扩增出豇豆单胞锈菌的特异性条带。本研究建立的小豆锈病分子检测体系特异性强、灵敏度高,具备对潜伏期病害进行早期诊断的应用潜力,可为小豆锈病的早期快速诊断和及时防控提供重要的技术支撑。
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关键词
小豆
锈病
豇豆单胞锈菌
分子检测
巢式PCR
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职称材料
小豆VaDREB1A基因克隆及其应答锈菌侵染的表达分析
2
作者
柯希望
徐菁
+5 位作者
张金鹏
殷丽华
徐晓丹
曹鸣宇
郭永霞
左豫虎
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期493-501,共9页
为明确小豆VaDREB1A在抗锈菌侵染过程中的作用,本研究分别从小豆基因组DNA及cDNA中克隆了该基因,测序结果表明VaDREB1A无内含子,全长660 bp编码219个氨基酸,氨基酸序列包含1个AP2结构域,序列特征及系统发育分析表明VaDREB1A属于DREB/CB...
为明确小豆VaDREB1A在抗锈菌侵染过程中的作用,本研究分别从小豆基因组DNA及cDNA中克隆了该基因,测序结果表明VaDREB1A无内含子,全长660 bp编码219个氨基酸,氨基酸序列包含1个AP2结构域,序列特征及系统发育分析表明VaDREB1A属于DREB/CBF亚家族A1亚类。启动子顺式元件分析发现,VaDREB1A启动子包含乙烯、水杨酸及生物和非生物胁迫等响应元件。对该基因响应豇豆单胞锈菌(Uromyces vignae)侵染的表达分析发现,与不接种对照相比,VaDREB1A在抗病品种中于接种后24 h和120 h显著下调,而在感病品种中于接种后120 h和192 h显著上调。在1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)诱导小豆抗锈病过程中,VaDREB1A的表达与其在抗病品种中的表达相似,分别于ACC处理并接种后24 h和192 h显著下调。上述结果说明VaDREB1A可能参与小豆对锈病的抗性。
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关键词
小豆
小豆锈病
AP2/ERF转录因子
诱导抗性
基因表达
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职称材料
题名
小豆锈病分子检测体系的构建及应用
被引量：
1
1
作者
殷丽华
张金鹏
章国庆
刘国辉
柯希望
左豫虎
机构
黑龙江八一农垦大学/国家杂粮工程技术研究中心/黑龙江省作物-有害生物互作生物学及生态防控重点实验室
黑龙江省
农业科学院克山分院
黑龙江省
农业环境与耕地保护站
出处
《干旱地区农业研究》
CSCD
北大核心
2023年第6期238-244,共7页
基金
国家自然科学基金项目(32102173)
黑龙江省自然科学基金项目(YQ2020C034)。
文摘
由豇豆单胞锈菌(Uromyces vignae Barclay)引起的小豆锈病是小豆生产中危害最为严重的病害之一,建立早期分子检测技术体系对病害早期诊断和及时防控具有重要意义。本研究以豇豆单胞锈菌ITS序列为依据设计引物,结合已报道的单胞锈菌属特异检测引物,以豇豆单胞锈菌为目标菌,以茄链格孢、茄丝核菌、禾谷镰刀菌、稻瘟菌、苹果轮纹病菌、半裸镰刀菌、玉米链格孢菌、尖孢镰刀菌和禾顶囊壳等9种常见植物病原真菌为参照菌,采用CTAB法提取上述各菌株的基因组DNA,应用普通PCR技术筛选出豇豆单胞锈菌的特异性检测引物UV-ITS,在此基础上设计巢式PCR引物UV-MX,构建了基于巢式PCR的高灵敏度小豆锈病分子检测体系。该巢式PCR体系在基因组DNA浓度仅为4×10^(-6)ng·μL^(-1)时仍可实现有效扩增,其灵敏度是普通PCR的10万倍。以感病小豆品种‘宝清红’接种锈菌后不同时间的叶片为材料检验检测体系的应用效果发现,接种后12 h的小豆叶片样本即可扩增出豇豆单胞锈菌的特异性条带。本研究建立的小豆锈病分子检测体系特异性强、灵敏度高,具备对潜伏期病害进行早期诊断的应用潜力,可为小豆锈病的早期快速诊断和及时防控提供重要的技术支撑。
关键词
小豆
锈病
豇豆单胞锈菌
分子检测
巢式PCR
Keywords
Vigna angularis
rust disease
Uromyces vignae
molecular detection
nested PCR
分类号
S435.21 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
小豆VaDREB1A基因克隆及其应答锈菌侵染的表达分析
2
作者
柯希望
徐菁
张金鹏
殷丽华
徐晓丹
曹鸣宇
郭永霞
左豫虎
机构
黑龙江八一农垦大学/国家杂粮工程技术研究中心/黑龙江省作物-有害生物互作生物学及生态防控重点实验室
黑龙江省
农业科学院克山分院
出处
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期493-501,共9页
基金
黑龙江省自然科学基金(YQ2020C034)
黑龙江省应用技术研究与开发计划(GA19B104)
+1 种基金
黑龙江省普通高等学校青年创新人才培养计划(UNPYSCT-2016201、UNPYSCT-2017113)
黑龙江省农垦总局重点科研计划(HKKY190602)。
文摘
为明确小豆VaDREB1A在抗锈菌侵染过程中的作用,本研究分别从小豆基因组DNA及cDNA中克隆了该基因,测序结果表明VaDREB1A无内含子,全长660 bp编码219个氨基酸,氨基酸序列包含1个AP2结构域,序列特征及系统发育分析表明VaDREB1A属于DREB/CBF亚家族A1亚类。启动子顺式元件分析发现,VaDREB1A启动子包含乙烯、水杨酸及生物和非生物胁迫等响应元件。对该基因响应豇豆单胞锈菌(Uromyces vignae)侵染的表达分析发现,与不接种对照相比,VaDREB1A在抗病品种中于接种后24 h和120 h显著下调,而在感病品种中于接种后120 h和192 h显著上调。在1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)诱导小豆抗锈病过程中,VaDREB1A的表达与其在抗病品种中的表达相似,分别于ACC处理并接种后24 h和192 h显著下调。上述结果说明VaDREB1A可能参与小豆对锈病的抗性。
关键词
小豆
小豆锈病
AP2/ERF转录因子
诱导抗性
基因表达
Keywords
Vigna angularis(Willd.)Ohwi&H.Ohashi
Adzuki bean rust
AP2/ERF transcription factor
induced resistance
gene expression
分类号
S435.21 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
S521 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小豆锈病分子检测体系的构建及应用
殷丽华
张金鹏
章国庆
刘国辉
柯希望
左豫虎
《干旱地区农业研究》
CSCD
北大核心
2023
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
小豆VaDREB1A基因克隆及其应答锈菌侵染的表达分析
柯希望
徐菁
张金鹏
殷丽华
徐晓丹
曹鸣宇
郭永霞
左豫虎
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
0
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