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猪流行性腹泻病毒RT-RAA-LFD检测方法的建立
1
作者
仇德洋
王海燕
+3 位作者
郑佳
杜建才
陈昭
李桂梅
《中国动物检疫》
2025年第7期90-95,共6页
为开发一种可靠、简易、便捷的现场猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,基于反转录重组酶介导等温扩增(RT-RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,建立了用于现场检测PEDV的RT-RAA-LFD方法。根据PEDV N基因保守序列进行引物和探针设计,通过试验优选...
为开发一种可靠、简易、便捷的现场猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,基于反转录重组酶介导等温扩增(RT-RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,建立了用于现场检测PEDV的RT-RAA-LFD方法。根据PEDV N基因保守序列进行引物和探针设计,通过试验优选出一套引物及一条探针,同时对RT-RAA反应时间和温度条件进行优化。优化后的方法在37℃恒温反应15 min,即可实现对PEDV目的基因片段的有效扩增;与其他常见腹泻病毒无交叉反应,最低检测限为1.23×10^(1) copies/μL;对134份临床样品进行检测,阳性检出率为5.97%,与国标检测方法结果一致。结果表明,本研究建立的PEDV RT-RAA-LFD检测方法操作简便,结果特异、灵敏,不需要专业的实验室设备和实验人员,适用于在资源有限地区对PEDV的检测,能够满足基层临床工作人员的需求。
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关键词
猪流行性腹泻病毒
重组酶介导等温扩增
侧向层析试纸条
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职称材料
猪圆环病毒2型和弓形虫双重TaqMan荧光定量PCR法的建立及应用
2
作者
王海燕
仇德洋
+5 位作者
蔺雅婷
杜建才
姚方方
吕延飞
刘洋
郑佳
《中国动物检疫》
2025年第6期92-98,共7页
猪圆环病毒2型(PCV2)感染和弓形虫病(toxoplasmosis)在临床症状上具有一定的相似性因而难以准确辨别。为建立可同时鉴别PCV2和弓形虫(Toxoplasma gondii,Tox)的检测方法,针对PCV2 ORF2和Tox基因组529重复序列(Rep G529)设计特异性引物和...
猪圆环病毒2型(PCV2)感染和弓形虫病(toxoplasmosis)在临床症状上具有一定的相似性因而难以准确辨别。为建立可同时鉴别PCV2和弓形虫(Toxoplasma gondii,Tox)的检测方法,针对PCV2 ORF2和Tox基因组529重复序列(Rep G529)设计特异性引物和Taq Man探针,经过优化引物、探针浓度和反应条件,建立了同时检测这两种病原的双重Taq Man荧光定量PCR方法。该方法仅特异性扩增PCV2和Tox,与其他病原无交叉反应,特异性强;对PCV2质粒标准品的最低检测限为1.21×10~1 copies/μL,对Tox质粒的最低检测限为1.17×10~1 copies/μL,具有较高的敏感性;组内和组间变异系数均小于5%,具有良好的重复性。应用本试验建立方法和国标荧光定量PCR方法同时检测187份血清、脾脏临床样品,结果PCV2和Tox的阳性符合率分别为93.33%和100%。该方法的建立为PCV2和Tox的批量、快速和特异性鉴别检测提供了技术支撑。
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关键词
猪圆环病毒2型
弓形虫
双重荧光定量PCR
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职称材料
功能观察组合试验(FOB)评价牛蒡子苷元对大鼠中枢神经系统的影响
被引量：
6
3
作者
李欣
姚景春
+2 位作者
李涛
李会恩
高雷
《中华中医药学刊》
CAS
北大核心
2015年第2期441-443,共3页
目的:采用功能观察组合试验(FOB)评价牛蒡子苷元注射液对大鼠中枢神经系统的影响。方法:健康SD大鼠50只,雌雄各半,设空白对照组、牛蒡子苷元0.5、2.5和12.5 mg·kg-1剂量组及氯丙嗪20 mg·kg-1阳性对照组,每组10只动物。空白对...
目的:采用功能观察组合试验(FOB)评价牛蒡子苷元注射液对大鼠中枢神经系统的影响。方法:健康SD大鼠50只,雌雄各半,设空白对照组、牛蒡子苷元0.5、2.5和12.5 mg·kg-1剂量组及氯丙嗪20 mg·kg-1阳性对照组,每组10只动物。空白对照组及牛蒡子苷元0.5、2.5、12.5 mg·kg-1剂量组单次皮下注射给药,阳性对照组灌胃给药。各组动物根据FOB试验方法,于给药前及给药后30 min、90 min、180 min、24 h对动物机体行为、感觉、反射等功能进行观察。结果:空白对照组及牛蒡子苷元0.5、2.5和12.5 mg·kg-1剂量组进食、手指接近、头部接触、唤醒、体温等40余项观察指标均未见异常,阳性对照组动物出现明显的中枢神经抑制和体温降低。结论:本试验条件下,大鼠单次皮下注射0.5、2.5和12.5 mg·kg-1的牛蒡子苷元未见动物神经行为发生明显改变。
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关键词
功能观察组合试验(FOB)
牛蒡子苷元
中枢神经系统
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职称材料
题名
猪流行性腹泻病毒RT-RAA-LFD检测方法的建立
1
作者
仇德洋
王海燕
郑佳
杜建才
陈昭
李桂梅
机构
青岛农业大学动物医学院
鲁南制药集团股份有限公司新药安评中心
德州市畜牧兽医事业发展
中心
出处
《中国动物检疫》
2025年第7期90-95,共6页
基金
山东省生猪产业技术体系项目(SDAIT-08-07)。
文摘
为开发一种可靠、简易、便捷的现场猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,基于反转录重组酶介导等温扩增(RT-RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,建立了用于现场检测PEDV的RT-RAA-LFD方法。根据PEDV N基因保守序列进行引物和探针设计,通过试验优选出一套引物及一条探针,同时对RT-RAA反应时间和温度条件进行优化。优化后的方法在37℃恒温反应15 min,即可实现对PEDV目的基因片段的有效扩增;与其他常见腹泻病毒无交叉反应,最低检测限为1.23×10^(1) copies/μL;对134份临床样品进行检测,阳性检出率为5.97%,与国标检测方法结果一致。结果表明,本研究建立的PEDV RT-RAA-LFD检测方法操作简便,结果特异、灵敏,不需要专业的实验室设备和实验人员,适用于在资源有限地区对PEDV的检测,能够满足基层临床工作人员的需求。
关键词
猪流行性腹泻病毒
重组酶介导等温扩增
侧向层析试纸条
Keywords
PEDV
RT-RAA
LFD
分类号
S851.3 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
猪圆环病毒2型和弓形虫双重TaqMan荧光定量PCR法的建立及应用
2
作者
王海燕
仇德洋
蔺雅婷
杜建才
姚方方
吕延飞
刘洋
郑佳
机构
青岛农业大学动物医学院
鲁南制药集团股份有限公司新药安评中心
德州市畜牧兽医事业发展
中心
出处
《中国动物检疫》
2025年第6期92-98,共7页
基金
山东省生猪产业技术体系项目(SDAIT-08-07)。
文摘
猪圆环病毒2型(PCV2)感染和弓形虫病(toxoplasmosis)在临床症状上具有一定的相似性因而难以准确辨别。为建立可同时鉴别PCV2和弓形虫(Toxoplasma gondii,Tox)的检测方法,针对PCV2 ORF2和Tox基因组529重复序列(Rep G529)设计特异性引物和Taq Man探针,经过优化引物、探针浓度和反应条件,建立了同时检测这两种病原的双重Taq Man荧光定量PCR方法。该方法仅特异性扩增PCV2和Tox,与其他病原无交叉反应,特异性强;对PCV2质粒标准品的最低检测限为1.21×10~1 copies/μL,对Tox质粒的最低检测限为1.17×10~1 copies/μL,具有较高的敏感性;组内和组间变异系数均小于5%,具有良好的重复性。应用本试验建立方法和国标荧光定量PCR方法同时检测187份血清、脾脏临床样品,结果PCV2和Tox的阳性符合率分别为93.33%和100%。该方法的建立为PCV2和Tox的批量、快速和特异性鉴别检测提供了技术支撑。
关键词
猪圆环病毒2型
弓形虫
双重荧光定量PCR
Keywords
PCV2
Toxoplasma gondi
dual fluorescence quantitative PCR
分类号
S851.3 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
功能观察组合试验(FOB)评价牛蒡子苷元对大鼠中枢神经系统的影响
被引量：
6
3
作者
李欣
姚景春
李涛
李会恩
高雷
机构
鲁南制药集团股份有限公司新药安评中心
出处
《中华中医药学刊》
CAS
北大核心
2015年第2期441-443,共3页
文摘
目的:采用功能观察组合试验(FOB)评价牛蒡子苷元注射液对大鼠中枢神经系统的影响。方法:健康SD大鼠50只,雌雄各半,设空白对照组、牛蒡子苷元0.5、2.5和12.5 mg·kg-1剂量组及氯丙嗪20 mg·kg-1阳性对照组,每组10只动物。空白对照组及牛蒡子苷元0.5、2.5、12.5 mg·kg-1剂量组单次皮下注射给药,阳性对照组灌胃给药。各组动物根据FOB试验方法,于给药前及给药后30 min、90 min、180 min、24 h对动物机体行为、感觉、反射等功能进行观察。结果:空白对照组及牛蒡子苷元0.5、2.5和12.5 mg·kg-1剂量组进食、手指接近、头部接触、唤醒、体温等40余项观察指标均未见异常,阳性对照组动物出现明显的中枢神经抑制和体温降低。结论:本试验条件下,大鼠单次皮下注射0.5、2.5和12.5 mg·kg-1的牛蒡子苷元未见动物神经行为发生明显改变。
关键词
功能观察组合试验(FOB)
牛蒡子苷元
中枢神经系统
Keywords
functional observation battery（FOB）
arctigenin
central nervous system
分类号
R965.3 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪流行性腹泻病毒RT-RAA-LFD检测方法的建立
仇德洋
王海燕
郑佳
杜建才
陈昭
李桂梅
《中国动物检疫》
2025
0
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职称材料
2
猪圆环病毒2型和弓形虫双重TaqMan荧光定量PCR法的建立及应用
王海燕
仇德洋
蔺雅婷
杜建才
姚方方
吕延飞
刘洋
郑佳
《中国动物检疫》
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
功能观察组合试验(FOB)评价牛蒡子苷元对大鼠中枢神经系统的影响
李欣
姚景春
李涛
李会恩
高雷
《中华中医药学刊》
CAS
北大核心
2015
6
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