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番茄SlMYB80转录激活结构域的鉴定及其在拟南芥花粉发育中的功能验证
1
作者
张雨晴
董丽雪
+4 位作者
张宝月
张颖
刘雪敖
熊双喜
张洪霞
《生物技术通报》
北大核心
2025年第10期222-232,共11页
【目的】MYB80是拟南芥和水稻中的一个花粉壁形成关键调节因子,探究番茄中同源基因SlMYB80的功能并鉴定其转录激活结构域,为进一步丰富MYB转录因子对番茄雄性不育系基因资源提供理论依据。【方法】以栽培番茄‘Moneymaker’为野生型材料...
【目的】MYB80是拟南芥和水稻中的一个花粉壁形成关键调节因子,探究番茄中同源基因SlMYB80的功能并鉴定其转录激活结构域,为进一步丰富MYB转录因子对番茄雄性不育系基因资源提供理论依据。【方法】以栽培番茄‘Moneymaker’为野生型材料,以其花苞cDNA为模板克隆SlMYB80基因。利用花椰菜花叶病毒CaMV 35s启动子驱动SlMYB80编码区(CDS)与绿色荧光蛋白eGFP编码序列融合,用于检测SlMYB80蛋白亚细胞定位。同时,将该基因编码区分成4个片段,分别连接酵母表达载体pGTBKT7,与pGTADT7共转酵母进行互作试验以确定其转录激活结构域。此外,构建拟南芥MS188(Male Sterile 188)/AtMYB80启动子驱动SlMYB80 CDS的融合双元载体p AtMYB80:SlMYB80并互补拟南芥ms188突变体,探究SlMYB80的生物学功能。【结果】MYB80氨基酸序列比对和进化树结果表明,MYB80的氨基酸序列在陆生植物中十分保守,特别是R2R3 DNA结合结构域区域;烟草亚细胞定位试验表明,SlMYB80-eGFP定位于细胞核。酵母互作试验表明,SlMYB80转录激活结构域位于肽链C末端17个氨基酸残基;拟南芥ms188突变体互补结果表明,在转基因互补突变体植株的花苞中表达SlMYB80基因,能使部分花粉正常形成,从而恢复部分育性。【结论】SlMYB80作为拟南芥MS188/AtMYB80的直系同源基因编码一个R2R3 MYB转录因子定位于细胞核中,其多肽链C末端17个氨基酸为激活结构域,能部分互补ms188突变体花粉败育的表型,揭示了MYB80转录因子功能的保守性。
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关键词
番茄
SlMYB80
转录因子
转录激活结构域
雄性不育
同源性分析
酵母杂交
功能互补
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题名
番茄SlMYB80转录激活结构域的鉴定及其在拟南芥花粉发育中的功能验证
1
作者
张雨晴
董丽雪
张宝月
张颖
刘雪敖
熊双喜
张洪霞
机构
鲁东大学农林工程研究院园艺学院烟台特色植物基因编辑种质创新技术中心
出处
《生物技术通报》
北大核心
2025年第10期222-232,共11页
基金
山东省自然科学基金青年项目(ZR2022QC145)。
文摘
【目的】MYB80是拟南芥和水稻中的一个花粉壁形成关键调节因子,探究番茄中同源基因SlMYB80的功能并鉴定其转录激活结构域,为进一步丰富MYB转录因子对番茄雄性不育系基因资源提供理论依据。【方法】以栽培番茄‘Moneymaker’为野生型材料,以其花苞cDNA为模板克隆SlMYB80基因。利用花椰菜花叶病毒CaMV 35s启动子驱动SlMYB80编码区(CDS)与绿色荧光蛋白eGFP编码序列融合,用于检测SlMYB80蛋白亚细胞定位。同时,将该基因编码区分成4个片段,分别连接酵母表达载体pGTBKT7,与pGTADT7共转酵母进行互作试验以确定其转录激活结构域。此外,构建拟南芥MS188(Male Sterile 188)/AtMYB80启动子驱动SlMYB80 CDS的融合双元载体p AtMYB80:SlMYB80并互补拟南芥ms188突变体,探究SlMYB80的生物学功能。【结果】MYB80氨基酸序列比对和进化树结果表明,MYB80的氨基酸序列在陆生植物中十分保守,特别是R2R3 DNA结合结构域区域;烟草亚细胞定位试验表明,SlMYB80-eGFP定位于细胞核。酵母互作试验表明,SlMYB80转录激活结构域位于肽链C末端17个氨基酸残基;拟南芥ms188突变体互补结果表明,在转基因互补突变体植株的花苞中表达SlMYB80基因,能使部分花粉正常形成,从而恢复部分育性。【结论】SlMYB80作为拟南芥MS188/AtMYB80的直系同源基因编码一个R2R3 MYB转录因子定位于细胞核中,其多肽链C末端17个氨基酸为激活结构域,能部分互补ms188突变体花粉败育的表型,揭示了MYB80转录因子功能的保守性。
关键词
番茄
SlMYB80
转录因子
转录激活结构域
雄性不育
同源性分析
酵母杂交
功能互补
Keywords
tomato
SlMYB80
transcription factor
transcriptional activation domain
male sterility
homology analysis
yeast hybrid
functional complement
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
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作者
出处
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1
番茄SlMYB80转录激活结构域的鉴定及其在拟南芥花粉发育中的功能验证
张雨晴
董丽雪
张宝月
张颖
刘雪敖
熊双喜
张洪霞
《生物技术通报》
北大核心
2025
0
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