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TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞基质金属蛋白酶2及其抑制剂表达 被引量：3
1
作者 牟丽丽 刘桂香 +2 位作者 王玲 韩明磊 高岩 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第11期1016-1020,1024,共6页
目的观察转染基质金属蛋白酶2抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase2,TIMP-2)基因的豚鼠巩膜成纤维细胞不同时间增生能力及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)和TIMP-2的表达,探讨基因治疗近视的可行性... 目的观察转染基质金属蛋白酶2抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase2,TIMP-2)基因的豚鼠巩膜成纤维细胞不同时间增生能力及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)和TIMP-2的表达,探讨基因治疗近视的可行性。方法随机选取三色健康豚鼠,组织块法体外培养原代巩膜成纤维细胞,免疫组织化学法进行波形蛋白的鉴定,取第3～6代细胞进行实验。分子克隆构建携带TIMP-2基因的真核表达载体,转染豚鼠巩膜成纤维细胞,MTT法观察转染后12h、24h、48h、3d、5d、7d细胞增生能力。提取总RNA,二步法逆转录-聚合酶链反应检测MMP-2mRNA及TIMP-2mRNA的表达水平。结果豚鼠巩膜成纤维细胞原代、传代培养生长良好,波形蛋白鉴定阳性。转染3d、5d、7d TIMP-2基因转染组成纤维细胞的增生速度分别为0.6724±0.0092、0.7963±0.0060、0.8462±0.0064,明显快于正常对照组成纤维细胞(0.5810±0.0120、0.6525±0.0072、0.7129±0.0132),差异均具有显著统计学意义(均为P<0.01)。转染48h MMP-2mRNA表达即开始减少,转染3d时表达明显减少,达到最低,除转染12h与24h之间外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间MMP-2mRNA表达差异均有统计学意义(均为P<0.05)。TIMP-2mRNA表达在转染48h时即开始增加,除12h与24h外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间TIMP-2mRNA表达差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论转染TIMP-2基因对豚鼠巩膜成纤维细胞有促增生作用,TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞抑制MMP-2mRNA的表达,可在一定程度上阻止近视发展中巩膜组织的丢失与重塑。 展开更多
关键词 转染 豚鼠巩膜成纤维细胞 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶2特异性组织抑制剂
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胰高血糖素对豚鼠巩膜成纤维细胞增生的影响及其机制 被引量：1
2
作者 高岩 韩明磊 +1 位作者 牟丽丽 刘桂香 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期915-918,共4页
背景胰高血糖素与近视的发生密切相关，在一定浓度范围内可抑制近视的发展，但其确切的作用机制尚不明确。目的研究胰高血糖素对豚鼠巩膜成纤维细胞（GSFCs）生长的影响及作用机制。方法获取出生15d的健康纯种豚鼠的巩膜组织，采用组织... 背景胰高血糖素与近视的发生密切相关，在一定浓度范围内可抑制近视的发展，但其确切的作用机制尚不明确。目的研究胰高血糖素对豚鼠巩膜成纤维细胞（GSFCs）生长的影响及作用机制。方法获取出生15d的健康纯种豚鼠的巩膜组织，采用组织块培养法进行GSFCs的培养和传代，采用免疫组织化学法检测培养的细胞中波形蛋白抗体、细胞角蛋白抗体及S-100抗体的表达。用完全随机法将培养的细胞分组，分别在不同组的培养孔中加入5、10、50、100、200μg／L胰高血糖素培养GSFCs24h，不加胰高血糖素培养的为对照组。利用MTT比色法观察各质量浓度胰高血糖素作用后及50btg／L胰高血糖素作用1、2、3、5、7dGSFCs的生长情况，酶联免疫检测仪测量波长490nm处各孔细胞的吸光度（A490）值，并用ELISA法检测培养72h不同质量浓度胰高血糖素对GSFCs中基质金属蛋白酶2／组织金属蛋白酶抑制剂2（MMP-2／TIMP-2）表达水平的影响，以酶标仪测定450nm波长处各孔细胞的A450值。结果GSFCs传代培养后密度较低时呈枝状排列，密度较高时呈束状或漩涡状排列，波形蛋白抗体反应阳性。随着胰高血糖素质量浓度的增加，细胞的A490值逐渐升高，差异有统计学意义（F=32．340，P=0．013），胰高血糖素质量浓度〉10μg／L时，细胞的A490值较对照组明显升高，差异均有统计学意义（t=5．575、6．627、16．074、12．003，P〈0．05）。培养孔中加入50μg／L胰高血糖素后随着培养时间的延长，细胞的A450值升高，差异有统计学意义（F时间=10．610，P=0．024），且与对照组比较细胞的A490值升高，差异有统计学意义（F。=9．068，P=0．039）。胰高血糖素质量浓度在5～200μg／L时，随胰高血糖素质量浓度的增加，MMP-2含量逐渐减少，差异有统计学意义（F=153．639，P=0．036），但TIMP-2含量的变化差异无统计学意义（F=24．770，P=3．250）。结论胰高血糖素可促进体外培养的GSFCs的增生，其作用呈剂量和时间依赖性，其作用机制可能是下调MMP-2在GSFCs中的表达，MMP-2／TIMP-2失衡所致。 展开更多
关键词 巩膜成纤维细胞 胰高血糖素 基质金属蛋白酶2/组织金属蛋白酶抑制剂2
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多焦点和单焦点人工晶状体植入术治疗白内障的临床疗效比较 被引量：8
3
作者 李振波 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期973-977,共5页
背景 多焦点人工晶状体（IOL）根据衍射-折射的光学原理,可以产生远近两个焦点,全程视力优于单焦点IOL,可以使白内障患者同时获得良好的远、中、近视力. 目的 比较多焦点IOL植入术与单焦点IOL植入术术后白内障患者的临床疗效.方法 采用... 背景 多焦点人工晶状体（IOL）根据衍射-折射的光学原理,可以产生远近两个焦点,全程视力优于单焦点IOL,可以使白内障患者同时获得良好的远、中、近视力. 目的 比较多焦点IOL植入术与单焦点IOL植入术术后白内障患者的临床疗效.方法 采用前瞻性队列研究设计,纳入2010年6月至2012年9月在潍坊高密市人民医院眼科收治的白内障患者100例100眼,将患者分为多焦点IOL组和单焦点IOL组,2个组间患者人口基线特征匹配.多焦点IOL组在超声乳化白内障摘出术后植入Acrysof ReSTOR SA60D3多焦点IOL,单焦点IOL组植入Acrysof SN60AT单焦点IOL.术后3个月对两组患者术眼的裸眼远视力（UCDVA）、最佳矫正远视力（BCDVA）、裸眼近视力（UCNVA）、最佳矫正近视力（BCNVA）、裸眼中近距离视力（UCMVA）和远视力矫正后的近视力（DCNVA）等指标进行观察和比较,对两组患者术后的近立体视锐度以及瞳孔直径分别为3 mm和5 mm时的IOL高阶像差、最适阅读距离和阅读速度等进行比较和分析,通过问卷调查对两组患者对各视觉功能区的满意度进行分析. 结果 术后3个月多焦点IOL组术眼的UCNVA和DCNVA明显优于单焦点IOL组,差异均有统计学意义（t=15.48、22.44,P＜0.05）；多焦点IOL组术眼在25、30、40、50、60 cm的近距离、中距离处视力均明显优于单焦点IOL组,差异均有统计学意义（t=12.60、16.75、23.18、14.04、7.60,均P＜0.05）；多焦点IOL组患者的裸眼近立体视锐度为（49.1±l5.2）”,明显小于单焦点IOL组的（85.3±18.6）”,差异有统计学意义（t=10.66,P＜0.05）；2个组间患者瞳孔直径为3 mm和5 mm时术眼的总高阶像差、球差及彗差的差异均无统计学意义（P＞0.05）；多焦点IOL组患者的最适阅读距离为（33.5±4.1）cm,较单焦点IOL组的（46.3±5.2）cm明显缩短,差异有统计学意义（t=13.67,P＜0.05）；多焦点IOL组患者的阅读速度为（172.5±52.3）字/min,明显快于单焦点IOL组的（108.3±31.4）字/min,差异有统计学意义（t=7.44,P＜0.05）；多焦点IOL组对近视力功能区和中视力功能区视觉质量满意的患者明显多于单焦点IOL组,差异均有统计学意义（x2 =56.59、40.85,P＜0.05）,多焦点IOL组对远视力功能区满意的患者数与单焦点IOL组比较差异无统计学意义（x2=3.09,P＞0.05）.结论 多焦点IOL植入术治疗白内障能够使患者在远距离成像清晰的基础上,保持近距离以及中等距离的成像清晰,改善了白内障患者术后的生活质量. 展开更多
关键词 人工晶状体 多焦点 单焦点 白内障 视觉质量
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