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烟酸的电化学行为与测定 被引量:11
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作者 程发良 莫金垣 戴晓云 《分析测试学报》 CAS CSCD 1999年第1期21-24,共4页
用循环伏安法研究了不同支持电解质溶液中烟酸的电化学行为。烟酸在玻碳电极表面有良好的电化学响应信号。在碱性介质中,烟酸被不可逆氧化,氧化产物具有电活性,可发生准可逆氧化还原反应;在酸性介质中,烟酸发生两步准可逆氧化还原... 用循环伏安法研究了不同支持电解质溶液中烟酸的电化学行为。烟酸在玻碳电极表面有良好的电化学响应信号。在碱性介质中,烟酸被不可逆氧化,氧化产物具有电活性,可发生准可逆氧化还原反应;在酸性介质中,烟酸发生两步准可逆氧化还原反应。结合红外、紫外光谱分析,提出了烟酸在不同酸度的介质中的电化学反应历程。并根据-0.13V处的氧化峰电流与烟酸浓度的关系。 展开更多
关键词 烟酸 电化学行为 循环伏安法 奶粉 测定
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原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白70在肝癌转移亚细胞中表达上调 被引量:14
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作者 叶丽虹 秦宵然 +5 位作者 张晓东 齐众 钱令嘉 侯志波 王洪辉 徐少峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期244-249,共6页
建立并应用人H74 0 2肝癌细胞SCID鼠肿瘤转移模型 ,从转移肺组织经原代细胞培养 ,筛选并建立转移亚细胞系M H74 0 2 ,进而运用蛋白质组学技术筛选肿瘤转移相关蛋白 .通过二维电泳技术检测 ,比较M H74 0 2细胞和亲本H74 0 2细胞的总蛋白 ... 建立并应用人H74 0 2肝癌细胞SCID鼠肿瘤转移模型 ,从转移肺组织经原代细胞培养 ,筛选并建立转移亚细胞系M H74 0 2 ,进而运用蛋白质组学技术筛选肿瘤转移相关蛋白 .通过二维电泳技术检测 ,比较M H74 0 2细胞和亲本H74 0 2细胞的总蛋白 ,从多个差异蛋白质点中选择出 3个在M H74 0 2细胞中表达明显上调的蛋白质点进行ESI QUAD TOF质谱分析 ,并在MSDB公共蛋白数据库中进行同源比较和分析鉴定 .初步确定这 3个蛋白质分别为原肌球蛋白 (tropomyosin) ,波形纤维蛋白 (vimentin)和热休克蛋白 70 (heatshock 70protein ,HSP70 ) .这些蛋白质参与细胞骨架构成、蛋白质折叠和蛋白质相互作用等许多正常生理活动 ,并有报道原肌球蛋白和波形纤维蛋白与肿瘤转移有关 .利用蛋白质组学方法发现 ,在肝癌转移亚细胞M H74 0 2中 ,原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白 70表达明显上调 ,进一步揭示它们在肿瘤转移中具有重要的作用 . 展开更多
关键词 肝癌 蛋白质组学 肿瘤转移相关蛋白 原肌球蛋白 波形纤维蛋白 热休克蛋白70
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基因打靶置换型载体的构建和应用研究 被引量:6
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作者 戴旭明 薛红 +2 位作者 杨桦 胡以平 傅继梁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期5-8,共4页
目的:构建针对小鼠凝血因子Ⅸ(mFⅨ)基因的基因打靶置换型载体,并用于小鼠胚胎干细胞基因打靶研究。方法:在用噬斑原位杂交法克隆mFⅨ基因组DNA并完成结构分析的基础上,利用常规的分子克隆技术,设计并构建置换型载体,经... 目的:构建针对小鼠凝血因子Ⅸ(mFⅨ)基因的基因打靶置换型载体,并用于小鼠胚胎干细胞基因打靶研究。方法:在用噬斑原位杂交法克隆mFⅨ基因组DNA并完成结构分析的基础上,利用常规的分子克隆技术,设计并构建置换型载体,经过限制性内切酶酶切鉴定和PCR鉴定其结构正确后,用电穿孔法对体外培养的小鼠胚胎干细胞R1株进行基因转移,经G418/GANC(Gancyclovir)分组药物选择,进行pMFⅣDEL载体的应用研究。结果:构建获得包括正负双向选择基因的表达元件、长短同源臂等在内的基因打靶置换型载体pMFⅨDEL,在胚胎干细胞中能有效地发生重组,正负双向选择系统的应用对同源重组事件富集效率提高了24倍。结论:本研究构建获得了针对mFⅨ基因的置换型载体,在胚胎干细胞基因打靶中得到有效的应用。 展开更多
关键词 基因打靶 置换型 载体 胚胎干细胞 凝血因子Ⅸ
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固定化血红蛋白氧载体的研究(Ⅱ)──氧化纤维素共价键联血红蛋白 被引量:7
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作者 孔德领 贾永会 +2 位作者 俞耀庭 童明容 王子晖 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第10期1584-1588,共5页
以纤维素为载体,经高碘酸钠氧化后共价键联血红蛋白,制备氧载体.研究了氧化条件对血红蛋白固定量的影响.纤维素只有经过预氧化、碱处理和再氧化三步活化反应,才能使血红蛋白大量固定化,每克纤维素固定血红蛋白量达1.0g.氧载... 以纤维素为载体,经高碘酸钠氧化后共价键联血红蛋白,制备氧载体.研究了氧化条件对血红蛋白固定量的影响.纤维素只有经过预氧化、碱处理和再氧化三步活化反应,才能使血红蛋白大量固定化,每克纤维素固定血红蛋白量达1.0g.氧载体稳定性好,血红蛋白不脱落.经铁氰化钾氧化,氧载体放氧效率为33.1%. 展开更多
关键词 氧载体 氧化纤维素 血红蛋白 固定化 人工鳃
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固定化血红蛋白氧载体的研究 I.聚乙烯醇包埋血红蛋白 被引量:4
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作者 贾永会 孔德领 +2 位作者 俞耀庭 童明容 王子晖 《功能高分子学报》 CAS CSCD 1998年第3期379-384,共6页
固定化血红蛋白可以作为氧载体,从海水中提取氧气,为人类在水下活动提供氧源。以聚乙烯醇为载体材料,固定化血红蛋白,制备氧载体。研究了该氧载体的氧解离性能以及戊二醛和六磷酸肌醇对氧载体氧解离性能的影响。血红蛋白的固定量达... 固定化血红蛋白可以作为氧载体,从海水中提取氧气,为人类在水下活动提供氧源。以聚乙烯醇为载体材料,固定化血红蛋白,制备氧载体。研究了该氧载体的氧解离性能以及戊二醛和六磷酸肌醇对氧载体氧解离性能的影响。血红蛋白的固定量达0.6g/g,氧化法测得氧载体的氧解离率为53.3%。戊二醛后交联提高了氧载体的稳定性。六磷酸肌醇使氧解离率由24.8%提高到60.0%。 展开更多
关键词 氧载体 聚乙烯醇 人工鳃 血红蛋白 固定化
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小鼠神经细胞cdc2类蛋白激酶调节亚基p35^(Nck5a)基因的克隆和鉴定 被引量:2
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作者 周常文 戴旭明 +1 位作者 薛红 傅继梁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期716-719,共4页
目的: 获取小鼠神经细胞cdc2 类激酶(Nclk)调节亚基p35Nck5a基因组DNA,用于构建基因重复性打靶载体。方法: 用噬斑原位杂交法从λPS基因文库中克隆小鼠p35Nck5a基因;用限制性内切酶酶切图谱分析和... 目的: 获取小鼠神经细胞cdc2 类激酶(Nclk)调节亚基p35Nck5a基因组DNA,用于构建基因重复性打靶载体。方法: 用噬斑原位杂交法从λPS基因文库中克隆小鼠p35Nck5a基因;用限制性内切酶酶切图谱分析和序列测定进行基因组结构分析。结果: 获得较完整的p35Nck5a基因组DNA酶切图谱;该基因由一个外显子组成,长924 bp,编码307 个氨基酸的蛋白质,内含子长208 bp,位于5′端侧翼序列中。测定的序列(- 1 080 至+ 924 bp 和+ 3 721至+ 4 222 bp)与已报道的序列基本一致,仅在- 135和- 295位各插入一个碱基G。结论: 得到的p35Nck5a基因组DNA 片段长约11 kb, 其5′端侧翼序列含有一些已知的调控序列,3′端含有poly A 的信号序列。 展开更多
关键词 P35^Nck5a基因 克隆 序列分析 cdc2类激酶 小鼠
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A型γ-氨基丁酸受体α1亚基Cys^(166)-Leu^(296)片段的配体结合和结构性质
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作者 邓诣群 朱振宇 +1 位作者 马涧泉 薛红 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期367-372,共6页
研究A型γ 氨基丁酸受体 (γ aminobutyricacidtypeA ,GABAAreceptor)α1亚基Cys166 Leu2 96片段的苯并二氮杂 (benzodiazepine ,BZ)结合位点及其结构特性 ,了解该片段结构与功能的关系 .利用PfuDNA多聚酶依赖的点突变技术将该片段的... 研究A型γ 氨基丁酸受体 (γ aminobutyricacidtypeA ,GABAAreceptor)α1亚基Cys166 Leu2 96片段的苯并二氮杂 (benzodiazepine ,BZ)结合位点及其结构特性 ,了解该片段结构与功能的关系 .利用PfuDNA多聚酶依赖的点突变技术将该片段的每一残基用丙氨酸替代 ,通过E .coli体系过表达 ,纯化得到各种突变蛋白 .运用圆二色性 (circulardichroism ,CD)技术测定突变蛋白的二级结构 ,借助荧光各向异性 (fluorescenceanisotropy ,FA)、荧光共振能量转移 (fluorescenceresonanceenergytrans fer,FRET)技术测定其与BZ荧光配基Bodipy FLRo 1986 (BFR)的结合强弱 .通过与野生型的比较 ,确定其残基是否与结构和或结合相关 .结果显示 ,突变体R191A、G2 12A、S2 13A、R2 14A及V2 79A的结合能力减弱 2~ 3倍 ,除V2 79A显著增加α螺旋外均无二级结构的改变 .E193A、S2 78A、V2 79A和P2 80A的α螺旋显著增多 ,N2 75A和R2 76A的α螺旋则显著减少 .推测Cys166 Leu2 96的Arg191,Gly2 12 ,Ser2 13 和Arg2 14 可能位于BZ的结合袋 ,其第 4个环区 (Glu2 10 Asn2 16)与结合密切相关 .Glu193 、Ser2 78和Pro2 80 参与维持β折叠结构 ,而Asn2 75和Arg2 76参与维持α螺旋结构 .Cys166 Leu2 96的第 9个环区 (Asn2 75 Pro2 80 )对其结? 展开更多
关键词 A型γ-氨基丁酸受体α1亚基 Cys^166-Leu^296片段 配体结合 性质 二级结构 苯并二氮杂Zhuo 镇静药
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