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慢病毒载体构建稳定的maspin表达敲减食管癌细胞株
被引量：
4
1
作者
陈静
周园
+2 位作者
郑磊
王前
蔡贞
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014年第2期138-142,共5页
目的前期研究表明maspin在食管癌组织中表达下调。文中利用慢病毒载体介导短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)感染食管癌细胞株,诱导maspin基因沉默,构建稳定的maspin表达敲减细胞株。方法合成maspin特异shRNA序列(shMas1和shMas2),构...
目的前期研究表明maspin在食管癌组织中表达下调。文中利用慢病毒载体介导短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)感染食管癌细胞株,诱导maspin基因沉默,构建稳定的maspin表达敲减细胞株。方法合成maspin特异shRNA序列(shMas1和shMas2),构建shMas1和shMas2慢病毒表达载体;利用293FT细胞包装病毒后,感染食管癌细胞株HKESC-2;经嘌呤霉素筛选获得稳定感染细胞株。定量PCR和免疫印迹法检测干扰效果。结果成功构建shMaspin的慢病毒表达载体;与野生型HKESC-2细胞比较,获得的稳定maspin表达敲减细胞株shMas1/HK2和shMas2/HK2生长特性无明显变化,其maspin mRNA及蛋白质表达水平均明显降低,maspin mRNA敲减效率分别为37.8%及58.2%,maspin蛋白质表达的相对抑制率分别为49%和53%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了稳定的maspin表达敲减的食管癌细胞株shMas1/HK2和shMas2/HK2。
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关键词
MASPIN
慢病毒载体
短发夹RNA
食管鳞状细胞癌
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职称材料
题名
慢病毒载体构建稳定的maspin表达敲减食管癌细胞株
被引量：
4
1
作者
陈静
周园
郑磊
王前
蔡贞
机构
南方医科
大学
附属南方医院检验科
香港大学李嘉诚医学院解剖学系
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014年第2期138-142,共5页
基金
国家自然科学基金(81101609)
广东省医学科研基金(A2013375)
文摘
目的前期研究表明maspin在食管癌组织中表达下调。文中利用慢病毒载体介导短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)感染食管癌细胞株,诱导maspin基因沉默,构建稳定的maspin表达敲减细胞株。方法合成maspin特异shRNA序列(shMas1和shMas2),构建shMas1和shMas2慢病毒表达载体;利用293FT细胞包装病毒后,感染食管癌细胞株HKESC-2;经嘌呤霉素筛选获得稳定感染细胞株。定量PCR和免疫印迹法检测干扰效果。结果成功构建shMaspin的慢病毒表达载体;与野生型HKESC-2细胞比较,获得的稳定maspin表达敲减细胞株shMas1/HK2和shMas2/HK2生长特性无明显变化,其maspin mRNA及蛋白质表达水平均明显降低,maspin mRNA敲减效率分别为37.8%及58.2%,maspin蛋白质表达的相对抑制率分别为49%和53%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了稳定的maspin表达敲减的食管癌细胞株shMas1/HK2和shMas2/HK2。
关键词
MASPIN
慢病毒载体
短发夹RNA
食管鳞状细胞癌
Keywords
Maspin
Lentivirus expression system
shRNA
Esophageal squamous cell carcinoma
分类号
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
慢病毒载体构建稳定的maspin表达敲减食管癌细胞株
陈静
周园
郑磊
王前
蔡贞
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014
4
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