Ser^(411)磷酸化p70^(S6k)的细胞免疫化学定位

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作者 夏立新 刘志刚 吴子斌 《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS 北大核心 2006年第1期54-56,共3页

培养NIH3T3细胞,结合免疫印迹和细胞免疫荧光染色法,对p70的S6激酶(p70^(S6K))及其第411位丝氨酸(Ser^(411))处于磷酸化状态的细胞定位进行研究.利用免疫荧光染色技术,发现p70^(S6K)存在于细胞的各个部分,而Ser^(411)磷酸化后的p70^(S6K... 培养NIH3T3细胞,结合免疫印迹和细胞免疫荧光染色法,对p70的S6激酶(p70^(S6K))及其第411位丝氨酸(Ser^(411))处于磷酸化状态的细胞定位进行研究.利用免疫荧光染色技术,发现p70^(S6K)存在于细胞的各个部分,而Ser^(411)磷酸化后的p70^(S6K)只存在细胞核内.将细胞核与细胞质分离,并利用抗磷酸化Ser^(411)的抗体进行免疫印迹分析,发现只有细胞核部分才出现免疫条带,说明Ser^(411)磷酸化后的p70^(S6K)特异性地存在于细胞核当中. 展开更多

关键词 p70^S6k Ser^411磷酸化 细胞免疫荧光染色 免疫印迹

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天花粉蛋白基因在水稻中转化及抗虫研究 被引量：10

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作者 何锶洁 徐琼芳 +4 位作者 唐祚舜 叶松青 储成才 邵鹏柱 田文忠 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第5期8-10,共3页

利用基因枪转化法将天花粉蛋白基因导入水稻。经PCR、Southern和North ern杂交分析证明外源基因已整合到水稻基因组中并有转录。抗虫试验表明 ,与对照比较转基因水稻明显地增强了对螟虫、稻飞虱的抗性。

关键词 水稻 天花粉蛋白基因 转化 抗虫性

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天花粉蛋白结构改造对引产活性的影响 被引量：3

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作者 何贤辉 孙荭 +3 位作者 曾耀英 徐丽慧 邵鹏柱 谭兆祥 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2000年第4期11-15,共5页

目的 :研究结构改造对天花粉蛋白 (TCS)引产活性的影响。方法 :利用定点突变将TCS第 2 19位的天冬酰胺残基改变为半胱氨酸残基 (Q2 19C)以供定点聚乙二醇 (PEG)修饰 ,测定修饰产物的致核糖体失活活性及小鼠中期引产活性。结果 :PEG修饰... 目的 :研究结构改造对天花粉蛋白 (TCS)引产活性的影响。方法 :利用定点突变将TCS第 2 19位的天冬酰胺残基改变为半胱氨酸残基 (Q2 19C)以供定点聚乙二醇 (PEG)修饰 ,测定修饰产物的致核糖体失活活性及小鼠中期引产活性。结果 :PEG修饰使TCS的致核糖体失活活性约降低90 % ;相对分子质量为 50 0 0的PEG修饰对引产活性无明显影响 ,而相对分子质量为 2 0 0 0 0的PEG修饰却明显增强引产活性 ;此外 ,PEG修饰使TCS的体内半衰期大为延长。结论 :PEG定点修饰TCS可加强其引产活性 ,原因可能是较长的体内半衰期延长了药物作用的时间。 展开更多

关键词 天花粉蛋白 修饰 引产活性 结构改造 引产药物

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天花粉蛋白的定点聚乙二醇修饰 被引量：3

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作者 何贤辉 聂慧玲 +2 位作者 邵鹏柱 柯一保 谭兆祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期924-927,共4页

用一种定点修饰天花粉蛋白（ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｉｎ，ＴＣＳ）的方法，将聚乙二醇（ＰＥＧ）偶联到预先选定的位点．利用ｎＴＣＳ无半胱氨酸（Ｃｙｓ）残基这一特点，通过定点突变将一个Ｃｙｓ残基引入ＴＣＳ以取代第７位的丝氨酸... 用一种定点修饰天花粉蛋白（ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｉｎ，ＴＣＳ）的方法，将聚乙二醇（ＰＥＧ）偶联到预先选定的位点．利用ｎＴＣＳ无半胱氨酸（Ｃｙｓ）残基这一特点，通过定点突变将一个Ｃｙｓ残基引入ＴＣＳ以取代第７位的丝氨酸（Ｓｅｒ）残基．然后，与巯基反应的ＰＥＧ－ｍ ａｌｅｉｍ ｉｄｅ 即可偶联到新引入的Ｃｙｓ 残基上．经纯化得到均一的ＰＥＧ－ＴＣＳ复合物，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上显示一条区带，表观分子量为３８ ｋＤ．复合物的体外致核糖体失活活性降低了６倍，但其体内引产活性与ｎＴＣＳ相同．定点ＰＥＧ修饰方法为改造ＴＣＳ提供了新途径． 展开更多

关键词 天花粉蛋白 定点突变 PEG 修饰 RIP 抗肿瘤药物

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广谱脱色细菌的选育及脱色的研究 被引量：4

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作者 黄晓维 张颖 +2 位作者 李松清 简浩然 曹宏威 《工业水处理》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期28-30,共3页

采用富集法从印染厂的污泥中分离到一株脱色细菌,经鉴定属假单胞菌(Pseudomonas、AP),暂取名GM-1G菌株,利用该菌株对74种分属于活性、酸性、直接和分散类别的染料进行了脱色试验,发现GM-1G对不同类型不同颜色及不同发色基团的染料均具... 采用富集法从印染厂的污泥中分离到一株脱色细菌,经鉴定属假单胞菌(Pseudomonas、AP),暂取名GM-1G菌株,利用该菌株对74种分属于活性、酸性、直接和分散类别的染料进行了脱色试验,发现GM-1G对不同类型不同颜色及不同发色基团的染料均具有明显的脱色作用。在最适脱色条件为:pH7.0、26～32℃、80～100%生长培养基的营养浓度下,采用静置培养的方式。将GM-1G固定于多孔陶珠上,填充于柱式反应器中连续运行20天处理染料废水,停留时间2小时,平均脱色率达90%以上。 展开更多

关键词 印染废水 脱色 选育 细菌 废水处理

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定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法 被引量：5

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作者 邓利 张为民 +1 位作者 郑汉其 林浩然 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2003年第1期7-11,共5页

目的　建立液相杂交 核糖核酸酶保护测定 (RibonucleaseProtectionAssay,RPA)技术定量检测黑鲷(Sparusmacrocephalus)生长激素受体mRNA水平。方法　将黑鲷生长激素受体cDNA片断亚克隆至pGEM T载体 ,制备特异性的放射性反义RNA探针及正... 目的　建立液相杂交 核糖核酸酶保护测定 (RibonucleaseProtectionAssay,RPA)技术定量检测黑鲷(Sparusmacrocephalus)生长激素受体mRNA水平。方法　将黑鲷生长激素受体cDNA片断亚克隆至pGEM T载体 ,制备特异性的放射性反义RNA探针及正义RNA ,将反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA进行液相杂交 ,用RNaseA和RNaseT1 降解杂交产物的单链RNA ,双链杂交体得到保护 ,然后检测杂交体的分子大小及放射强度。结果　检测出了黑鲷生长激素受体反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA的特异性杂交片断 ,由此建立了定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交 RNase保护法 ,并采用该方法在黑鲷的多种组织中检测出了生长激素受体基因的表达 ,表达水平在肝脏中最高。该结果与我们曾采用生长激素放射受体分析法对黑鲷生长激素受体所研究的结果相吻合。结论　为进一步深入研究鱼类生长激素受体分子内分泌的调控理论提供了有力手段。 展开更多

关键词 黑鲷 受体 促生长素 核糖核酸酶保护测定 液相杂交

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槐米对微粒体和神经细胞氧化损伤的保护作用 被引量：3

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作者 卢艳花 杜长斌 +2 位作者 刘建文 吴子斌 魏东芝 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期845-847,共3页

关键词 槐米 膜脂氧化 神经细胞 过氧化氢

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从噬菌体构象型7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽 被引量：1

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作者 吉清 何凤田 +4 位作者 李蓉芬 高会广 郑英如 钟小林 郑汉其 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期398-401,共4页

目的 :从噬菌体构象型 7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽。方法 :用重组人BLyS筛选噬菌体构象型 7肽库 ,用间接ELISA、竞争ELISA和细胞增殖活性试验鉴定噬菌体克隆。结果 :经过 3轮亲和筛选 ,噬菌体的回收率增加 ,阳性克隆得到富集。所获两... 目的 :从噬菌体构象型 7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽。方法 :用重组人BLyS筛选噬菌体构象型 7肽库 ,用间接ELISA、竞争ELISA和细胞增殖活性试验鉴定噬菌体克隆。结果 :经过 3轮亲和筛选 ,噬菌体的回收率增加 ,阳性克隆得到富集。所获两个阳性噬菌体克隆能特异性地抑制BLyS刺激细胞增殖的活性。结论 :获得了噬菌体呈现的能够抑制BLyS的两个短肽。 展开更多

关键词 BLYS 噬菌体肽库 小肽

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谷氨酸单钠盐的生化与安全性 被引量：4

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作者 梁荣能 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期69-74,68,共7页

谷氨酸单钠盐(味精,MSG)是一种有调味功用的食品添加剂,它可以增进食物的美味,使肉类、海产类、奶类和蔬菜等都有更佳的味道。

关键词 谷氨酸单钠盐 生化 安全性 味精

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新型避孕化合物月橘烯碱的提纯

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作者 高红 陈荣礼 +1 位作者 江润祥 郑建辉 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期245-246,共2页

我国是一个资源丰富的多人口国家,长期以来广大科学工作者致力于从植物中寻找高效、副作用小的口服非甾体类避孕药,其中包括适于事后口服避孕的抗着床药物,最近。

关键词 九里香 月橘烯碱 提纯 避孕药

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天花粉蛋白Glu189在N-糖苷酶活性中的作用

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作者 李建辉 吴伸 +2 位作者 姚宏兵 邵鹏柱 董贻诚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期792-796,共5页

培养了(E160A,E189A)TCS(天花粉蛋白)的单晶。用浸泡法得到了(E160A,E189A)TCS与Ade复合物的晶体。在MarResearch面探测器系统上分别收集了均为0.20nm分辨率的X射线衍射数据,数据处理用MarScale程序系统完成。用同晶差值Fourier法解析了... 培养了(E160A,E189A)TCS(天花粉蛋白)的单晶。用浸泡法得到了(E160A,E189A)TCS与Ade复合物的晶体。在MarResearch面探测器系统上分别收集了均为0.20nm分辨率的X射线衍射数据,数据处理用MarScale程序系统完成。用同晶差值Fourier法解析了(E160A,E189A)TCS和(E160A,E189A)TCS-Ade的晶体结构,结构修正利用X-PLOR程序.修正结果,晶体学R因子分别为0.180、0.184,键长和键角的RMS偏差分别为0.0012nm和2.566°、0.0012nm和2.622°。在(E160A,E189A)TCS-Ade中,Ade仍结合在N-糖苷酶活性口袋之中,它夹在Tyr70和Tyr111两个侧链环之间,与Tyr70环近乎平行。这一结果表明:TCS中的Glu160和Glu189同时突变成Ala,仍能与AMP发生N-糖苷酶反应.前文已经证明在(E160A)TCS中Glu189没有援救作用。目前,没有发现Glu189对TCS与AMP的直接作用,但Glu189与其它残基的协同作用及其在TCS与rRNA作用中扮演什么角色,尚待进一步研究。 展开更多

关键词 天花粉蛋白 突变体 N-糖苷酶 晶体结构

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