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中药水蛭经炮制后的成分变化研究
被引量:
22
1
作者
刘丽芳
金蓉鸾
+1 位作者
徐国钧
吴子斌
《中成药》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第12期880-882,共3页
目的 :探讨水蛭经炮制后的化学成分变化情况 ,为水蛭的炮制方法提供一定的化学依据。方法 :采用HPLC 柱后衍生化法测定了氨基酸组成的变化 ,用GC MS法测定了甾体类化合物组成的变化。结果 :水蛭经炮制后各种氨基酸的量有所降低 ,甾体类...
目的 :探讨水蛭经炮制后的化学成分变化情况 ,为水蛭的炮制方法提供一定的化学依据。方法 :采用HPLC 柱后衍生化法测定了氨基酸组成的变化 ,用GC MS法测定了甾体类化合物组成的变化。结果 :水蛭经炮制后各种氨基酸的量有所降低 ,甾体类化合物组成发生了变化。结论
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关键词
中药水蛭
炮制
氨基酸
甾体类化合物
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职称材料
天花粉蛋白Y14F/R22L定点突变及其活性研究
被引量:
2
2
作者
姚宏兵
吴伸
+1 位作者
董贻诚
邵鹏柱
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第3期264-268,共5页
利用多聚酶链式反应(PCR)技术,对天然天花粉蛋白(nTCS)基因在Tyr14和Arg22两个保守残基处同时进行定点突变,即Tyr14变成Phe,Arg22变成Leu,然后克隆到pET-8c高效表达载体上,构建成重组...
利用多聚酶链式反应(PCR)技术,对天然天花粉蛋白(nTCS)基因在Tyr14和Arg22两个保守残基处同时进行定点突变,即Tyr14变成Phe,Arg22变成Leu,然后克隆到pET-8c高效表达载体上,构建成重组质粒pETY14F/R22L.经序列分析,定点突变的结果与预先设计的完全一致,突变后的天花粉蛋白命名为Y14F/R22LTCS.将pETY14F/R22L转化到E.coliBL21(DE3,pLysS)中,进行表达.经CM-SepharoseCL-6B柱纯化,SDS-PAGE鉴定,纯度可达90%.RIP活性测定显示,Y14F/R22LTCS的活性比nTCS降低了7.5倍,活性变化不显著,因此,TCS的Try14和Arg22对维持其活性部位构象并不是必需的.但由于Y14F/R22LTCS在E.coli中的表达量与nTCS相比明显下降,因此,Tyr14和Arg22可能与TCS翻译后的折叠有关.
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关键词
天花粉蛋白
定点突变
PCR
序列分析
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职称材料
蕈菌凝集素
被引量:
7
3
作者
王贺祥
黄荣春
+1 位作者
吴子斌
张树庭
《中国食用菌》
1997年第1期3-4,共2页
凝集素广泛存在于植物、动物和微生物中。已纯化了的凝集素有100多种,约60种已成为商品,其中只有一种是分离自蕈菌的,即双孢蘑菇凝集素。约有30~50%的蕈菌子实体抽提物具有凝集素活性。已纯化或部分纯化的蕈菌凝集素有20多种。
关键词
蕈菌
凝集素
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职称材料
N42-A对神经生长因子诱导PC12细胞分化的抑制作用
被引量:
2
4
作者
江黎明
李志明
韩宝铭
《生物化学杂志》
CSCD
1994年第4期392-396,共5页
研究表明,缺乏神经生长因子(NGF)的营养支持是Alzheimer's等神经元退行性疾病发生发展的重要原因,而NGF和/或NGF受体的过度表达则与一些神经系统肿瘤的发生发展有着十分密切的因果关系。采用(125)Ⅰ-N...
研究表明,缺乏神经生长因子(NGF)的营养支持是Alzheimer's等神经元退行性疾病发生发展的重要原因,而NGF和/或NGF受体的过度表达则与一些神经系统肿瘤的发生发展有着十分密切的因果关系。采用(125)Ⅰ-NGF受体特异结合实验作为NGF受体活性物质筛选实验模型从中药牛膝中筛选出了能强烈地抑制(125)Ⅰ-NGF受体结合的活性成分N42-A(ⅠC(50)=6.18±3.43,n=4);细胞培养实验表明,N42-A对NGF诱导大鼠嗜铬神经瘤PCl2细胞的分化也具有很强的剂量依赖性抑制作用(对0.1nmol/L和0.2nmol/LNGF诱导的大鼠嗜铬神经病PC12细胞轴突生长的半数抑制浓度分别为6μg/mL和21μg/mL)。这表明,N42-A是神经元上介导NGF诱导轴突生长的特异受体抑制剂,不仅对NGF及其受体过度表达所致的神经系统肿瘤的防治具有潜在的应用价值,而且对Alzheimer's等神经元退行性疾病防治药物的开发研究具有十分重要的意义。
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关键词
神经生长因子
牛膝
N42-A
药理
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职称材料
生物陶瓷填充柱处理印染废水
5
作者
黄晓维
简浩然
+5 位作者
王孔星
王春生
张秀文
谢裕敏
曹孟德
曹宏威
《工业水处理》
CAS
CSCD
北大核心
1990年第6期21-22,共2页
多孔陶瓷颗粒载体固定脱色菌细胞,作为反应器的填充介质,并与活性污泥曝气工艺联用,处理印染废水连续运行15天,脱色率62~84%,COD 去除率为31~63%。
关键词
印染废水
生物陶瓷
净化
填充柱
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职称材料
天花粉蛋白Glu160在N-糖苷酶活性中的作用
6
作者
李建辉
吴伸
+2 位作者
姚宏兵
邵鹏柱
董贻诚
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第6期943-947,共5页
用浸泡法得到了(E160A)天花粉蛋白(trichosanthin, TCS),(E160D)TCS与Ade 和(E160A)TCS与FMP复合物的晶体.在Mar Research 面探测器系统上分别收集了0.20 nm ...
用浸泡法得到了(E160A)天花粉蛋白(trichosanthin, TCS),(E160D)TCS与Ade 和(E160A)TCS与FMP复合物的晶体.在Mar Research 面探测器系统上分别收集了0.20 nm ,0.19nm 和0.205 nm 分辨率的X 射线衍射数据,数据处理用Mar Scale 程序系统完成.用同晶差值Fourier法解析了(E160A)TCS-Ade,(E160D)TCS-Ade 和(E160A)TCS-FMP的晶体结构,结构修正利用X-PLOR程序,修正结果,晶体学R因子分别为0.166,0.176,0.179.键长和键角的RMS偏差分别为0.0010 nm 和2.503°,0.0013 nm 和2.665°,0.0012 nm 和2.676°.在这三个结构中均未见到Glu189侧链方向的改变.Ade 或FMP仍结合在N-糖苷酶活性口袋之中,它夹在Tyr70和Tyr111两个侧链环之间,与Tyr70环近乎平行.这一结果表明:TCS中的Glu160分别突变成Ala 和Asp,仍能与AMP发生N-糖苷酶反应,但是活性降低了一些.可见Glu160对TCS与AMP的作用是重要的,但不是必要的.
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关键词
天花粉蛋白
N-糖苷酶
晶体结构
AMP
Glu160
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职称材料
题名
中药水蛭经炮制后的成分变化研究
被引量:
22
1
作者
刘丽芳
金蓉鸾
徐国钧
吴子斌
机构
中国药科
大学
香港中文大学生化系
出处
《中成药》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第12期880-882,共3页
文摘
目的 :探讨水蛭经炮制后的化学成分变化情况 ,为水蛭的炮制方法提供一定的化学依据。方法 :采用HPLC 柱后衍生化法测定了氨基酸组成的变化 ,用GC MS法测定了甾体类化合物组成的变化。结果 :水蛭经炮制后各种氨基酸的量有所降低 ,甾体类化合物组成发生了变化。结论
关键词
中药水蛭
炮制
氨基酸
甾体类化合物
Keywords
leech
processing
variation of chemical component
amino acid
steroids
分类号
R282.740.2 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
天花粉蛋白Y14F/R22L定点突变及其活性研究
被引量:
2
2
作者
姚宏兵
吴伸
董贻诚
邵鹏柱
机构
中国科学院生物物理研究所
香港中文大学生化系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第3期264-268,共5页
基金
香港研究基金委员会CUHK11/91基金
文摘
利用多聚酶链式反应(PCR)技术,对天然天花粉蛋白(nTCS)基因在Tyr14和Arg22两个保守残基处同时进行定点突变,即Tyr14变成Phe,Arg22变成Leu,然后克隆到pET-8c高效表达载体上,构建成重组质粒pETY14F/R22L.经序列分析,定点突变的结果与预先设计的完全一致,突变后的天花粉蛋白命名为Y14F/R22LTCS.将pETY14F/R22L转化到E.coliBL21(DE3,pLysS)中,进行表达.经CM-SepharoseCL-6B柱纯化,SDS-PAGE鉴定,纯度可达90%.RIP活性测定显示,Y14F/R22LTCS的活性比nTCS降低了7.5倍,活性变化不显著,因此,TCS的Try14和Arg22对维持其活性部位构象并不是必需的.但由于Y14F/R22LTCS在E.coli中的表达量与nTCS相比明显下降,因此,Tyr14和Arg22可能与TCS翻译后的折叠有关.
关键词
天花粉蛋白
定点突变
PCR
序列分析
Keywords
Trichosanthin,Sitedirected mutagenesis,PCR,Sequence analysis,Recombinant plasmid,Gene expression,RIP activity
分类号
Q946.1 [生物学—植物学]
Q343.13 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
蕈菌凝集素
被引量:
7
3
作者
王贺祥
黄荣春
吴子斌
张树庭
机构
中国农业
大学
生物学院微生物
系
香港中文大学
生物
系
香港中文大学生化系
出处
《中国食用菌》
1997年第1期3-4,共2页
文摘
凝集素广泛存在于植物、动物和微生物中。已纯化了的凝集素有100多种,约60种已成为商品,其中只有一种是分离自蕈菌的,即双孢蘑菇凝集素。约有30~50%的蕈菌子实体抽提物具有凝集素活性。已纯化或部分纯化的蕈菌凝集素有20多种。
关键词
蕈菌
凝集素
分类号
S646.01 [农业科学—蔬菜学]
S852.45 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
N42-A对神经生长因子诱导PC12细胞分化的抑制作用
被引量:
2
4
作者
江黎明
李志明
韩宝铭
机构
广东医学院
生化
教研室
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1994年第4期392-396,共5页
文摘
研究表明,缺乏神经生长因子(NGF)的营养支持是Alzheimer's等神经元退行性疾病发生发展的重要原因,而NGF和/或NGF受体的过度表达则与一些神经系统肿瘤的发生发展有着十分密切的因果关系。采用(125)Ⅰ-NGF受体特异结合实验作为NGF受体活性物质筛选实验模型从中药牛膝中筛选出了能强烈地抑制(125)Ⅰ-NGF受体结合的活性成分N42-A(ⅠC(50)=6.18±3.43,n=4);细胞培养实验表明,N42-A对NGF诱导大鼠嗜铬神经瘤PCl2细胞的分化也具有很强的剂量依赖性抑制作用(对0.1nmol/L和0.2nmol/LNGF诱导的大鼠嗜铬神经病PC12细胞轴突生长的半数抑制浓度分别为6μg/mL和21μg/mL)。这表明,N42-A是神经元上介导NGF诱导轴突生长的特异受体抑制剂,不仅对NGF及其受体过度表达所致的神经系统肿瘤的防治具有潜在的应用价值,而且对Alzheimer's等神经元退行性疾病防治药物的开发研究具有十分重要的意义。
关键词
神经生长因子
牛膝
N42-A
药理
Keywords
Nerve growth factor
Receptor antagonist
Achyranes
N42-A
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
在线阅读
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职称材料
题名
生物陶瓷填充柱处理印染废水
5
作者
黄晓维
简浩然
王孔星
王春生
张秀文
谢裕敏
曹孟德
曹宏威
机构
广东省微生物研究所
中国科学院武汉病毒研究所
香港中文大学生化系
出处
《工业水处理》
CAS
CSCD
北大核心
1990年第6期21-22,共2页
文摘
多孔陶瓷颗粒载体固定脱色菌细胞,作为反应器的填充介质,并与活性污泥曝气工艺联用,处理印染废水连续运行15天,脱色率62~84%,COD 去除率为31~63%。
关键词
印染废水
生物陶瓷
净化
填充柱
分类号
X791.03 [环境科学与工程—环境工程]
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职称材料
题名
天花粉蛋白Glu160在N-糖苷酶活性中的作用
6
作者
李建辉
吴伸
姚宏兵
邵鹏柱
董贻诚
机构
中国科学院生物物理研究所
香港中文大学生化系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第6期943-947,共5页
基金
国家自然科学基金
香港研究基金
文摘
用浸泡法得到了(E160A)天花粉蛋白(trichosanthin, TCS),(E160D)TCS与Ade 和(E160A)TCS与FMP复合物的晶体.在Mar Research 面探测器系统上分别收集了0.20 nm ,0.19nm 和0.205 nm 分辨率的X 射线衍射数据,数据处理用Mar Scale 程序系统完成.用同晶差值Fourier法解析了(E160A)TCS-Ade,(E160D)TCS-Ade 和(E160A)TCS-FMP的晶体结构,结构修正利用X-PLOR程序,修正结果,晶体学R因子分别为0.166,0.176,0.179.键长和键角的RMS偏差分别为0.0010 nm 和2.503°,0.0013 nm 和2.665°,0.0012 nm 和2.676°.在这三个结构中均未见到Glu189侧链方向的改变.Ade 或FMP仍结合在N-糖苷酶活性口袋之中,它夹在Tyr70和Tyr111两个侧链环之间,与Tyr70环近乎平行.这一结果表明:TCS中的Glu160分别突变成Ala 和Asp,仍能与AMP发生N-糖苷酶反应,但是活性降低了一些.可见Glu160对TCS与AMP的作用是重要的,但不是必要的.
关键词
天花粉蛋白
N-糖苷酶
晶体结构
AMP
Glu160
Keywords
Trichosanthin
Mutant
N-glycosidase
Crystal structure
分类号
Q556.2 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
中药水蛭经炮制后的成分变化研究
刘丽芳
金蓉鸾
徐国钧
吴子斌
《中成药》
CAS
CSCD
北大核心
2001
22
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职称材料
2
天花粉蛋白Y14F/R22L定点突变及其活性研究
姚宏兵
吴伸
董贻诚
邵鹏柱
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998
2
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职称材料
3
蕈菌凝集素
王贺祥
黄荣春
吴子斌
张树庭
《中国食用菌》
1997
7
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职称材料
4
N42-A对神经生长因子诱导PC12细胞分化的抑制作用
江黎明
李志明
韩宝铭
《生物化学杂志》
CSCD
1994
2
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职称材料
5
生物陶瓷填充柱处理印染废水
黄晓维
简浩然
王孔星
王春生
张秀文
谢裕敏
曹孟德
曹宏威
《工业水处理》
CAS
CSCD
北大核心
1990
0
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职称材料
6
天花粉蛋白Glu160在N-糖苷酶活性中的作用
李建辉
吴伸
姚宏兵
邵鹏柱
董贻诚
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999
0
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职称材料
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