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结核病病理诊断质控蜡块的制备及其性能评估
被引量：
1
1
作者
黄晓洁
杜伟丽
+5 位作者
赵宏
苏丹
刘子臣
赵颖丽
刘毅
车南颖
《中国防痨杂志》
北大核心
2025年第10期1254-1260,共7页
目的:建立结核病病理质控蜡块制备方法,并对质控蜡块进行细胞形态、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分布及MTB DNA分布方面的性能评估。方法:用灭活MTB H37Rv悬液和恶性胸腔积液细胞沉淀混合,以2%琼脂为基质制备MTB浓度...
目的:建立结核病病理质控蜡块制备方法,并对质控蜡块进行细胞形态、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分布及MTB DNA分布方面的性能评估。方法:用灭活MTB H37Rv悬液和恶性胸腔积液细胞沉淀混合,以2%琼脂为基质制备MTB浓度不同的蜡块,磷酸盐缓冲液代替MTB悬液制作阴性蜡块。每个圆柱体琼脂块沿纵轴等距分为4层(每层厚约3mm),每层制成1个蜡块,形成分层样本组。通过HE染色评估细胞形态完整性及空间分布均匀性,抗酸染色和荧光定量PCR(real-time PCR,qPCR)分析各组MTB数量、IS6110拷贝数及其对应琼脂块纵轴方向MTB分布的均一性。结果:成功制备了适用于MTB抗酸染色和MTB DNA检测的蜡块质控品。HE染色显示蜡块中各种细胞形态完整且空间分布均匀。抗酸染色显示,理论MTB量为0.0336、0.336、3.36个/切片的分层样本组中,每组蜡块对应的4张切片各有0、1和2张切片阳性,检测结果不稳定,不宜作为抗酸染色阳性质控品;理论MTB量为33.6、336个/切片的分层样本组中,每个蜡块对应的切片中均找到MTB,为合格抗酸染色质控品,MTB平均密度分别为(21.50±9.26)条/300视野和(169.25±40.25)条/300视野。qPCR结果显示,理论MTB量为0.0336个/切片的分层样本组中,有3个蜡块检测为阳性,1个为阴性,结果存在波动,为不合格分子检测质控品;理论MTB量为0.336、3.36、33.6、336个/切片的分层样本组中,检测均阳性,IS6110基因拷贝数分布为(6.48±3.54)拷贝/5张切片、(26.53±6.65)拷贝/5张切片、(283.93±98.51)拷贝/5张切片、(4446.75±833.84)拷贝/5张切片,扩增Ct值变异系数均<5%,各组对应琼脂块纵轴方向上MTB均匀分布,为合格的分子检测质控品。阴性质控品抗酸染色均为阴性、qPCR IS6110均无扩增。结论:本研究成功建立了结核病病理诊断质控品制备方案。推荐使用至少33.6个/切片的MTB制备抗酸染色的质控品,至少0.336个/切片的MTB用于制备分子检测质控品,并根据检测方法的检出限及不同应用场景选择起始MTB量。
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关键词
分枝杆菌
结核
诊断
病理学
质量控制
评价研究
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职称材料
CD4^(+)和CD8^(+)T细胞在结核病免疫应答中的作用
被引量：
11
2
作者
温淑芳
魏荣荣
+1 位作者
李浩然
刘毅
《中国防痨杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期479-484,共6页
结核分枝杆菌是世界范围内单一感染源致死亡的主要原因,并且已有大量人群被感染后处于长期潜伏感染状态。机体清除结核分枝杆菌主要依赖于特异性免疫应答,其中T淋巴细胞作为参与机体细胞免疫的主要细胞,其增殖和活化在机体特异性免疫应...
结核分枝杆菌是世界范围内单一感染源致死亡的主要原因,并且已有大量人群被感染后处于长期潜伏感染状态。机体清除结核分枝杆菌主要依赖于特异性免疫应答,其中T淋巴细胞作为参与机体细胞免疫的主要细胞,其增殖和活化在机体特异性免疫应答中发挥着至关重要的作用。笔者分析了结核分枝杆菌感染机体后,T淋巴细胞亚群中的CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞在结核分枝杆菌感染免疫应答中的作用,并且对机体抗结核分枝杆菌感染免疫应答的机制进行总结,为进一步深入探索适应性免疫的抗结核感染网络、结核病的诊断及临床研制新型疫苗提供借鉴。
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关键词
结核
CD4阳性T淋巴细胞
CD8阳性T淋巴细胞
免疫
细胞因子
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职称材料
玻璃化冻存新技术处理肺癌手术标本用于构建类器官的探索
被引量：
1
3
作者
黄予晴
孙祖钰
+4 位作者
刘毅
张晨
周立娟
赵宏
车南颖
《中国防痨杂志》
北大核心
2025年第10期1261-1267,共7页
目的:探索利用玻璃化冻存新技术保存肺癌手术标本,复苏后用于类器官构建的可行性。方法:选择2024年7—8月在首都医科大学附属北京胸科医院确诊的12例肺癌患者手术切除的肿瘤组织作为研究对象。肿瘤组织由病理医师取材后立即置于组织保...
目的:探索利用玻璃化冻存新技术保存肺癌手术标本,复苏后用于类器官构建的可行性。方法:选择2024年7—8月在首都医科大学附属北京胸科医院确诊的12例肺癌患者手术切除的肿瘤组织作为研究对象。肿瘤组织由病理医师取材后立即置于组织保存液中,4℃条件下保存运输,2h内完成样本处理。每例样本均分为3份,每份大小约为0.5cm^(3)。一份直接用于类器官构建,另外两份采用玻璃化冻存技术保存于气相液氮罐中,分别于冻存1周及4个月后复苏并构建类器官。结果:12份新鲜肺癌组织均成功构建类器官;冻存1周及4个月的样本复苏后分别有9例和6例成功构建类器官,成功率分别为75.0%(9/12)和50.0%(6/12),类器官形态及肿瘤标志物表达与新鲜样本来源的类器官基本一致;冻存4个月的样本复苏后,细胞活性低于55%的样本均未能成功构建类器官。结论:小样本探索性研究提示,尽管长期玻璃化冻存对细胞活性存在一定影响,但经其处理的肺癌手术标本可基本满足类器官的构建需求。
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关键词
肺肿瘤
冷冻
标本制备
类器官
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职称材料
题名
结核病病理诊断质控蜡块的制备及其性能评估
被引量：
1
1
作者
黄晓洁
杜伟丽
赵宏
苏丹
刘子臣
赵颖丽
刘毅
车南颖
机构
首都医科大学
附属
北京
胸科医院
病理科
/北京市
结核病
胸部
肿瘤
研究所
首都医科大学附属北京胸科医院生物样本与数据资源库/北京市结核病胸部肿瘤研究所
出处
《中国防痨杂志》
北大核心
2025年第10期1254-1260,共7页
基金
国家自然科学基金(82072381,82472378)
北京市属医学科研院所公益发展改革试点项目(JYY2023-15)
+1 种基金
北京研究型病房卓越计划(BRWEP2024W042160103)
北京市医院管理中心“登峰”人才培养计划(DFL20241601)。
文摘
目的:建立结核病病理质控蜡块制备方法,并对质控蜡块进行细胞形态、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分布及MTB DNA分布方面的性能评估。方法:用灭活MTB H37Rv悬液和恶性胸腔积液细胞沉淀混合,以2%琼脂为基质制备MTB浓度不同的蜡块,磷酸盐缓冲液代替MTB悬液制作阴性蜡块。每个圆柱体琼脂块沿纵轴等距分为4层(每层厚约3mm),每层制成1个蜡块,形成分层样本组。通过HE染色评估细胞形态完整性及空间分布均匀性,抗酸染色和荧光定量PCR(real-time PCR,qPCR)分析各组MTB数量、IS6110拷贝数及其对应琼脂块纵轴方向MTB分布的均一性。结果:成功制备了适用于MTB抗酸染色和MTB DNA检测的蜡块质控品。HE染色显示蜡块中各种细胞形态完整且空间分布均匀。抗酸染色显示,理论MTB量为0.0336、0.336、3.36个/切片的分层样本组中,每组蜡块对应的4张切片各有0、1和2张切片阳性,检测结果不稳定,不宜作为抗酸染色阳性质控品;理论MTB量为33.6、336个/切片的分层样本组中,每个蜡块对应的切片中均找到MTB,为合格抗酸染色质控品,MTB平均密度分别为(21.50±9.26)条/300视野和(169.25±40.25)条/300视野。qPCR结果显示,理论MTB量为0.0336个/切片的分层样本组中,有3个蜡块检测为阳性,1个为阴性,结果存在波动,为不合格分子检测质控品;理论MTB量为0.336、3.36、33.6、336个/切片的分层样本组中,检测均阳性,IS6110基因拷贝数分布为(6.48±3.54)拷贝/5张切片、(26.53±6.65)拷贝/5张切片、(283.93±98.51)拷贝/5张切片、(4446.75±833.84)拷贝/5张切片,扩增Ct值变异系数均<5%,各组对应琼脂块纵轴方向上MTB均匀分布,为合格的分子检测质控品。阴性质控品抗酸染色均为阴性、qPCR IS6110均无扩增。结论:本研究成功建立了结核病病理诊断质控品制备方案。推荐使用至少33.6个/切片的MTB制备抗酸染色的质控品,至少0.336个/切片的MTB用于制备分子检测质控品,并根据检测方法的检出限及不同应用场景选择起始MTB量。
关键词
分枝杆菌
结核
诊断
病理学
质量控制
评价研究
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
Diagnosis
Pathology
Quality control
Evaluation studies
分类号
R52 [医药卫生—内科学]
R361.2 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
CD4^(+)和CD8^(+)T细胞在结核病免疫应答中的作用
被引量：
11
2
作者
温淑芳
魏荣荣
李浩然
刘毅
机构
首都医科大学附属北京胸科医院生物样本与数据资源库/北京市结核病胸部肿瘤研究所
首都医科大学
附属
北京
胸科医院
细菌免疫室
/北京市
结核病
胸部
肿瘤
研究所
出处
《中国防痨杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期479-484,共6页
文摘
结核分枝杆菌是世界范围内单一感染源致死亡的主要原因,并且已有大量人群被感染后处于长期潜伏感染状态。机体清除结核分枝杆菌主要依赖于特异性免疫应答,其中T淋巴细胞作为参与机体细胞免疫的主要细胞,其增殖和活化在机体特异性免疫应答中发挥着至关重要的作用。笔者分析了结核分枝杆菌感染机体后,T淋巴细胞亚群中的CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞在结核分枝杆菌感染免疫应答中的作用,并且对机体抗结核分枝杆菌感染免疫应答的机制进行总结,为进一步深入探索适应性免疫的抗结核感染网络、结核病的诊断及临床研制新型疫苗提供借鉴。
关键词
结核
CD4阳性T淋巴细胞
CD8阳性T淋巴细胞
免疫
细胞因子
Keywords
Tuberculosis
CD4 positive T lymphocytes
CD8 positive T lymphocytes
Immunity
Cytokine
分类号
R52 [医药卫生—内科学]
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
玻璃化冻存新技术处理肺癌手术标本用于构建类器官的探索
被引量：
1
3
作者
黄予晴
孙祖钰
刘毅
张晨
周立娟
赵宏
车南颖
机构
首都医科大学
附属
北京
胸科医院
病理科
/北京市
结核病
胸部
肿瘤
研究所
首都医科大学附属北京胸科医院生物样本与数据资源库/北京市结核病胸部肿瘤研究所
出处
《中国防痨杂志》
北大核心
2025年第10期1261-1267,共7页
基金
北京市属医学科研院所公益发展改革试点项目(JYY2023-15)
首都医科大学附属北京胸科医院能力跃升专项(NLYS2025-12)
北京市医院管理中心“登峰”人才培养计划(DFL20241601)。
文摘
目的:探索利用玻璃化冻存新技术保存肺癌手术标本,复苏后用于类器官构建的可行性。方法:选择2024年7—8月在首都医科大学附属北京胸科医院确诊的12例肺癌患者手术切除的肿瘤组织作为研究对象。肿瘤组织由病理医师取材后立即置于组织保存液中,4℃条件下保存运输,2h内完成样本处理。每例样本均分为3份,每份大小约为0.5cm^(3)。一份直接用于类器官构建,另外两份采用玻璃化冻存技术保存于气相液氮罐中,分别于冻存1周及4个月后复苏并构建类器官。结果:12份新鲜肺癌组织均成功构建类器官;冻存1周及4个月的样本复苏后分别有9例和6例成功构建类器官,成功率分别为75.0%(9/12)和50.0%(6/12),类器官形态及肿瘤标志物表达与新鲜样本来源的类器官基本一致;冻存4个月的样本复苏后,细胞活性低于55%的样本均未能成功构建类器官。结论:小样本探索性研究提示,尽管长期玻璃化冻存对细胞活性存在一定影响,但经其处理的肺癌手术标本可基本满足类器官的构建需求。
关键词
肺肿瘤
冷冻
标本制备
类器官
Keywords
Lung neoplasms
Freezing
Specimen handling
Organoids
分类号
R318 [医药卫生—生物医学工程]
R73-3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结核病病理诊断质控蜡块的制备及其性能评估
黄晓洁
杜伟丽
赵宏
苏丹
刘子臣
赵颖丽
刘毅
车南颖
《中国防痨杂志》
北大核心
2025
1
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职称材料
2
CD4^(+)和CD8^(+)T细胞在结核病免疫应答中的作用
温淑芳
魏荣荣
李浩然
刘毅
《中国防痨杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
11
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职称材料
3
玻璃化冻存新技术处理肺癌手术标本用于构建类器官的探索
黄予晴
孙祖钰
刘毅
张晨
周立娟
赵宏
车南颖
《中国防痨杂志》
北大核心
2025
1
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职称材料
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