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外泌体调节复发性流产小鼠子宫内膜细胞上皮间充质转化的作用机制研究
1
作者 李梦元 李冠杉 +7 位作者 韩倩 李思瑶 郑舒畅 辛明蔚 尹晓丹 王景尚 武颖 何军琴 《中国全科医学》 北大核心 2025年第8期962-972,共11页
背景复发性流产(RSA)是常见的生殖障碍性疾病,在胚胎植入过程中,子宫内膜发生上皮间充质转化(EMT),RSA的发生与该过程减弱密切相关。子宫内膜来源外泌体及其携带的miRNA参与细胞间通讯,影响细胞EMT,与RSA关系密切,但具体作用机制尚不明... 背景复发性流产(RSA)是常见的生殖障碍性疾病,在胚胎植入过程中,子宫内膜发生上皮间充质转化(EMT),RSA的发生与该过程减弱密切相关。子宫内膜来源外泌体及其携带的miRNA参与细胞间通讯,影响细胞EMT,与RSA关系密切,但具体作用机制尚不明确。目的本研究聚焦于外泌体在细胞EMT中的功能,通过实验验证子宫内膜来源外泌体及其分泌的miRNA-221对RSA小鼠子宫内膜细胞EMT的调控作用。方法2021年10月—2022年5月,选取SPF级、健康8周龄雌性小鼠24只,随机选取12只作为正常对照组,剩余12只小鼠制作RSA模型,造模结束后雌雄合笼,妊娠第4日处死雌性小鼠,分离和培养子宫内膜上皮细胞并收集外泌体,通过透射电镜和免疫印迹法(WB)进行外泌体鉴定;通过CCK-8、Transwell和流式细胞术检测外泌体干预前后两组细胞增殖、侵袭、迁移能力;细胞EMT相关蛋白[E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、基质金属蛋白酶7(MMP-7)、MMP-9]及外泌体标志蛋白(CD63、CD81、TSG101)的表达;外泌体处理后的细胞EMT标志蛋白(CD24-APC、CD44-FITC)的表达;转染miRNA-221模拟物和抑制物分析外泌体源性miRNA-221对小鼠子宫内膜上皮细胞EMT的作用,并通过WB和双荧光素酶报告基因检测进行分析。结果RSA组小鼠的子宫内膜上皮细胞具有异常的EMT,小鼠子宫内膜上皮细胞能够分泌外泌体。添加外泌体的RSA组细胞增殖率、迁移能力、侵袭能力、CD44^(+)/CD24^(+)表达水平高于细胞上清液RSA组(P<0.05)。与细胞上清液RSA组相比,添加外泌体的RSA组细胞的EMT标志蛋白E-cadherin水平降低,间质样标志蛋白N-cadherin和Vimentin以及基质标志蛋白MMP-7、MMP-9蛋白水平升高(P<0.05)。RSA组miRNA-221表达水平低于正常对照组(P<0.05)。与对照随机miRNA相比,miRNA-221模拟物激活了PI3K-AKT通路、NF-κB通路和p38通路(P<0.05)。与对照随机miRNA相比,miRNA-221模拟物降低了PTEN mRNA的表达水平(P<0.05),而miRNA-221抑制剂转染则增加了PTEN mRNA的表达水平(P<0.05)。结论子宫内膜来源外泌体miRNA-221可通过负向调控Pten基因,激活PI3K-AKT通路,促进子宫内膜上皮细胞EMT,影响RSA妊娠结局。 展开更多
关键词 复发性流产 上皮间充质转化 外泌体 miRNA-221 PTEN基因 PI3K-AKT通路
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定坤丹治疗子宫内膜薄型不孕的临床效果 被引量：13
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作者 金凤羽 阮祥燕 +7 位作者 秦爽 许新 杨瑜 谷牧青 李妍秋 杜娟 程姣姣 尹晓丹 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第3期364-368,共5页
目的观察定坤丹治疗子宫内膜薄型不孕的临床效果,为优化子宫内膜薄型不孕的治疗方案提供参考。方法选取187例子宫内膜薄型不孕患者,在保证组间基本特征匹配原则上,利用计算机软件产生的随机数,按照1∶1的比例分为对照组(93例)和观察组(9... 目的观察定坤丹治疗子宫内膜薄型不孕的临床效果,为优化子宫内膜薄型不孕的治疗方案提供参考。方法选取187例子宫内膜薄型不孕患者,在保证组间基本特征匹配原则上,利用计算机软件产生的随机数,按照1∶1的比例分为对照组(93例)和观察组(94例)。对照组给予雌二醇+地屈孕酮干预,观察组在对照组的基础上加用定坤丹。比较治疗3个周期后两组患者的子宫内膜厚度、孕激素浓度及临床妊娠率。结果观察组患者排卵期平均子宫内膜厚度显著高于对照组(P<0.01),黄体期孕激素浓度显著高于对照组(P<0.01),累计临床妊娠率显著高于对照组(P<0.05)。结论定坤丹可以明显改善子宫内膜薄型不孕患者排卵期子宫内膜厚度,提高黄体功能,改善妊娠结局。 展开更多
关键词 子宫内膜薄型 不孕 定坤丹 妊娠
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定坤丹在氯米芬促排周期中对薄型子宫内膜的疗效观察 被引量：7
3
作者 金凤羽 阮祥燕 +7 位作者 秦爽 许新 杨瑜 谷牧青 李妍秋 杜娟 程姣姣 尹晓丹 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第4期550-554,共5页
目的探讨定坤丹在氯米芬促排卵周期中对薄型子宫内膜的治疗效果,为临床提供依据。方法募集2018至2022年期间就诊于首都医科大学附属北京妇产医院内分泌科的患者,在氯米芬促排卵周期中呈现薄型子宫内膜共127例,在保证组间基本特征匹配原... 目的探讨定坤丹在氯米芬促排卵周期中对薄型子宫内膜的治疗效果,为临床提供依据。方法募集2018至2022年期间就诊于首都医科大学附属北京妇产医院内分泌科的患者,在氯米芬促排卵周期中呈现薄型子宫内膜共127例,在保证组间基本特征匹配原则上利用计算机软件产生的随机数随机分配到对照组和试验组。其中试验组64例给予定坤丹+戊酸雌二醇干预,对照组63例单纯给予戊酸雌二醇干预。治疗3个周期后对比两组患者之间人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)日子宫内膜厚度、分型、黄体期孕激素浓度、3个周期排卵率、累计临床妊娠率的差异。结果3个月后试验组和对照组患者HCG日平均子宫内膜厚度分别为(8.30±1.068)mm和(7.43±1.051)mm,A型内膜占比分别为52.0%和32.7%。黄体期孕酮浓度分别为(11.00±1.508)ng/mL和(10.23±2.278)ng/mL,3个周期内排卵率分别为88.4%和79.7%,累计临床妊娠率分别为40.6%和22.2%,试验组均显著高于对照组(P<0.05)。结论定坤丹可以协同雌激素治疗氯米芬促排卵周期中子宫内膜过薄的问题,改善内膜型态、提高氯米芬排卵率、黄体功能以及临床妊娠率。 展开更多
关键词 氯米芬 薄型子宫内膜 内膜型态 定坤丹 排卵 妊娠
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