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CD_3AK细胞体内、外抗喉鳞癌细胞株(Hep-2)的实验研究 被引量:1
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作者 张伟 诸小侬 +4 位作者 韩德民 陈靖 王津津 范尔钟 张进友 《耳鼻咽喉(头颈外科)》 1998年第2期104-108,共5页
为探索更理想的过继免疫治疗手段,对由健康人外周血分离、经 CD_3单克隆抗体与白细胞介素-2共同诱导激活的 CD_3AK 细胞的体外扩增情况及其杀伤喉癌细胞 Hep-2的活性水平进行了观察和研究,并与 LAK 细胞作了比较。研究发现,CD_3AK 细胞... 为探索更理想的过继免疫治疗手段,对由健康人外周血分离、经 CD_3单克隆抗体与白细胞介素-2共同诱导激活的 CD_3AK 细胞的体外扩增情况及其杀伤喉癌细胞 Hep-2的活性水平进行了观察和研究,并与 LAK 细胞作了比较。研究发现,CD_3AK 细胞除具有体外扩增能力强、存活时间长、IL-2依赖性低等特点外,其体内、外抗喉癌作用亦十分显著。培养早期,CD_3AK 细胞的抗瘤活性与常规培养的 LAK 细胞相似,延长培养时间至7~10天,则抗瘤活性大增,培养9天的CD_3AK 细胞在效靶比30:1的条件下平均抑瘤率高达99.8%,几乎完全抑制了喉癌细胞在裸鼠皮下的生长。研究提示,CD_3AK 细胞有望成为继 LAK 细胞之后的新一代肿瘤免疫杀伤细胞而应用于头颈肿瘤局部过继免疫治疗中。 展开更多
关键词 喉肿瘤 鳞状上皮细胞 细胞毒性试验
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嗅神经切断术后白血病抑制因子在嗅上皮中的表达 被引量:12
2
作者 羡慕 魏永祥 +4 位作者 韩德民 刘仲燕 刘小超 李国辉 苗旭涛 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2005年第6期377-380,共4页
目的分析白血病抑制因子(leukemiainhibi-toryfactor,LIF)与嗅感觉神经元(olfactoryreceptorneurons,ORNs)再生的关系。方法建立嗅神经切断的小鼠动物模型,在术后8小时、2天、3天和5天分别通过免疫组化和相对半定量RT-PCR的方法,在蛋白... 目的分析白血病抑制因子(leukemiainhibi-toryfactor,LIF)与嗅感觉神经元(olfactoryreceptorneurons,ORNs)再生的关系。方法建立嗅神经切断的小鼠动物模型,在术后8小时、2天、3天和5天分别通过免疫组化和相对半定量RT-PCR的方法,在蛋白和mRNA水平观察LIF及其特异性受体LIF-R在嗅上皮中的表达情况。结果LIF和LIF-R的表达都是在术后8小时迅速、一过性地上升,随后又迅速恢复至对照组水平。LIF由残留的ORNs表达,LIF-R则由基底细胞和嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)表达。结论LIF是在ORNs凋亡再生机制中较早表达的一种细胞因子,凋亡中的ORNs产生并分泌的LIF作用于基底细胞和嗅鞘细胞,从而启动调节ORNs再生的一系列分子机制。 展开更多
关键词 白血病抑制因子 神经切断 嗅上皮 术后 半定量RT-PCR receptor factor 嗅感觉神经元 小鼠动物模型 mRNA水平 嗅鞘细胞 基底细胞 LIF 特异性受体 cells 方法建立 免疫组化 表达情况 细胞因子 再生机制 分子机制 一过性 对照组
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呼吸道乳头状瘤HPV DNA定量检测与临床特征分析 被引量:6
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作者 肖洋 王军 +2 位作者 叶京英 崔彦儒 尚军 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2008年第10期555-557,共3页
目的探讨幼年型呼吸道乳头状瘤病(juvenile onset recurrent respiratory papillomatosis,JORRP)的临床特点及病程的相关影响因素,研究JORRP瘤体中人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的基因含量及其临床意义。方法收集55例JORRP... 目的探讨幼年型呼吸道乳头状瘤病(juvenile onset recurrent respiratory papillomatosis,JORRP)的临床特点及病程的相关影响因素,研究JORRP瘤体中人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的基因含量及其临床意义。方法收集55例JORRP患儿的临床资料,应用荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测肿瘤组织中的HPV6/11含量,并进行临床随访观察复发情况。结果JORRP发病高峰在3~4岁,2~7岁组患儿的手术间隔时间小于大于7岁以上组患儿;行气管切开术的患儿的手术次数明显多于未行气管切开手术的患儿;55例JORRP标本经荧光定量PCR检测后35例(63.6%)为HPV6/11型阳性,其DNA中位拷贝数为2.2E+07,其拷贝数与JORRP病程无明显相关性。结论2~7岁为JORRP好发及易复发年龄段,气管切开会增加患儿手术次数与风险,JORRP患儿的病程变化与HPV6/11 DNA含量无明显相关。 展开更多
关键词 乳头状瘤 复发 儿童 气管切开术 聚合酶链反应
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血清SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌诊断中的应用 被引量:15
4
作者 郁迪 张小虎 鲁辛辛 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第9期687-689,共3页
目的探讨血清代替血浆检测SEPT9基因甲基化在结直肠癌(CRC)诊断中的价值。方法收集70例CRC患者、38例腺瘤或息肉患者及15例其他肠道疾病患者血清样本。用Epi pro Colon 2.0试剂盒进行SEPT9基因甲基化检测,依据肠镜病理诊断进行验证,比... 目的探讨血清代替血浆检测SEPT9基因甲基化在结直肠癌(CRC)诊断中的价值。方法收集70例CRC患者、38例腺瘤或息肉患者及15例其他肠道疾病患者血清样本。用Epi pro Colon 2.0试剂盒进行SEPT9基因甲基化检测,依据肠镜病理诊断进行验证,比较SEPT9、癌胚抗原(CEA)和粪便潜血试验(FOBT)的敏感性和特异性,并进行统计学分析。结果 CRC患者血清SEPT9的阳性率(81.4%)明显高于对照组(13.2%),差异有统计学意义(χ2=92.814,P〈0.01)。CRC患者血清SEPT9的敏感性为81.4%(95%CI:72.4%-90.4%)、特异性为86.7%(95%CI:72.4%-100%)。临床分期为Ⅰ期的CRC患者SEPT9阳性率为42.9%,Ⅱ期为88.9%,Ⅲ期为82.4%,Ⅳ期为100%,差异有统计学意义(χ2=16.572,P〈0.01)。SEPT9的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.841,明显高于CEA(0.716)和FOBT(0.792)。3者联合检测AUCROC可达0.935。结论血清SEPT9基因甲基化的检测是早期诊断CRC的有效方法,联合检测CEA及FOBT可以提高诊断效能。 展开更多
关键词 结直肠癌 SEPT9 血清
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变应性鼻炎伴嗅觉障碍小鼠嗅黏膜的观察 被引量:10
5
作者 林静 魏永祥 +1 位作者 王向东 杨凌 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2008年第8期465-468,共4页
目的观察变应性鼻炎伴嗅觉障碍小鼠嗅黏膜形态结构的改变及相关免疫组织化学变化,探讨变应性鼻炎对嗅觉功能的影响。方法将40只BALB/C小鼠随机分为实验组(30只)和对照组(10只)。实验组应用卵清蛋白致敏后,利用埋藏食物小球实验(buried f... 目的观察变应性鼻炎伴嗅觉障碍小鼠嗅黏膜形态结构的改变及相关免疫组织化学变化,探讨变应性鼻炎对嗅觉功能的影响。方法将40只BALB/C小鼠随机分为实验组(30只)和对照组(10只)。实验组应用卵清蛋白致敏后,利用埋藏食物小球实验(buried food pellet test,BFT)评估小鼠嗅觉功能,ELISA法测定并比较血清中IgE水平。建立变应性鼻炎伴嗅觉障碍小鼠动物模型。取小鼠鼻腔嗅黏膜,观察形态结构的改变,检测各组嗅黏膜中嗅觉标记蛋白(olfactory marker protein,OMP)和神经元特异性烯醇化酶(neuron- specific enolase,NSE)的表达。结果变应性鼻炎伴嗅觉障碍组嗅黏膜OMP阳性的成熟嗅感觉神经元(olfctory receptor neurons,ORNs)减少,与变应性鼻炎不伴嗅觉障碍组及对照组相比差异存在统计学意义(P=0.046<0.05,P=0.039<0.05)。变应性鼻炎伴嗅觉障碍组嗅黏膜NSE阳性的成熟ORNs减少,与变应性鼻炎不伴嗅觉障碍组及对照组相比差异存在统计学意义(P=0.041<0.05,P=0.033<0.05)。结论通过卵清蛋白致敏激发可以成功建立变应性鼻炎伴嗅觉障碍小鼠的动物模型。变应性鼻炎的炎症反应导致嗅黏膜的改变,可能是变应性鼻炎嗅觉障碍的发病机制之一。 展开更多
关键词 嗅觉障碍 变态反应和免疫学 鼻炎 变应性 常年性 疾病模型 动物
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地塞米松对嗅感觉神经元环核苷酸门控通道mRNA表达的影响 被引量:5
6
作者 张聪 魏永祥 +4 位作者 苗旭涛 刘小超 邢飞虹 赵红 韩德民 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2007年第10期595-598,共4页
目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),观察地塞米松对大鼠嗅感觉神经元(olfactory receptor neurons,ORNs)环核苷酸门控通道(cyclic nucleotide-gated channels,CNG通道)A... 目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),观察地塞米松对大鼠嗅感觉神经元(olfactory receptor neurons,ORNs)环核苷酸门控通道(cyclic nucleotide-gated channels,CNG通道)A2亚基mRNA表达的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组(每组10只):24小时激素组、2周激素组及各自对照组。激素组大鼠腹腔注射地塞米松:24小时激素组按1mg/kg体重给药1次,2周激素组按0.2mg/天给药。各对照组均给予生理盐水腹腔注射。通过实时荧光定量RT-PCR方法,检测各组ORNs的CNG通道CNGA2亚基mRNA的表达量。结果24小时激素组和对照组CNG通道CNGA2亚基mRNA表达差异无显著性意义(P>0.05);2周激素组CNGA2亚基mRNA表达显著高于对照组(P<0.01)。结论地塞米松长期应用可以使ORNs的CNG通道CNGA2亚基mRNA表达上调,CNG通道的转录增强可能是糖皮质激素治疗嗅觉障碍的机制之一。 展开更多
关键词 糖皮质激素类 嗅觉受体神经元 环核苷酸调节蛋白激酶类 离子通道
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螨变应原特异性免疫治疗1年后免疫学变化 被引量:5
7
作者 王阳 娄鸿飞 王成硕 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2013年第11期587-590,共4页
目的探讨标准化尘螨变应原疫苗进行集群免疫治疗过程中的免疫学机制。方法将60例螨过敏变应性鼻炎(AR)患者分为集群免疫治疗组(n=30)和药物治疗组(n=30)。检测基线和治疗1年后受试者血清中总IgE、螨特异性IgE、特异性IgG4水平,通过流式... 目的探讨标准化尘螨变应原疫苗进行集群免疫治疗过程中的免疫学机制。方法将60例螨过敏变应性鼻炎(AR)患者分为集群免疫治疗组(n=30)和药物治疗组(n=30)。检测基线和治疗1年后受试者血清中总IgE、螨特异性IgE、特异性IgG4水平,通过流式细胞术检测外周血单核细胞中Th1、Th2、天然调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+T细胞)和I型调节性T细胞(Tr1细胞,CD4+IL-10+IL-4-T细胞)在CD4+T细胞中百分比。结果经过1年治疗后,总IgE和螨特异性IgE水平未见明显改变,但免疫治疗组患者血清中螨特异性IgG4水平明显升高(P<0.0001)。Th1、Th2型细胞和天然调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+T细胞)占CD4+T细胞的百分比在治疗前后均无明显变化(P=ns),而Tr1细胞在免疫治疗1年后明显增高(P<0.001)。结论特异性IgG4和Tr1细胞增高可作为产生免疫耐受的免疫学指标。 展开更多
关键词 尘螨科 变应原 鼻炎 变应性 常年性 脱敏法 免疫
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男性嗅觉功能与嗅沟深度分析 被引量:5
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作者 张金峰 魏永祥 +4 位作者 胡凌 杨凌 郁迪 王振常 鲜军舫 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2010年第4期181-183,共3页
目的分析健康男性嗅觉功能与嗅沟深度的关系。方法对38位男性健康志愿者(年龄19~45岁,平均35.07岁)用嗅棒测试法进行嗅觉功能测定,包括阈值、气味分辨和气味识别鉴定3部分检测。检测之后立即进行嗅沟MRI,通过MRI经球后冠状切面对嗅沟... 目的分析健康男性嗅觉功能与嗅沟深度的关系。方法对38位男性健康志愿者(年龄19~45岁,平均35.07岁)用嗅棒测试法进行嗅觉功能测定,包括阈值、气味分辨和气味识别鉴定3部分检测。检测之后立即进行嗅沟MRI,通过MRI经球后冠状切面对嗅沟深度进行测量,对嗅觉功能与嗅沟深度进行直线相关分析并对左、右侧嗅沟进行配对t检验。结果嗅觉功能与左侧嗅沟深度相关(r=0.570,P=0.000),未观察到与右侧相关性;右侧嗅沟较左侧深(t=0.454,P﹤0.05)。结论在嗅沟深度与嗅觉功能之间存在联系,嗅沟深度一侧化与嗅觉系统功能一侧化相关,嗅觉系统具有右侧优势;MRI测量嗅沟深度对评估嗅觉功能具有一定意义。 展开更多
关键词 嗅觉 嗅球 磁共振成像 摄影测量法 嗅沟
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嗅觉功能障碍患者鼻内三叉神经功能的评估 被引量:8
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作者 杨凌 魏永祥 +4 位作者 张伟 任媛媛 郁迪 郭怡辰 李坤艳 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 2012年第9期497-501,共5页
目的探讨嗅觉障碍患者鼻内三叉神经功能的改变。方法 303例受试者中健康人100名,嗅觉功能障碍患者203例,分别采用T&T嗅觉计定量检查法(T&T)、嗅觉事件相关电位(olfactory event-related potentials,oERPs)和三叉神经事件相关电... 目的探讨嗅觉障碍患者鼻内三叉神经功能的改变。方法 303例受试者中健康人100名,嗅觉功能障碍患者203例,分别采用T&T嗅觉计定量检查法(T&T)、嗅觉事件相关电位(olfactory event-related potentials,oERPs)和三叉神经事件相关电位(trigeminal event-related potentials,tERPs)进行嗅觉和三叉神经功能检测。结果 T&T识别域结果表明嗅觉功能障碍患者跟健康人比较差异有显著性意义(P<0.05)。oERPs和tERPs结果显示嗅觉功能障碍患者跟健康人比较N1、P2波潜伏期延长,差异有显著性意义(P<0.05)。结论嗅觉功能障碍患者多伴有三叉神经敏感性的下降,青年患者下降尤为显著,其下降程度与性别关系不大。研究证实两种化学感受系统之间存在联系,联合检测可有助于临床的诊断和治疗。 展开更多
关键词 嗅觉 三叉神经 诱发电位 T&T嗅觉计定量检查法
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LC-MS/MS检测血清万古霉素浓度方法的建立及评价 被引量:4
10
作者 康雯婷 刘敬媛 +1 位作者 文江平 鲁辛辛 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第6期404-410,共7页
目的建立检测人血清中万古霉素浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法,并与化学发光微粒子免疫法(CMIA)比较方法学性能。方法血清样品经过甲醇沉淀蛋白质,采用安捷伦Poroshell 120EC C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.7μm)梯度洗脱分离,... 目的建立检测人血清中万古霉素浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法,并与化学发光微粒子免疫法(CMIA)比较方法学性能。方法血清样品经过甲醇沉淀蛋白质,采用安捷伦Poroshell 120EC C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.7μm)梯度洗脱分离,流动相为甲醇(0.1%甲酸)-水(0.1%甲酸),流速为0.5 m L/min,内标采用去甲万古霉素,质谱采用ESI正离子多反应监测扫描模式。用该方法定量检测112例临床服用万古霉素患者血清万古霉素含量,并与临床常用的CMIA所得结果进行比较。结果万古霉素在1~100μg/m L内线性关系良好(r2=0.996 4);方法日内日间精密度、准确度均满足药物定量检测要求,且无基质效应和残留效应。Wilcoxon符号秩和检验结果显示,LC-MS/MS测定结果与CMIA结果比较,差异有统计学意义(P<0.05);相关性检验结果显示,两者线性相关性良好,Y=1.06X-0.37(r=0.986)。结论 LC-MS/MS法性能较好,价格优廉,与CMIA法有较好的相关性,且检测在准确度、精密度上优势明显,可用于临床检测万古霉素的血清药物浓度。 展开更多
关键词 万古霉素 色谱-串联质谱 化学发光微粒子免疫分析法
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分泌性中耳炎中Foxp3^+CD4^+CD25^+T细胞的初步研究 被引量:2
11
作者 王丹妮 李洁 +2 位作者 赵守琴 王阳 杨琳 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2013年第3期126-128,共3页
目的通过检测叉头状转录因子p3+(FoxP3+)CD4+CD25+T细胞在成人分泌性中耳炎(otitis mediawith effusion,OME)患者外周血中的含量,探讨其是否参与OME的发生发展。方法采流式细胞技术检测36例成人OME患者外周血及30例正常人外周血中Foxp3+... 目的通过检测叉头状转录因子p3+(FoxP3+)CD4+CD25+T细胞在成人分泌性中耳炎(otitis mediawith effusion,OME)患者外周血中的含量,探讨其是否参与OME的发生发展。方法采流式细胞技术检测36例成人OME患者外周血及30例正常人外周血中Foxp3+CD4+CD25+T细胞的表达水平。结果慢性OME组外周血中Foxp3+CD4+CD25+T/CD4+T细胞含量显著高于急性OME组,也显著高于正常对照组(F=7.090,P<0.01);急性OME患者外周血中Foxp3+CD4+CD25+T/CD4+T细胞含量虽较正常人低,但不具有统计学意义(P>0.05)。结论 Foxp3+CD4+CD25+T细胞作为重要的免疫调节细胞可能参与OME慢性炎症持续状态的调控。 展开更多
关键词 中耳炎 伴渗出液 成年人 T淋巴细胞亚群 调节性T细胞
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幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病患儿外周血T细胞初探 被引量:2
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作者 崔彦儒 王军 +2 位作者 王阳 马丽晶 肖洋 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2008年第11期649-652,共4页
目的分析幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病(juvenile-onset recurrent respiratory papillomatosis,Jo-RRP)外周血T淋巴细胞免疫状态及其与病情间的相关性,探讨更合适的治疗方案。方法采用流式细胞仪检测19例Jo-RRP患儿外周血T淋巴细胞亚群... 目的分析幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病(juvenile-onset recurrent respiratory papillomatosis,Jo-RRP)外周血T淋巴细胞免疫状态及其与病情间的相关性,探讨更合适的治疗方案。方法采用流式细胞仪检测19例Jo-RRP患儿外周血T淋巴细胞亚群,按照《复发性呼吸道乳头状瘤病病情严重度评分表》对其病情进行严重度评分,分析外周血T淋巴细胞亚群功能及与病情的相关性。结果Jo-RRP患儿CD3^+、CD4^+、CD4^+/ CD8^+T细胞以及Th1FFh2均低于正常儿童(P<0.05)。除Th1细胞(P<0.05)外,其余免疫指标与Jo-RRP患儿临床严重度评分间均无明显相关性。结论Jo-RRP患儿可能存在T细胞介导的免疫功能障碍,其紊乱的免疫功能与疾病的发生、发展可能存在相互促进作用,需进一步完善手术切除肿瘤之外的免疫调节等辅助治疗手段。 展开更多
关键词 T淋巴细胞 乳头状瘤 复发 疾病严重 程度指数 儿童
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变应性鼻炎白细胞祖代细胞和相关细胞因子的检测及意义 被引量:14
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作者 王向东 韩德民 +5 位作者 周兵 魏永祥 鞠淑英 白文忠 王阳 刘仲燕 《耳鼻咽喉(头颈外科)》 2003年第2期95-97,F003,共4页
目的:探讨骨髓和外周血中的嗜酸粒细胞祖代细胞和成熟嗜酸粒细胞反应在变应性鼻炎发病中的作用和机制。材料和方法:20例常年性变应性鼻炎和10例对照外周血标本,以ELISA检测血清中的IL-5,以流式细胞仪检测外周血中的白细胞祖代细胞(CD_(... 目的:探讨骨髓和外周血中的嗜酸粒细胞祖代细胞和成熟嗜酸粒细胞反应在变应性鼻炎发病中的作用和机制。材料和方法:20例常年性变应性鼻炎和10例对照外周血标本,以ELISA检测血清中的IL-5,以流式细胞仪检测外周血中的白细胞祖代细胞(CD_(34)、CD_(45)双阳性)。动物实验采用6~8周雄性SD大鼠,随机分成实验组10只和对照组10只,以卵清蛋白致敏激发制成变应性鼻炎模型,记数外周血和骨髓中白细胞比例,检测外周血和骨髓中的IL-5。结果:患者外周血中白细胞祖代细胞和IL-5均显著高于对照组(P<0.05)。大鼠变应性鼻炎模型骨髓中嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、外周血中嗜酸粒细胞显著高于对照组(P<0.05);变应性鼻炎模型骨髓和外周血中IL-5显著高于对照组(P<0.05)。结论:骨髓中嗜酸粒细胞的增殖分化和向外周血及呼吸道粘膜的释放和迁移,可能在呼吸道炎症发病中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 白细胞 祖代细胞 细胞因子 临床意义 嗜酸粒细胞 细胞增殖 细胞分化 呼吸道炎症
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听神经病神经损害的病理机制探讨 被引量:9
14
作者 徐进 刘 +3 位作者 廉能静 王丽华 米文平 王阳 《耳鼻咽喉(头颈外科)》 2001年第4期195-198,共4页
目的 :对听神经病的病因和病理机制进行初步探讨。方法 :应用放免法、EL ISA双抗体夹心法、荧光免疫法分别检测 2 8例听神经病患者血清中的髓鞘碱蛋白 (MBP)、细胞因子白介素 - 2 (IL- 2 )及肿瘤坏死因子 - α(TNF- α)、内耳抗体(AEA)... 目的 :对听神经病的病因和病理机制进行初步探讨。方法 :应用放免法、EL ISA双抗体夹心法、荧光免疫法分别检测 2 8例听神经病患者血清中的髓鞘碱蛋白 (MBP)、细胞因子白介素 - 2 (IL- 2 )及肿瘤坏死因子 - α(TNF- α)、内耳抗体(AEA)。结果 :1听神经病患者血清中的 MBP含量为 :1.76~ 3.5 7ng/ ml(2 .5 3± 0 .42 )在正常范围 (P >0 .0 5 ) ;2听神经病患者血清中的细胞因子 IL - 2及 TNF-α均未检出 (<10 pg/ ml) ;371.43%听神经病患者血清中 AEA(Ig M和 Ig G)阳性 ,以 Ig M为主 ,其次为 Ig G。结论 :本实验结果表明 :听神经病的病理改变无中枢神经系统脱髓鞘也无外周神经系统的炎症性脱髓鞘 ;自身免疫反应可能参与听神经病神经损害的病理过程。听神经病的病理损害究竟是否为外周神经脱髓鞘以及脱髓鞘的性质还有待于进一步研究。 展开更多
关键词 听觉疾病 神经病学 脱髓鞘疾病 病理
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嗅感觉神经细胞的分离与培养 被引量:5
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作者 魏永祥 韩德民 +4 位作者 蔡贞 杨凌 刘小超 羡慕 张晓斌 《耳鼻咽喉(头颈外科)》 2003年第4期231-234,I001,共5页
目的 建立哺乳动物嗅感觉神经细胞体外培养的方法。方法取成年家兔的嗅区粘膜,用胰酶和胶原酶消化法进行嗅感觉神经细胞的分离与原代培养,并应用抗神经微丝蛋白(NFP)抗体、抗嗅觉标记蛋白(OMP)抗体进行免疫细胞化学染色,同时采用甲苯胺... 目的 建立哺乳动物嗅感觉神经细胞体外培养的方法。方法取成年家兔的嗅区粘膜,用胰酶和胶原酶消化法进行嗅感觉神经细胞的分离与原代培养,并应用抗神经微丝蛋白(NFP)抗体、抗嗅觉标记蛋白(OMP)抗体进行免疫细胞化学染色,同时采用甲苯胺蓝神经特异性染色和扫描电镜对其进行鉴定。结果 从嗅粘膜分离以及原代培养得到的嗅感觉神经元,光镜、电镜下为典型的双极神经元,OMP、NFP阳性,神经元特异性染色阳性。分离的嗅感觉神经元可在体外存活数小时,其细胞形态、生存数量和存活时间均能满足体外实验的基本要求。结论 本实验在家兔建立了较稳定、可靠的嗅感觉神经细胞分离和原代培养方法。为深入开展嗅感觉神经细胞的离体研究,提供了较为理想的材料来源和技术保障。 展开更多
关键词 嗅感觉神经细胞 细胞培养 细胞分离 免疫细胞化学 神经元
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喉癌细胞系LSC-1的建立及生物学特性的初步研究 被引量:2
16
作者 马丽晶 韩德民 +3 位作者 张伟 王鸿 范尔钟 王津津 《耳鼻咽喉(头颈外科)》 2002年第5期295-298,W002-W003,共6页
目的 :建立人喉鳞状细胞癌细胞系 ,为喉癌研究提供新的实验模型。方法 :采用体外原代组织块培养方法 ,对经病理证实为鳞状细胞癌的新鲜喉癌手术标本进行培养 ;对存活细胞进行形态学观察、免疫细胞化学染色、细胞周期检查、核型分析、电... 目的 :建立人喉鳞状细胞癌细胞系 ,为喉癌研究提供新的实验模型。方法 :采用体外原代组织块培养方法 ,对经病理证实为鳞状细胞癌的新鲜喉癌手术标本进行培养 ;对存活细胞进行形态学观察、免疫细胞化学染色、细胞周期检查、核型分析、电镜观察和裸鼠移植等。结果 :L CS- 1细胞系在体外连续培养 6个月 ,光镜下观察为上皮细胞样生长 ,似铺路石样排列 ,细胞呈异型性 ,核分裂相增多 ;电镜下见细胞表面有大量的微绒毛和突起 ,胞浆中可见张力原纤维 ;细胞角蛋白染色为阳性 ;细胞的倍增时间为 2 2 .84小时 ,在软琼脂中的克隆形成率为 4 7.77% ;细胞周期测定 :G0 / G1期74 .6 1% ,G2 / M期 7.78% ,S期 17.6 % ,G2 / G1=1.87,DI=2 .4 0 ;染色体众数为 6 9条 ;裸鼠移植成功率为 10 0 %。结论 :L SC- 1是一株人喉鳞状细胞癌细胞系 。 展开更多
关键词 喉癌 细胞系LSC-1 生物学特性 体外原代组织培养
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LAK细胞体外及裸鼠体内抗喉癌Hep-2细胞作用的研究
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作者 陈靖 张伟 +4 位作者 王津津 诸小侬 范尔钟 王秋平 韩德民 《耳鼻咽喉(头颈外科)》 1998年第1期43-47,共5页
采用乳酸脱氢酶法测定不同浓度rIL-2诱导的LAK细胞在体外喉癌Hep-2细胞的杀瘤活性,证实rIL-2对LAK细胞抗喉癌Hep-2细胞杀伤力的激活呈剂量依赖性,1×10^6U/LrIL-2为诱导LAK细胞抗喉癌... 采用乳酸脱氢酶法测定不同浓度rIL-2诱导的LAK细胞在体外喉癌Hep-2细胞的杀瘤活性,证实rIL-2对LAK细胞抗喉癌Hep-2细胞杀伤力的激活呈剂量依赖性,1×10^6U/LrIL-2为诱导LAK细胞抗喉癌活性的最适2,在该条件下诱导的LAK细胞于2的第4-7天抗喉癌活性达到高峰,约为40-50%,至培养第11天仍可保持30%的杀瘤率。裸鼠体内实验上实。 展开更多
关键词 细胞毒性试验 裸鼠 IL-2 喉癌
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幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病中人乳头状瘤病毒感染状态与病情变化的相关性分析 被引量:4
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作者 周思含 肖洋 +3 位作者 马丽晶 王军 杨凌 牛子捷 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2023年第2期103-106,共4页
目的本研究拟探究幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病(juvenile-onset recurrent respiratory papillomatosis,JORRP患儿人乳头状瘤病毒(HPV)亚型与含量的长期变化情况,及其对病程的影响。方法纳入2011年6月~2022年6月于北京同仁医院反复多... 目的本研究拟探究幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病(juvenile-onset recurrent respiratory papillomatosis,JORRP患儿人乳头状瘤病毒(HPV)亚型与含量的长期变化情况,及其对病程的影响。方法纳入2011年6月~2022年6月于北京同仁医院反复多次就诊、病程持续3年以上的43例JORRP患儿,收集其就诊期间的267例术中标本及留取标本时的手术时间间隔和年手术次数等临床资料,RT-PCR法检测HPV6和HPV11的DNA含量,依据临床病情特点分为缓解组(n=22)和复发组(n=21),统计分析HPV亚型及含量的变化与病情特点变化之间的相关性。结果13例患儿出现HPV感染转阴趋势,其中缓解组11例,复发组2例,HPV感染状态转阴与病情缓解相关(χ^(2)=6.537,P<0.05)。缓解组HPV11型转阴10例,复发组HPV11型转阴2例,组间比较转阴率差异显著(χ^(2)=5.224,P<0.05)。经Mc Nemar检验,缓解组HPV11的感染率降低具有统计学意义(χ^(2)=4.08,P<0.05)。线性回归结果提示缓解组的HPV6 DNA含量与年手术次数之间存在线性关系F(1,138)=10.478(P<0.05),HPV6 DNA含量会对年手术次数产生正向影响关系。结论JORRP患儿的HPV感染型别和病毒含量在病程中均可发生变化,均与病情存在相关性。HPV11型感染转阴者病情呈现缓解趋势,HPV6型的病毒含量与患者手术频率正相关。 展开更多
关键词 喉肿瘤 人乳头瘤病毒6 人乳头瘤病毒11 幼年型复发性呼吸道乳头状瘤
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