目的研究肝再生增强因子(ALR)保护急性肝损伤的作用及机制。方法将30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、急性肝损伤组和ALR干预组。急性肝损伤组小鼠按2 m L/kg体质量的剂量予以腹腔注射500 m L/L四氯化碳(CCl4)矿物油溶液1次。ALR干预组...目的研究肝再生增强因子(ALR)保护急性肝损伤的作用及机制。方法将30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、急性肝损伤组和ALR干预组。急性肝损伤组小鼠按2 m L/kg体质量的剂量予以腹腔注射500 m L/L四氯化碳(CCl4)矿物油溶液1次。ALR干预组于CCl4注射前8 h尾静脉注射ALR质粒,正常对照组注射等量生理盐水注射液。收集小鼠肝组织和血液标本,HE染色观察肝组织病理形态学变化;生化法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;流式细胞术检测肝组织中调节性T细胞(Treg)的数量,实时定量PCR(qRT-PCR)检测肝组织Foxp3、ALR、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平。结果 ALR干预组小鼠肝组织中ALR mRNA表达水平显著高于急性肝损伤组和正常对照组,急性肝损伤组与正常对照组相比无明显差异;流式细胞术检测结果显示ALR干预组小鼠肝组织中CD25+Foxp3+Treg/CD4+T细胞为(5.90±0.10)%,高于急性肝损伤组的(4.23±0.46)%和正常对照组的(2.93±0.74)%,急性肝损伤组显著高于正常对照组;ALR干预组小鼠肝组织中Foxp3 mRNA表达水平高于急性肝损伤组和正常对照组,急性肝损伤组高于正常对照组,但差异无统计学意义;ALR干预组与急性肝损伤组相比,IL-6 mRNA、TNF-αmRNA表达水平降低,而与正常对照组相比无明显变化,急性肝损伤组与正常对照组相比,IL-6 mRNA、TNF-αmRNA表达水平明显升高。结论 ALR通过上调Treg数量保护小鼠急性肝损伤,可能与Treg下调肝脏IL-6、TNF-α表达有关。展开更多
目的探讨调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)在急性肝衰竭外周血及肝脏中表达频数的变化。方法选取10名急性肝衰竭患者及5名健康对照者,应用流式细胞术检测各组患者外周血中调节性T细胞表达频数的变化。将Balb/C小鼠采用数字表法随...目的探讨调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)在急性肝衰竭外周血及肝脏中表达频数的变化。方法选取10名急性肝衰竭患者及5名健康对照者,应用流式细胞术检测各组患者外周血中调节性T细胞表达频数的变化。将Balb/C小鼠采用数字表法随机分成急性肝衰竭1d、3d、7d组和正常对照组。模型组小鼠腹腔注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)矿物油1次,建立急性肝衰竭模型,对照组注射等量0.9%氯化钠注射液。生化法测定血清ALT、AST浓度,HE染色观察肝组织病理形态变化;流式细胞术分析外周血和肝组织中浸润的Tregs变化。结果流式分析结果显示,与正常对照组相比,急性肝衰竭患者外周血Tregs表达下降(3.23±1.87 vs 6.08±1.45,P<0.05)。与对照组相比,急性肝衰竭1 d、3 d和7 d组小鼠外周血中Tregs比例CD25+Foxp3+/CD4+与对照组相比呈下降趋势,而肝组织中Tregs比例CD25+Foxp3+/CD4+呈升高趋势。结论急性肝衰竭时患者和小鼠外周血中调节性T细胞呈下降趋势,而小鼠肝中浸润的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞呈升高趋势,Tregs可能与急性肝衰竭的发生有一定相关性。展开更多
文摘目的探讨小鼠肝纤维化时外周血和肝组织浸润的不同免疫细胞的变化及其意义。方法将C57BL/6小鼠采用数字表法随机分成肝纤维化组和对照组,每组5只,肝纤维化组腹腔注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4),建立肝纤维化模型,对照组注射等量0.9%氯化钠注射液。采用生化法测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)水平;HE染色、Masson染色观察肝组织病理变化;流式细胞术分析外周血和肝组织中浸润的调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)、NK1.1+、CD4+及CD8+细胞的比例变化,比较组间差异。结果流式分析显示纤维化小鼠肝组织中Tregs比例CD25+Foxp3+/CD4+为(10.63±1.50)%,明显高于对照组(1.80±0.66)%,差异有统计学意义(P<0.01),外周血的Tregs上升不明显,纤维化组与对照组分别为(7.40±0.85)%、(5.27±1.30)%;纤维化小鼠肝组织浸润的NK1.1+细胞和血液中的NK1.1+细胞占淋巴细胞的比例分别低于对照组〔(9.53±2.25)%vs(19.80±5.97)%,P<0.05;(0.38±0.13)%vs(1.06±0.63)%,P<0.05〕;纤维化小鼠肝组织和血中的CD4+细胞及CD4+/CD8+比值也有所下降,但差异无统计学意义。结论小鼠肝纤维化时,肝组织中浸润的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞升高,NK1.1+细胞下降,CD4+细胞下降。
文摘目的探讨调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)在急性肝衰竭外周血及肝脏中表达频数的变化。方法选取10名急性肝衰竭患者及5名健康对照者,应用流式细胞术检测各组患者外周血中调节性T细胞表达频数的变化。将Balb/C小鼠采用数字表法随机分成急性肝衰竭1d、3d、7d组和正常对照组。模型组小鼠腹腔注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)矿物油1次,建立急性肝衰竭模型,对照组注射等量0.9%氯化钠注射液。生化法测定血清ALT、AST浓度,HE染色观察肝组织病理形态变化;流式细胞术分析外周血和肝组织中浸润的Tregs变化。结果流式分析结果显示,与正常对照组相比,急性肝衰竭患者外周血Tregs表达下降(3.23±1.87 vs 6.08±1.45,P<0.05)。与对照组相比,急性肝衰竭1 d、3 d和7 d组小鼠外周血中Tregs比例CD25+Foxp3+/CD4+与对照组相比呈下降趋势,而肝组织中Tregs比例CD25+Foxp3+/CD4+呈升高趋势。结论急性肝衰竭时患者和小鼠外周血中调节性T细胞呈下降趋势,而小鼠肝中浸润的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞呈升高趋势,Tregs可能与急性肝衰竭的发生有一定相关性。
