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脂肪干细胞局部注射改善淋巴水肿的实验研究 被引量:6
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作者 周晨笑 苏万春 +5 位作者 李娜 梁顺涛 张国英 马刚 李沛霖 崔磊 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第6期869-875,共7页
目的研究脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)体内减轻炎性反应治疗淋巴水肿的可行性及作用机制,为淋巴水肿疾病的干细胞治疗探索新的思路。方法提取小鼠皮下脂肪干细胞,体外培养、扩张至3~5代。建立淋巴水肿鼠尾模型,手术阻... 目的研究脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)体内减轻炎性反应治疗淋巴水肿的可行性及作用机制,为淋巴水肿疾病的干细胞治疗探索新的思路。方法提取小鼠皮下脂肪干细胞,体外培养、扩张至3~5代。建立淋巴水肿鼠尾模型,手术阻断鼠尾深、浅淋巴回流,造模当天,于皮下注射ADSCs或磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution,PBS),ADSCs组共20只小鼠,PBS对照组共30只小鼠。术后3周,分别用HE染色、Whole mount-BODIPY染色、Masson染色、免疫荧光染色检测鼠尾皮下组织/脂肪厚度、纤维化程度、淋巴管形态,干预后8周,FITC-Dextran检测淋巴回流。结果ADSCs组淋巴水肿缓解,鼠尾体积在术后4周内较对照组减小;皮下脂肪厚度降低约40%;皮下组织的纤维化缓解,Masson染色结果显示胶原纤维所占面积比例下降约20%;高倍镜视野下的淋巴管数量未发生变化,但是横截面积减小约60%;FITC-Dextran检测淋巴回流发现,ADSCs组荧光染料通过手术切口明显多于PBS对照组。结论ADSCs局部注射后,可缓解淋巴水肿。 展开更多
关键词 淋巴水肿 干细胞 脂肪干细胞
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碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因分布 被引量:7
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作者 杨朵 胡智颖 辛续丽 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期465-467,共3页
目的检测碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因分布情况,为此类菌感染的预防与控制提供理论依据。方法改良Hodge试验检测医院临床分离肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶表型;PCR法检测KPC基因的携带率。结果 642株碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克... 目的检测碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因分布情况,为此类菌感染的预防与控制提供理论依据。方法改良Hodge试验检测医院临床分离肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶表型;PCR法检测KPC基因的携带率。结果 642株碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌中,Hodge试验阳性率为96.6%。KPC基因的携带率为50.9%,均为KPC-2型。结论该医院临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因主要为KPC-2基因。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯酶 KPC基因 Hodge试验
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慢病毒介导的重组TM9SF1蛋白通过诱导自噬和内质网应激抑制293T细胞生长 被引量:5
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作者 张国英 杨朵 +5 位作者 高娜娜 唐子华 李娜 仝永娟 商婷 肖娟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期600-606,共7页
九次跨膜超家族蛋白成员1(transmembrane 9 superfamily protein member 1,TM9SF1)在进化过程中高度保守,在人体组织和多种细胞系广泛表达。目前,关于该蛋白质的功能研究十分有限和初步。本研究采用慢病毒介导的TM9SF1表达系统,研究了重... 九次跨膜超家族蛋白成员1(transmembrane 9 superfamily protein member 1,TM9SF1)在进化过程中高度保守,在人体组织和多种细胞系广泛表达。目前,关于该蛋白质的功能研究十分有限和初步。本研究采用慢病毒介导的TM9SF1表达系统,研究了重组TM9SF1蛋白的生化特点及其对细胞生长的调控作用。慢病毒感染的293T全细胞裂解液的蛋白质免疫印迹结果揭示,TM9SF1蛋白具有表观分子质量约为70 k D的单体及寡聚体两种主要形式;在室温及加热37℃时蛋白质相对稳定,随变性温度升高(56℃以上)逐渐失去其稳定性。CCK8法显示,与慢病毒空载体感染的293T细胞比较,TM9SF1慢病毒表达载体感染的293T细胞在感染2 d后增殖明显减缓(P<0.001)。Western印迹结果证明,过表达TM9SF1引起LC3Ⅱ表达明显上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例升高,说明TM9SF1可引起293T细胞发生自噬。荧光实时定量PCR结果显示,过表达TM9SF1的293T细胞内质网应激标志分子CHOP、GADD34和XBP1(S)表达水平是对照细胞的3~4倍,提示发生了内质网应激反应。以上结果提示,TM9SF1具有抑制293T细胞生长的功能,该功能可能与其引起的内质网应激和自噬有关。这一结论将进一步加深对TM9SF1在细胞生长调控中的功能的认识。 展开更多
关键词 九次跨膜超家族蛋白1 慢病毒 内质网应激 自噬
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改良倒“L”法内眦赘皮矫正术联合切开法重睑术的临床应用 被引量:13
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作者 尹宏宇 王川 +1 位作者 彭启立 崔磊 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第6期887-890,共4页
目的探讨改良倒“L”法内眦赘皮矫正术与切开法重睑术的联合切口设计在临床中的应用效果。方法自2018年1月至2020年1月,共有求美者358人,716只眼,均采用改良倒“L”法矫正内眦赘皮联合切开法重睑术进行手术治疗,倒“L”短臂与重睑切口... 目的探讨改良倒“L”法内眦赘皮矫正术与切开法重睑术的联合切口设计在临床中的应用效果。方法自2018年1月至2020年1月,共有求美者358人,716只眼,均采用改良倒“L”法矫正内眦赘皮联合切开法重睑术进行手术治疗,倒“L”短臂与重睑切口相连续,长臂隐藏于下睑缘。术后6个月开始通过患者术后效果评价表(Patient Reported Outcome Measures,PROM)随访,最后对术后效果进行评价。结果347位求美者对术后效果满意,11位求美者、15只眼出现了重睑或内眦形态不佳的问题,均予以二次手术修复,满意率达97%。结论本文设计的改良倒“L”法内眦赘皮矫正术与切开法重睑术的联合切口设计是一种简便实用、易于掌握的矫治单睑伴内眦赘皮方法,求美者满意度高,值得在临床推广应用。 展开更多
关键词 倒“L”法内眦赘皮矫正术 切开法重睑术 内眦赘皮 单睑
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不同打靶位点影响人诱导多能干细胞MYO7A杂合突变位点的基因校正中CRISPR/Cas9介导的同源重组效率 被引量:1
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作者 唐子华 陈加荣 +3 位作者 丁洁 陈建玲 王翠翠 王金福 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期975-985,共11页
应用CRISPR-Cas9系统对人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)进行基因编辑,为疾病模型的建立、致病机制研究、药物筛选及基因校正治疗疾病提供了更广阔的平台。相对于CRISPR-Cas9介导的基因敲除,应用该系统... 应用CRISPR-Cas9系统对人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)进行基因编辑,为疾病模型的建立、致病机制研究、药物筛选及基因校正治疗疾病提供了更广阔的平台。相对于CRISPR-Cas9介导的基因敲除,应用该系统介导的同源重组实现基因点突变或突变校正效率要低、且难度偏大。为了实现对MYO7A杂合点突变(c.4118C>T)的人i PSCs的点突变校正,本文构建了表达maxGFP的pX330质粒。针对需校正的突变位点,设计5组识别序列并连接到maxGFP-pX330中构建靶向质粒。将5组打靶质粒分别转染HEK 293FT细胞48 h,细胞表达GFP;测序结果显示,MYO7A基因相应位点出现杂峰,表明打靶质粒具有打断活性。将同源模版单链寡核苷酸链(single-stranded DNA oligonucleotides,ss ODN)与打靶质粒共同电转入人i PSCs后48 h,经流式分选出(5. 8±2. 2)%的细胞表达GFP。分选后细胞行单克隆扩增并测序。结果显示,打靶质粒1和ss ODN组合对点突变校正未成功;打靶质粒2、3、4、5与ss ODN组合均获得了校正后的细胞株。本研究表明,打断位点是影响同源重组校正效率的关键因素。当应用CRISPR/Cas9(或其它核酸酶)介导的同源重组进行基因编辑操作时,可以同时选择多个打靶位点造成基因组不同位置上的双链打断(double-stranded break,DSB)位点,以获得目的单克隆细胞株。本研究为应用CRISPR-Cas9系统对人诱导多能干细胞进行基因编辑提供了有力参考。 展开更多
关键词 人诱导多能干细胞 CRISPR-Cas9系统 同源重组 基因编辑 点突变校正
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下颌角弧形截骨导向器在内收型下颌角截骨中的应用 被引量:2
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作者 尹宏宇 王川 +4 位作者 崔磊 张智勇 唐晓军 李秉航 冯时 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第6期891-895,共5页
目的探讨经口内入路使用下颌角弧形截骨导向器在内收型下颌角截骨整形术中的疗效及安全性。方法自2015年8月至2017年8月,对21例内收型下颌角肥大患者实施导向器辅助弧形截骨。结果术后随访6个月至2年,除2例自觉改善不明显外,其余患者对... 目的探讨经口内入路使用下颌角弧形截骨导向器在内收型下颌角截骨整形术中的疗效及安全性。方法自2015年8月至2017年8月,对21例内收型下颌角肥大患者实施导向器辅助弧形截骨。结果术后随访6个月至2年,除2例自觉改善不明显外,其余患者对下面部轮廓改善均满意。所有患者无术后感染、面动脉断裂、下颌骨骨折和下牙槽神经损伤等合并症发生。结论下颌角弧形截骨导向器可更安全有效地控制截骨线,降低严重手术合并症的发生率,提高患者的满意度。 展开更多
关键词 下颌角弧形截骨导向器 内收型下颌角肥大 截骨
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自体富血小板纤维蛋白治疗难愈性创面的临床观察 被引量:9
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作者 刘静 吴顺香 +2 位作者 韩焱福 徐光 崔磊 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第6期876-881,共6页
目的观察自体富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)治疗难愈性创面的临床疗效。方法2014年3月至2016年3月首都医科大学附属北京世纪坛医院整形外科收治了33例难愈性创面患者,其中男性25例,女性8例;年龄25~91岁。创面不愈时间1~14... 目的观察自体富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)治疗难愈性创面的临床疗效。方法2014年3月至2016年3月首都医科大学附属北京世纪坛医院整形外科收治了33例难愈性创面患者,其中男性25例,女性8例;年龄25~91岁。创面不愈时间1~144个月。33例患者经清创后局部外用PRF治疗,每周一次。以创面愈合为指标,总结临床疗效。结果33例难愈性创面患者经PRF治疗3~7次后,21例痊愈,8例好转,4例无效。随访3~6个月,创面愈合患者无复发。结论采用自体PRF治疗难愈性创面疗效确切,明显缩短了疗程,降低了治疗成本,无不良反应发生,是一种新的简单有效的创面治疗技术。 展开更多
关键词 难愈性伤口 伤口愈合 富血小板纤维蛋白 临床观察
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可注射载Co/Fe/Cu透钙磷石的制备及其抗菌性能
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作者 张开丽 裴正军 +3 位作者 李光大 李晓玉 赵三团 米镠洋 《功能材料》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第6期6169-6176,共8页
以含Co、Fe、Cu三种离子的磷酸钙为原料,制备载Co、Fe、Cu可注射透钙磷石骨水泥(CFC-Bru)。对CFC-Bru的固化时间、可注射、抗溃散、显微结构、降解性、抗菌性及细胞相容性等进行评价。结果表明:CFC-Bru固化时间约30 min;可注射系数达90%... 以含Co、Fe、Cu三种离子的磷酸钙为原料,制备载Co、Fe、Cu可注射透钙磷石骨水泥(CFC-Bru)。对CFC-Bru的固化时间、可注射、抗溃散、显微结构、降解性、抗菌性及细胞相容性等进行评价。结果表明:CFC-Bru固化时间约30 min;可注射系数达90%;抗溃散性良好;主晶型为透钙磷石和磷酸二氢钙;表面形貌于对照组变化显著。平板抑菌实验显示CFC-Bru对大肠杆菌、金色葡萄球菌和铜绿杆菌的抑菌直径分别达到了11、15和25 mm;肉汤抑菌实验表明,材料浓度为10 mg/mL时可完全抑制铜绿杆菌生长;为20 mg/mL时可完全抑制大肠杆菌生长;为50 mg/mL时可完全抑制金色葡萄球菌生长。细胞实验显示,CFC-Bru对人成骨肉瘤MG-63无细胞毒性;材料与细胞复合培养3和7天后,细胞可在其表面黏附,生长。该材料具有作为抗菌骨修复材料应用的潜力。 展开更多
关键词 骨水泥 透钙磷石 抗菌性能 可注射性 骨修复
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真皮内脂肪组织调控皮肤生理病理过程与机制的研究进展 被引量:2
9
作者 李沛霖 崔磊 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第6期896-900,共5页
真皮内脂肪组织(dermal white adipose tissue,dWAT)是位于真皮网状层正下方的一层白色脂肪组织。dWAT在皮肤的生理病理过程中发挥着重要的作用,具有调控毛囊生长周期、促进创面愈合、介导皮肤先天性免疫和对抗皮肤衰老的作用。其最新... 真皮内脂肪组织(dermal white adipose tissue,dWAT)是位于真皮网状层正下方的一层白色脂肪组织。dWAT在皮肤的生理病理过程中发挥着重要的作用,具有调控毛囊生长周期、促进创面愈合、介导皮肤先天性免疫和对抗皮肤衰老的作用。其最新的研究成果更新并加深了我们对皮肤的认识,并有望成为皮肤损伤修复与疾病治疗的新靶点。本文就dWAT新的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 真皮内脂肪组织 毛囊周期 创伤愈合 固有免疫 皮肤衰老
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面部骨性轮廓整形(颧骨颧弓、下颌角、颏)十年临床经验回顾 被引量:2
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作者 汪济广 李沛霖 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第6期882-886,共5页
目的回顾总结笔者颅颌面美容团队十年中面部骨性轮廓整形手术的经验。方法对750例下颌角肥大行弧形截骨术,对141例颧骨颧弓肥大行I型或L型截骨同时辅以颞面部软组织提升术,对117例颏部形态异常行颏水平截骨前移或颏水平截骨加高/缩短/... 目的回顾总结笔者颅颌面美容团队十年中面部骨性轮廓整形手术的经验。方法对750例下颌角肥大行弧形截骨术,对141例颧骨颧弓肥大行I型或L型截骨同时辅以颞面部软组织提升术,对117例颏部形态异常行颏水平截骨前移或颏水平截骨加高/缩短/左右移动综合手术。结果所有1008例手术患者面型均得到明显改善,并有不同程度面部年轻化表现。其中面神经颞支暂时性损伤3例,大出血1例,感染2例,颏神经损伤2例,均得到有效处理恢复。结论恰当的面部骨性轮廓(颧骨颧弓下颌角颏)手术术式设计,良好的技术操作可以使面部轮廓外形得到显著改善,并有不同程度面部年轻化的效果。 展开更多
关键词 颧骨整形 下颌角整形 颏整形
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