目的检测HT22细胞系可否作为研究神经元铁死亡的良好细胞模型,在细胞水平上为研究神经元铁死亡的机制提供基础。方法用经典铁死亡诱导剂Erastin和RSL3处理HT22细胞系,显微镜下观察细胞存活情况;使用CCK-8法检测细胞存活率;使用丙二醛法...目的检测HT22细胞系可否作为研究神经元铁死亡的良好细胞模型,在细胞水平上为研究神经元铁死亡的机制提供基础。方法用经典铁死亡诱导剂Erastin和RSL3处理HT22细胞系,显微镜下观察细胞存活情况;使用CCK-8法检测细胞存活率;使用丙二醛法或菲罗嗪法分别检测细胞内脂质活性氧(reactive oxygen species,ROS)、Fe^ 2+浓度;实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测细胞铁死亡关键基因SLC7A11(solute carrier family 7 member 11)、PTGS2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2)的mRNA水平。结果Erastin或RSL3处理HT22后,显微镜下发现细胞发生明显死亡,加入铁死亡抑制剂Ferrostatin-1后,细胞死亡显著减少。Erastin或RSL3诱导后HT22细胞内的Fe^ 2+浓度无明显变化(P>0.05),脂质过氧化水平明显增加(P<0.05);Erastin或RSL3导致细胞SLC7A11、PTGS2的mRNA表达水平增加(P<0.05),进一步验证了处理后细胞发生铁死亡。结论HT22细胞系是一种铁死亡敏感细胞系,Erastin或RSL3诱导HT22铁死亡,HT22细胞系可用于研究神经元中铁死亡的发生及胞内脂质过氧化物蓄积机制。展开更多
文摘目的检测HT22细胞系可否作为研究神经元铁死亡的良好细胞模型,在细胞水平上为研究神经元铁死亡的机制提供基础。方法用经典铁死亡诱导剂Erastin和RSL3处理HT22细胞系,显微镜下观察细胞存活情况;使用CCK-8法检测细胞存活率;使用丙二醛法或菲罗嗪法分别检测细胞内脂质活性氧(reactive oxygen species,ROS)、Fe^ 2+浓度;实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测细胞铁死亡关键基因SLC7A11(solute carrier family 7 member 11)、PTGS2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2)的mRNA水平。结果Erastin或RSL3处理HT22后,显微镜下发现细胞发生明显死亡,加入铁死亡抑制剂Ferrostatin-1后,细胞死亡显著减少。Erastin或RSL3诱导后HT22细胞内的Fe^ 2+浓度无明显变化(P>0.05),脂质过氧化水平明显增加(P<0.05);Erastin或RSL3导致细胞SLC7A11、PTGS2的mRNA表达水平增加(P<0.05),进一步验证了处理后细胞发生铁死亡。结论HT22细胞系是一种铁死亡敏感细胞系,Erastin或RSL3诱导HT22铁死亡,HT22细胞系可用于研究神经元中铁死亡的发生及胞内脂质过氧化物蓄积机制。
