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BPI_(23)-Fcγ1重组蛋白原核表达载体的构建、表达和生物学活性的测定被引量：3: 1; 作者安云庆柯岩杨贵贞《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期511-516,共6页; 目的构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，转化大肠杆菌 DH5α，诱导表达 BPI23- Fcγ 1抗菌重组蛋白。方法采用 RT- PCR技术，从 HL- 60细胞和正常人白细胞 mRNA中扩增编码 BPI23和 IgG1Fc（ Fcγ 1）的基因；通过连接反应构建... 展开更多; 关键词 pBV-BPI600-Fcγ1700 重线表达载体 RT-PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源性抗角蛋白单链抗体的构建及表达被引量：3: 2; 作者张国民陈宇萍 +1 位作者王刚刘玉峰《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期719-722,共4页; 目的:克隆抗角蛋白抗体的可变区(V区)基因,构建抗角蛋白单链抗体(scFv)表达载体并表达。方法:根据人源性抗角蛋白Fab段的基因序列设计引物,用PCR方法克隆抗角蛋白抗体的V区基因,并重组到scFv的表达载体中,在大肠杆菌进行表达,表达产物... 展开更多; 关键词角蛋白 V区基因 SCFV; 在线阅读下载PDF 职称材料

pBV-BPI600重组表达载体的构建及其在E.coli中的表达被引量：1: 3; 作者安云庆刘箐 +1 位作者柯岩沈海中《首都医科大学学报》 CAS 2001年第1期1-5,共5页; ①采用RT PCR技术 ,以HL 60细胞mRNA为模板扩增获得编码BPI氨基端 1 93个氨基酸 (rBPI2 1)的基因片段 (BPI60 0 ) ;EcoRI/BamHI酶切扩增产物获得BPI 2 0 0bp和BPI 4 0 0bp 2个基因片段。②成功构建PUC1 8 BPI2 0 0和PUC1 8 BPI4 0 0重... 展开更多; 关键词重组杀菌渗透增强蛋白 pBV220表达载体 PUC18克隆载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

AAV2-BF转染小鼠对MLD内毒素攻击的抵抗作用: 4; 作者关翔宇李晨 +5 位作者李静吕喆彭智张国民李莉安云庆《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期407-410,415,共5页; 目的:通过观测BPI700-Fcγ1700嵌和基因导入小鼠,对最小致死量(MLD)内毒素攻击的抵抗作用,探讨抗感染基因治疗在临床感染高危人群中应用的可能性。方法:采用Dotblot、Westernblot、免疫组化、改良ELISA方法和内毒素/细胞因子检测试剂盒... 展开更多; 关键词 AAV2-BPI700-Fcγ1700重组病毒(AAV2-BF) 最小致死量内毒素促炎细胞因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白scFv: 5; 作者张国民乔媛媛 +2 位作者陈宇萍吕喆安云庆《首都医科大学学报》 CAS 2007年第1期71-74,共4页; 目的从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白单链抗体(scFv),测定其特异性结合活性并进行基因序列分析。方法以混合分子量人表皮角蛋白包被固相,对构建的大容量噬菌体抗体库进行筛选,经4轮“吸附洗脱扩增”后,挑取单克隆,用ELISA法... 展开更多; 关键词噬菌体抗体库角蛋白单链抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

rBPI_(23)基因克隆与鉴定: 6; 作者柯岩安云庆杨贵贞《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期312-314,317,共4页; 目的 :rBPI2 3基因 (BPI60 0bp)克隆与鉴定。方法 :采用RT PCR技术 ,从HL 6 0细胞mRNA中扩增编码BPIN端 199个氨基酸 (rBPI2 3)的基因片段 (BPI60 0bp) ,经酶切后通过连接反应构建重组克隆载体 ,测序鉴定。结果 :RT PCR获得预期的扩增... 展开更多; 关键词 PUC18克隆载体 RT-PCR rBPI23基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

人IgG1FccDNA的克隆与鉴定: 7; 作者安云庆柯岩陈金栋《首都医科大学学报》 CAS 2000年第2期93-96,共4页; 根据编码人IgG1Fc(Fcγ1 )的基因序列 ,设计合成 1对与之相匹配的引物。采用RT PCR法 ,从正常人白细胞mRNA中扩增获得预期目的基因Fcγ1 70 0bp基因片段 ,成功构建PUC1 8 Fcγ1 70 0 重组克隆载体 ,酶切、酶谱分析与预期结果相符 ;DNA... 展开更多; 关键词 IgG1Fe(Fcγ1) RT-PCR 克隆鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名BPI_(23)-Fcγ1重组蛋白原核表达载体的构建、表达和生物学活性的测定被引量：3: 1; 作者安云庆柯岩杨贵贞; 机构首都医科大学微生物学和免疫学教研室; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期511-516,共6页; 文摘目的构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，转化大肠杆菌 DH5α，诱导表达 BPI23- Fcγ 1抗菌重组蛋白。方法采用 RT- PCR技术，从 HL- 60细胞和正常人白细胞 mRNA中扩增编码 BPI23和 IgG1Fc（ Fcγ 1）的基因；通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体；转化感受态大肠杆菌 DH5α，通过温控诱导表达 BPI23- Fcγ 1重组蛋白；测定 BPI23- Fcγ 1重组蛋白的抗菌及免疫学活性。结果 (1)RT- PCR获得预期的扩增产物— BPI600bp和 Fcγ 1 700bp基因片段； (2)成功构建 pUC18- BPI180、 pUC18- BPI420和 pUC18- Fcγ 1700重组克隆载体， DNA测序结果与文献报道一致； (3)成功构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，酶切图谱分析与预期结果相符； (4)BPI23- Fcγ 1重组蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的 20％； (5)复性后重组蛋白具有抗菌活性和激活补体、介导调理吞噬等作用。结论 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体构建成功，并在大肠杆菌中得到表达，获得具有 BPI和 IgGFc双重生物学活性的重组抗菌蛋白。; 关键词 pBV-BPI600-Fcγ1700 重线表达载体 RT-PCR; Keywords pBV- BPI600- Fcγ 1700 recombinant expression vector BPI23- Fcγ 1 recombinant protein RT- PCR; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源性抗角蛋白单链抗体的构建及表达被引量：3: 2; 作者张国民陈宇萍王刚刘玉峰; 机构首都医科大学微生物学和免疫学教研室第四军医大学西京医院皮肤科; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期719-722,共4页; 基金国家高技术研究发展计划(863)资助(No.2001AA215361); 文摘目的:克隆抗角蛋白抗体的可变区(V区)基因,构建抗角蛋白单链抗体(scFv)表达载体并表达。方法:根据人源性抗角蛋白Fab段的基因序列设计引物,用PCR方法克隆抗角蛋白抗体的V区基因,并重组到scFv的表达载体中,在大肠杆菌进行表达,表达产物经体外变性复性后进行SDS-PAGE鉴定。用ELISA检测其特异性结合活性。结果:成功地克隆抗角蛋白抗体的V区基因,构建了scFv的表达载体,并在大肠杆菌中表达。ELISA检测证实,表达的scFv保留了亲本Fab抗体的特异结合活性。结论:获得功能性抗角蛋白的scFv,可用于进一步的临床应用研究。; 关键词角蛋白 V区基因 SCFV; Keywords keratin V-gene scFv; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名pBV-BPI600重组表达载体的构建及其在E.coli中的表达被引量：1: 3; 作者安云庆刘箐柯岩沈海中; 机构首都医科大学微生物学和免疫学教研室; 出处《首都医科大学学报》 CAS 2001年第1期1-5,共5页; 基金国家自然科学基金!资助项目 (395 70 6 6 6 ); 文摘 ①采用RT PCR技术 ,以HL 60细胞mRNA为模板扩增获得编码BPI氨基端 1 93个氨基酸 (rBPI2 1)的基因片段 (BPI60 0 ) ;EcoRI/BamHI酶切扩增产物获得BPI 2 0 0bp和BPI 4 0 0bp 2个基因片段。②成功构建PUC1 8 BPI2 0 0和PUC1 8 BPI4 0 0重组克隆载体 ,DNA测序分析结果与文献报道一致。③成功构建pBV2 2 0 BPI60 0重组表达载体 ;转化E .coliDH5α感受态细胞 ,诱导目的重组蛋白表达 ;经SDS PAGE电泳和Western blot鉴定 ,证实表达的重组蛋白确为外源基因 (BPI 60 0bp)编码的产物BPI2 1重组蛋白。; 关键词重组杀菌渗透增强蛋白 pBV220表达载体 PUC18克隆载体; Keywords recombinant bactericidal/permeability increasing protein pBV220 expression vector PUC18 cloning vector; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学] R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名AAV2-BF转染小鼠对MLD内毒素攻击的抵抗作用: 4; 作者关翔宇李晨李静吕喆彭智张国民李莉安云庆; 机构首都医科大学微生物学和免疫学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期407-410,415,共5页; 基金北京市自然科学基金项目北京市教委委员会科技发展计划重点项目(KI200410025010); 文摘目的:通过观测BPI700-Fcγ1700嵌和基因导入小鼠,对最小致死量(MLD)内毒素攻击的抵抗作用,探讨抗感染基因治疗在临床感染高危人群中应用的可能性。方法:采用Dotblot、Westernblot、免疫组化、改良ELISA方法和内毒素/细胞因子检测试剂盒,检测目的基因产物在CHO细胞和小鼠骨骼肌细胞中的表达及血清中内毒素和促炎细胞因子含量变化。结果:(1)目的基因产物在CHO细胞和小鼠骨骼肌细胞中成功表达,在AAV2-BF导入组小鼠血清中可检测到目的基因产物;(2)在最小致死量内毒素攻击后,AAV2-BF导入组小鼠血清中内毒素和促炎细胞因子含量显著低于对照组小鼠;其存活率(40%)明显高于对照组小鼠(2·5%)。结论:AAV2-BF导入组小鼠对MLD内毒素攻击具有抵抗作用,提示抗感染基因治疗对临床G-菌败血症及其引发的内毒素中毒性休克具有较好防治作用。; 关键词 AAV2-BPI700-Fcγ1700重组病毒(AAV2-BF) 最小致死量内毒素促炎细胞因子; Keywords AAV2-BPI700-Fcr1700 virus（AAV2-BF） Minimal lethal dose（MLD） Endotoxin Proinflammatory cytokines; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白scFv: 5; 作者张国民乔媛媛陈宇萍吕喆安云庆; 机构首都医科大学微生物学和免疫学教研室海军总医院中心实验科; 出处《首都医科大学学报》 CAS 2007年第1期71-74,共4页; 文摘目的从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白单链抗体(scFv),测定其特异性结合活性并进行基因序列分析。方法以混合分子量人表皮角蛋白包被固相,对构建的大容量噬菌体抗体库进行筛选,经4轮“吸附洗脱扩增”后,挑取单克隆,用ELISA法测定特异性结合活性,并对阳性克隆抗体基因进行DNA指纹分析及序列同源性分析。结果经4轮筛选,获得9株可表达抗人角蛋白单链抗体的克隆,酶切鉴定正确后,经DNA指纹分析及序列同源性分析证明为不同的抗体基因。结论利用噬菌体抗体库技术获得了人源性抗角蛋白单链抗体,为临床应用研究提供了具有更广阔应用前景的人源小分子抗体。; 关键词噬菌体抗体库角蛋白单链抗体; Keywords phage antibody libraries keratin scFv; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名rBPI_(23)基因克隆与鉴定: 6; 作者柯岩安云庆杨贵贞; 机构首都医科大学微生物学和免疫学教研室白求恩医科大学免疫学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期312-314,317,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目!(项目号:39570666); 文摘目的 :rBPI2 3基因 (BPI60 0bp)克隆与鉴定。方法 :采用RT PCR技术 ,从HL 6 0细胞mRNA中扩增编码BPIN端 199个氨基酸 (rBPI2 3)的基因片段 (BPI60 0bp) ,经酶切后通过连接反应构建重组克隆载体 ,测序鉴定。结果 :RT PCR获得预期的扩增产物—BPI60 0bp基因片段。成功构建PUC18 BPI180 、PUC18 BPI4 2 0 重组克隆载体 ,酶切、酶谱分析与预期结果相符。DNA测序结果与文献报道一致。结论 :PUC18 BPI180 、PUC18 BPI4 2 0 重组克隆载体构建成功 ;BPI60; 关键词 PUC18克隆载体 RT-PCR rBPI23基因; Keywords Recombinant bactericidal/permeability increasing protein-23 (rBPI_(23)) PUC18 cloning vector RT-PCR; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人IgG1FccDNA的克隆与鉴定: 7; 作者安云庆柯岩陈金栋; 机构首都医科大学微生物学和免疫学教研室; 出处《首都医科大学学报》 CAS 2000年第2期93-96,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目 !(395 70 6 6 6 ); 文摘根据编码人IgG1Fc(Fcγ1 )的基因序列 ,设计合成 1对与之相匹配的引物。采用RT PCR法 ,从正常人白细胞mRNA中扩增获得预期目的基因Fcγ1 70 0bp基因片段 ,成功构建PUC1 8 Fcγ1 70 0 重组克隆载体 ,酶切、酶谱分析与预期结果相符 ;DNA测序结果与GenBank报道一致。; 关键词 IgG1Fe(Fcγ1) RT-PCR 克隆鉴定; Keywords I_gG1Fc_gene(Fcγ1_(700bp)) PUC18-Fcγ1_(700) recombinant cloning vector RT-PCR; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] R392.1 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	BPI_(23)-Fcγ1重组蛋白原核表达载体的构建、表达和生物学活性的测定	安云庆柯岩杨贵贞	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2000	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人源性抗角蛋白单链抗体的构建及表达	张国民陈宇萍王刚刘玉峰	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	pBV-BPI600重组表达载体的构建及其在E.coli中的表达	安云庆刘箐柯岩沈海中	《首都医科大学学报》 CAS	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	AAV2-BF转染小鼠对MLD内毒素攻击的抵抗作用	关翔宇李晨李静吕喆彭智张国民李莉安云庆	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白scFv	张国民乔媛媛陈宇萍吕喆安云庆	《首都医科大学学报》 CAS	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	rBPI_(23)基因克隆与鉴定	柯岩安云庆杨贵贞	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	人IgG1FccDNA的克隆与鉴定	安云庆柯岩陈金栋	《首都医科大学学报》 CAS	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料