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α-突触核蛋白对大脑海马神经元NMDA受体影响的研究 被引量:1
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作者 陈予东 杨巍巍 +1 位作者 李昕 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第5期601-603,共3页
目的研究α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)对海马神经元N-甲基-D-天门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptors,NMDARs)功能的影响。方法采用全细胞膜片钳记录模式记录正常培养10~12 d左右的海马神经元和经α-Syn处理1 h的海... 目的研究α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)对海马神经元N-甲基-D-天门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptors,NMDARs)功能的影响。方法采用全细胞膜片钳记录模式记录正常培养10~12 d左右的海马神经元和经α-Syn处理1 h的海马神经元NMDA诱发电流。结果与正常培养10~12 d左右的海马神经元相比,经α-Syn处理的海马神经元NMDA诱发电流明显减小。结论α-Syn可减少海马神经元膜上NMDARs数量,并抑制NMDARs活性。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 NMDA受体 全细胞膜片钳
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脑卒中患者血浆中α-突触核蛋白及其寡聚体形成量变化的研究 被引量:4
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作者 陈予东 尹娜 +3 位作者 李昕 杨巍巍 李旭冉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第6期826-829,共4页
目的探讨脑卒中患者血浆中α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)含量的变化,以及血浆对α-Syn寡聚体形成的影响。方法收集2012年3月至5月首都医科大学宣武医院神经科诊断为脑卒中的住院患者50例,另收集年龄和性别与之相匹配的30例健康人... 目的探讨脑卒中患者血浆中α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)含量的变化,以及血浆对α-Syn寡聚体形成的影响。方法收集2012年3月至5月首都医科大学宣武医院神经科诊断为脑卒中的住院患者50例,另收集年龄和性别与之相匹配的30例健康人群为对照组。用ELISA法检测各组人群血浆中的α-Syn总量及寡聚体形成量。结果脑卒中患者血浆α-Syn总含量及寡聚体形成量较对照组均有显著增加。结论脑卒中患者血浆中α-Syn含量增高增强其寡聚体的形成。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 脑卒中 血浆
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抑制葡糖脑苷脂酶对多巴胺神经细胞内α-突触核蛋白寡聚体形成及细胞自噬功能的影响 被引量:1
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作者 刘光伟 尹娜 +3 位作者 弥娜 李昕 李尧华 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第6期820-825,共6页
目的研究抑制葡糖脑苷脂酶(glucocerebrosidase,GBA)活性对多巴胺神经细胞内α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成及自噬功能的影响。方法在培养MES23.5细胞外添加不同浓度的GBA活性抑制剂(conduritol-β-epoxide,CβE),观察GB... 目的研究抑制葡糖脑苷脂酶(glucocerebrosidase,GBA)活性对多巴胺神经细胞内α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成及自噬功能的影响。方法在培养MES23.5细胞外添加不同浓度的GBA活性抑制剂(conduritol-β-epoxide,CβE),观察GBA活性的变化,同时在细胞外添加α-Syn单体使其进入细胞内并孵育48 h。使用双抗体夹心ELISA方法测定细胞内α-Syn寡聚体含量,观察细胞自噬活性、氧化应激和凋亡。结果随着CβE质量浓度的增加,GBA活性呈质量浓度依赖性的下降,而细胞内α-Syn寡聚体的含量则呈质量浓度依赖性的增加;在CβE处理细胞,随着细胞外添加的α-Syn单体的质量浓度加大,自噬活性和氧化应激液增强,同时细胞凋亡数量增加。结论抑制GBA活性导致细胞内α-Syn寡聚体增多以及依赖于α-Syn浓度的自噬活性和氧化应激增强和细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 葡糖脑苷脂酶 α-突触核蛋白寡聚体 MES 23 5细胞 自噬
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食蟹猴上肢取食执行时间的随龄变化及其与^(99m)Tc-TRODAT-1摄取率的相关关系研究
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作者 岳峰 吴迪 +3 位作者 曾思恩 易德桥 张愚 陈彪 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第6期787-792,共6页
目的研究食蟹猴随年龄增长伴随的用上肢取食执行时间的变化及其与纹状体99mTc-TRODAT-1〔锝99-2β-[N,N'-双(2-巯乙基)乙撑二胺基]甲基,3β-(4-氯苯基)托烷〕摄取率之间的相关关系。方法选取4、10和15岁3个年龄组的健康食蟹猴共30只... 目的研究食蟹猴随年龄增长伴随的用上肢取食执行时间的变化及其与纹状体99mTc-TRODAT-1〔锝99-2β-[N,N'-双(2-巯乙基)乙撑二胺基]甲基,3β-(4-氯苯基)托烷〕摄取率之间的相关关系。方法选取4、10和15岁3个年龄组的健康食蟹猴共30只,利用改良的运动活动平板定量测定上肢取食执行时间,各年龄组分别选取4只动物用多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)配体99mTc-TRODAT-1结合的单光子发射体层摄影术(single-photon emission computed tomography,SPECT)显像观察脑内纹状体多巴胺转运体放射性摄取率(99mTc-TRODAT-1摄取率)的变化。结果随着年龄的增长,食蟹猴用上肢取食执行时间逐渐延长,纹状体99mTc-TRODAT-1放射性摄取率呈逐渐减低的趋势,直线回归分析结果显示食蟹猴上肢取食执行时间与年龄呈统计学相关关系,且与纹状体99mTc-TRODAT-1放射性摄取率亦呈统计学的相关关系。进一步的独立于年龄的部分相关分析表明年龄增长驱动2者的相关。结论正常食蟹猴随年龄增长脑内99mTc-TRODAT-1摄取率的减少是造成食蟹猴上肢取食执行时间延长的关键因素之一。 展开更多
关键词 运动功能 多巴胺 脑内纹状体多巴胺转逆体放射性摄取率 老化 单光子发射体层摄影术 灵长类
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表没食子儿茶素没食子酸酯对MPTP致多巴胺能神经元损伤的保护作用
5
作者 王涛 岳峰 +2 位作者 刘佳 左萍萍 陈彪 《中国康复理论与实践》 CSCD 2010年第10期913-915,F0003,共4页
目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法 32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术组腹腔注射等量生理盐水,模型组腹腔注射4次MPTP(16mg/kg,间... 目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法 32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术组腹腔注射等量生理盐水,模型组腹腔注射4次MPTP(16mg/kg,间隔2h),EGCG治疗组为MPTP+EGCG(5mg/kg)组,EGCG正常给药组不做任何处理,每日给予5mg/kgEGCG。连续给药3周后检测行为学指标,黑质酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化染色及高效液相色谱-电化学法测定纹状体内多巴胺及其代谢产物浓度。结果模型组5min内的自发运动次数(71.4±14.0)下降,而EGCG治疗组自发运动次数(87.9±10.7)提高(P<0.05)。与模型组转杆停留时间(73.5±24.9)s相比,EGCG治疗组转杆停留时间(118.6±31.2)s延长(P<0.05)。形态学结果显示,EGCG治疗组黑质TH阳性神经元与模型组相比,数量明显增多。模型组纹状体内多巴胺(DA)及其代谢产物3,4-双羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)浓度显著降低,而EGCG治疗组DA、DOPAC和HVA浓度虽有一定程度升高,但无统计学差异。结论 EGCG改善MPTP致帕金森病模型小鼠的运动能力下降,对黑质多巴胺神经元有保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 表没食子儿茶素没食子酸酯 神经保护 多巴胺
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α-突触核蛋白促进过氧化氢诱导的多巴胺能神经细胞凋亡 被引量:2
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作者 李瑛 刘光伟 +3 位作者 李昕 李尧华 杨慧 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第6期771-776,共6页
目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)在过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的多巴胺能神经细胞凋亡中的作用。方法通过瞬时转染重组质粒pEGFP-α-syn和pcDNA-α-syn到MES23.5多巴胺能神经细胞建立过表达α-syn细胞模型。细... 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)在过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的多巴胺能神经细胞凋亡中的作用。方法通过瞬时转染重组质粒pEGFP-α-syn和pcDNA-α-syn到MES23.5多巴胺能神经细胞建立过表达α-syn细胞模型。细胞外添加H2O2(200μmol/L)处理细胞。Hoechst 33258荧光标记细胞核及AO/PI(吖啶橙/碘化丙啶)双染检测细胞凋亡。Mitotracker线粒体探针标记线粒体。结果 H2O2可增加α-syn向线粒体和细胞核的转运;H2O2可单独引起细胞凋亡,但过表达α-syn细胞的凋亡率显著高于空载质粒转染细胞(P<0.05)。结论α-Syn增强了H2O2诱导的多巴胺能神经细胞凋亡。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 过氧化氢 凋亡
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中国人群pitx3基因多态性与晚发散发性帕金森病的相关研究 被引量:2
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作者 林庆玲 蔡彦宁 +3 位作者 丁晖 顾朱勤 马敬红 陈彪 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第6期764-766,共3页
目的分析pitx3基因多态性与晚发散发性帕金森病的遗传关联。方法使用连接酶检测反应(LDR)法,分析509例晚发散发性帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者和494例正常对照者中pitx3基因单核苷酸多态性(SNPs)位点rs2281983、rs4919621... 目的分析pitx3基因多态性与晚发散发性帕金森病的遗传关联。方法使用连接酶检测反应(LDR)法,分析509例晚发散发性帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者和494例正常对照者中pitx3基因单核苷酸多态性(SNPs)位点rs2281983、rs4919621和rs3758549。随机选取10%样品直接测序进行验证。结果 pitx3基因SNP位点rs2281983、rs4919621和rs3758549的基因频率在晚发散发性帕金森病患者和正常对照组间差异无统计学意义。3个SNP位点与晚发散发性PD无关联。结论中国人群中,pitx3不是晚发散发性帕金森病的易感因素。 展开更多
关键词 晚发散发性帕金森病 pitx3基因 单核苷酸多态性
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异柠檬酸脱氢酶1基因突变焦磷酸测序检测方法的建立 被引量:2
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作者 王丹慧 蔡彦宁 +2 位作者 张燕莉 高杰 杨彩侠 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第2期219-224,共6页
目的建立异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)基因突变的焦磷酸测序检测方法,确定该方法的检测灵敏度。分析焦磷酸测序法与直接测序法对于鉴定IDH1突变的差异。方法构建携带野生型和突变型IDH1基因的质粒,使用质粒优化焦... 目的建立异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)基因突变的焦磷酸测序检测方法,确定该方法的检测灵敏度。分析焦磷酸测序法与直接测序法对于鉴定IDH1突变的差异。方法构建携带野生型和突变型IDH1基因的质粒,使用质粒优化焦磷酸测序方法。使用已知比例的野生型和突变型质粒作为模版,确定突变的检测灵敏度。针对96例胶质瘤患者手术切除标本的基因组DNA,分别使用直接测序法和焦磷酸测序法,鉴定IDH1基因突变类型,并比较。结果使用焦磷酸测序能够检测到低至2%的IDH1突变。直接测序检出突变阳性率为32.3%、焦磷酸测序检出突变阳性率为74.0%。结论焦磷酸测序法检测IDH1基因突变灵敏可靠,适合临床分子诊断。 展开更多
关键词 异柠檬酸脱氢酶1 焦磷酸测序法 突变
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帕金森病患者血浆增强α-突触核蛋白寡聚体形成 被引量:11
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作者 尹娜 陈予东 +3 位作者 李昕 杨巍巍 李旭冉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第6期840-843,共4页
目的研究帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的影响。方法将重组人α-Syn加入PD和对照血浆中,37℃振荡孵育144 h,免疫印迹方法鉴定α-Syn寡聚体形成情况,ELISA方法分析α-Syn寡... 目的研究帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的影响。方法将重组人α-Syn加入PD和对照血浆中,37℃振荡孵育144 h,免疫印迹方法鉴定α-Syn寡聚体形成情况,ELISA方法分析α-Syn寡聚体形成的相对质量浓度。结果α-Syn在PD患者血浆中形成寡聚体含量明显高于对照组。结论 PD患者血浆可促进α-Syn寡聚体形成。 展开更多
关键词 帕金森病 血浆 Α-突触核蛋白 寡聚体
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一种检测帕金森患者血浆促进α-突触核蛋白寡聚体形成能力的方法 被引量:6
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作者 李昕 杨巍巍 +1 位作者 李雁 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第6期830-834,共5页
目的建立一种检测帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆促进外源性α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的方法。方法利用本室自制的鼠抗人α-Syn单克隆抗体建立检测α-Syn寡聚体的酶联免疫吸附测定(enzyme linked immun... 目的建立一种检测帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆促进外源性α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的方法。方法利用本室自制的鼠抗人α-Syn单克隆抗体建立检测α-Syn寡聚体的酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent,ELISA)方法。将不同质量浓度(200、100、50、25、12.5μmol/L)重组人α-Syn在正常人和PD患者血浆中分别振荡孵育(37℃、280 r/min)24、48、72、96 h。用所建立的ELISA法检测振荡后血浆中的α-Syn寡聚体含量。结果所建立ELISA方法可以特异性检测α-Syn寡聚体,不识别α-Syn单体。重组人α-Syn在质量浓度为100μmol/L、血浆稀释3倍以下、振荡孵育48h条件下可以在PD患者血浆中形成较多的寡聚体,并与对照血浆中形成的α-Syn寡聚体含量对比差异最大。结论成功建立了一种检测PD患者血浆促进α-Syn寡聚体形成能力的方法,该方法可以用于诊断PD患者血浆的潜在病理变化。 展开更多
关键词 帕金森病 Α-突触核蛋白 血浆 寡聚体
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寡聚化α-突触核蛋白在不同年龄段食蟹猴消化道中的表达 被引量:3
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作者 李昕 杨巍巍 +1 位作者 李旭冉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第5期592-595,共4页
目的研究寡聚化α-突触核蛋白(oligomer-α-synuclein,oligo-α-Syn)在不同年龄段食蟹猴消化道中的表达差异。方法 Western blotting和ELISA方法检测oligo-α-Syn在不同年龄段食蟹猴消化道中的表达。结果在老年食蟹猴的食管、胃底、十... 目的研究寡聚化α-突触核蛋白(oligomer-α-synuclein,oligo-α-Syn)在不同年龄段食蟹猴消化道中的表达差异。方法 Western blotting和ELISA方法检测oligo-α-Syn在不同年龄段食蟹猴消化道中的表达。结果在老年食蟹猴的食管、胃底、十二指肠、空肠、回肠和结肠中,寡聚化α-Syn浓度较青年与中年猴显著增加,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论食蟹猴消化道的各部位中α-Syn寡聚体表达具有增龄性变化。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 寡聚化α-突触核蛋白 消化道 食蟹猴
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启动子区E-box以及周围CpG岛的甲基化与基因节律性表达的关系 被引量:2
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作者 左晓虹 刘姝 +3 位作者 林庆玲 李宁 陈彪 蔡彦宁 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第6期781-786,共6页
目的探讨mPer2、mCry1和mDBP启动子区E-box以及周围CpG岛的甲基化是否影响E-box和BMAL1/CLOCK基因和蛋白相互作用的方式;以及启动子区的甲基化状态是否影响MAP激酶磷酸化酶1(MAP kinase phosphatise 1,MKP1)的组织特异性表达调控。方法... 目的探讨mPer2、mCry1和mDBP启动子区E-box以及周围CpG岛的甲基化是否影响E-box和BMAL1/CLOCK基因和蛋白相互作用的方式;以及启动子区的甲基化状态是否影响MAP激酶磷酸化酶1(MAP kinase phosphatise 1,MKP1)的组织特异性表达调控。方法分6个时间点取C57 BL/6J小鼠的肝脏和肾脏,提取DNA,通过重硫酸盐处理基因组DNA,以及测序检测E-box和周围CpG岛的甲基化状态。结果 mPer2、mCry1和mDBP启动子区E-box以及周围CpG岛无明显甲基化状态,肝脏和肾脏中MKP1的E-box以及周围CpG岛亦无明显甲基化状态。结论节律基因的启动子区E-box以及周围CpG岛的甲基化不参与节律基因表达的日节律性调控。 展开更多
关键词 时钟基因 E-BOX CPG岛 DNA甲基化
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帕金森病患者时钟基因启动子区甲基化分析 被引量:1
13
作者 林庆玲 蔡彦宁 +3 位作者 丁晖 顾朱勤 马敬红 陈彪 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第6期767-770,共4页
目的分析帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者和正常老年对照组时钟基因启动子区甲基化水平,探讨帕金森病患者时钟基因异常表达的机制。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)法,检测206例帕金森病患者和181例正常老年对照者的7种时钟基... 目的分析帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者和正常老年对照组时钟基因启动子区甲基化水平,探讨帕金森病患者时钟基因异常表达的机制。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)法,检测206例帕金森病患者和181例正常老年对照者的7种时钟基因启动子甲基化水平。结果 7种时钟基因中,cry1和npas2启动子区存在明显甲基化。另5种时钟基因启动子(per1、per2、cry2、clock、bmal1)未发现明显甲基化。PD患者中npas2甲基化频率明显下降。结论 PD患者时钟基因的异常表达可能与时钟基因启动子区甲基化的改变有关。 展开更多
关键词 帕金森病 启动子区甲基化 时钟基因
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α-突触核蛋白在人脑膜瘤组织中的表达
14
作者 吴杨 苏玉金 +3 位作者 李昕 刘光伟 李尧华 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第6期793-797,共5页
目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)在人脑膜瘤组织和对照脑组织中的表达及其与微管蛋白之间的关系。方法用抗人α-syn抗体对人脑膜瘤组织和对照脑组织进行免疫组织化学染色,观察、比较α-syn在脑膜瘤和对照脑组织中的表达和... 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)在人脑膜瘤组织和对照脑组织中的表达及其与微管蛋白之间的关系。方法用抗人α-syn抗体对人脑膜瘤组织和对照脑组织进行免疫组织化学染色,观察、比较α-syn在脑膜瘤和对照脑组织中的表达和分布。用免疫荧光组织化学方法检测α-syn和β-微管蛋白以及突触素是否共存。结果对照脑组织中,α-syn主要存在于神经元的末梢和胞质部分,分别与突触素和β-微管蛋白共存。人脑膜瘤组织中,α-syn主要存在于肿瘤细胞的胞质,并且与β-微管蛋白在胞质共存,少部分存在于细胞核中。结论α-syn存在于脑膜瘤细胞的胞质和核中,并与β-微管蛋白在胞质中共存。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 Β-微管蛋白 脑膜瘤
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