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高效液相色谱法测定睡眠剥夺大鼠松果体内褪黑素含量
被引量：
1
1
作者
吴燕川
魏海峰
+1 位作者
叶翠飞
何士大
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2009年第3期399-401,共3页
关键词
高效液相色谱法
褪黑素
松果体
睡眠剥夺
体内
大鼠
测定
N-乙酰基
在线阅读
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职称材料
6-OHDA诱导过表达nurr1基因的SK-N-SH细胞凋亡
2
作者
刘扬
赵咏梅
+2 位作者
张海燕
李卫红
岳云
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2011年第4期525-533,共9页
目的比较自身不表达核相关受体因子(nuclear receptor related factor1,Nurr1)基因的人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH和过表达外源性nurr1基因的SK-N-SH/Nurr1细胞对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)的损伤反应,探讨nurr1基因在6-O...
目的比较自身不表达核相关受体因子(nuclear receptor related factor1,Nurr1)基因的人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH和过表达外源性nurr1基因的SK-N-SH/Nurr1细胞对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)的损伤反应,探讨nurr1基因在6-OHDA致细胞损害(死亡或凋亡)中的作用。方法用免疫细胞化学方法和RT-PCR检测基因转染细胞SK-N-SH/NURR1的nurr1蛋白及NURR1 mRNA的表达。细胞经不同浓度6-OHDA(50～100μmol/L)作用不同时间(6、12 h),经AnnexinV/PI双染后流式细胞术(flow cytometry,FCM)测定早期细胞凋亡比例。细胞经75μmol/L 6-OHDA作用12 h,通过透射电镜(transmission electronmicroscopy,TEM)观察细胞超微结构变化。用Western blotting方法检测75μmol/L6-OHDA作用6、12 h,细胞凋亡因子Caspase-3活性前体蛋白的表达水平。结果免疫细胞化学染色结果显示,基因转染细胞SK-N-SH/Nurr1表达NURR1蛋白;经RT-PCR检测,基因转染细胞表达NURR1 mRNA,说明外源性nurr1基因在转染细胞内过表达。FCM检测结果显示,75μmol/L 6-OHDA作用12 h,SK-N-SH/Nurr1细胞凋亡比例明显高于SK-N-SH细胞(P=0.000),而100μmol/L6-OHDA作用6、12 h后,2株细胞均表现为毒性损伤。TEM显示,75μmol/L6-OHDA作用12 h后,部分SK-N-SH/Nurr1细胞出现了典型凋亡改变,而SK-N-SH细胞主要表现为毒性损伤。4.75μmol/L6-OHDA作用6、12 h,SK-N-SH/Nurr1细胞Caspase-3活性前体蛋白表达显著下降(P=0.000),而SK-N-SH细胞Caspase-3活性前体蛋白表达变化不明显。结论外源性nurr1基因过表达促进6-OHDA诱导的SK-N-SH/Nurr1细胞凋亡,在低剂量(≤75μmol/L)时,凋亡比例与剂量呈正相关,高剂量时6-OHDA主要诱导细胞毒性损伤。
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关键词
核相关受体因子
过表达
6-羟基多巴胺
凋亡
流式细胞术
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职称材料
高效液相色谱法测定大鼠血浆腺苷浓度
3
作者
吴燕川
冯秀丽
+1 位作者
邢秀荣
何士大
《首都医科大学学报》
CAS
2007年第5期664-665,共2页
关键词
高效液相色谱法
腺苷水平
大鼠血浆
测定方
冠状动脉血流量
二极管矩阵检测器
浓度
心血管效应
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职称材料
题名
高效液相色谱法测定睡眠剥夺大鼠松果体内褪黑素含量
被引量：
1
1
作者
吴燕川
魏海峰
叶翠飞
何士大
机构
首都医科大学宣武医院中心实验室教育部神经变性病重点实验室
首都医科大学宣武医院
药物研究室
出处
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2009年第3期399-401,共3页
基金
国家自然科学基金(30772288)资助项目~~
关键词
高效液相色谱法
褪黑素
松果体
睡眠剥夺
体内
大鼠
测定
N-乙酰基
分类号
R286.0 [医药卫生—中药学]
R977.1 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
6-OHDA诱导过表达nurr1基因的SK-N-SH细胞凋亡
2
作者
刘扬
赵咏梅
张海燕
李卫红
岳云
机构
首都医科大学
北京朝阳
医院
麻醉科
首都医科大学宣武医院中心实验室教育部神经变性病重点实验室
首都医科大学
细胞生物学教研室
出处
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2011年第4期525-533,共9页
基金
国家自然科学基金项目(30270433)~~
文摘
目的比较自身不表达核相关受体因子(nuclear receptor related factor1,Nurr1)基因的人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH和过表达外源性nurr1基因的SK-N-SH/Nurr1细胞对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)的损伤反应,探讨nurr1基因在6-OHDA致细胞损害(死亡或凋亡)中的作用。方法用免疫细胞化学方法和RT-PCR检测基因转染细胞SK-N-SH/NURR1的nurr1蛋白及NURR1 mRNA的表达。细胞经不同浓度6-OHDA(50～100μmol/L)作用不同时间(6、12 h),经AnnexinV/PI双染后流式细胞术(flow cytometry,FCM)测定早期细胞凋亡比例。细胞经75μmol/L 6-OHDA作用12 h,通过透射电镜(transmission electronmicroscopy,TEM)观察细胞超微结构变化。用Western blotting方法检测75μmol/L6-OHDA作用6、12 h,细胞凋亡因子Caspase-3活性前体蛋白的表达水平。结果免疫细胞化学染色结果显示,基因转染细胞SK-N-SH/Nurr1表达NURR1蛋白;经RT-PCR检测,基因转染细胞表达NURR1 mRNA,说明外源性nurr1基因在转染细胞内过表达。FCM检测结果显示,75μmol/L 6-OHDA作用12 h,SK-N-SH/Nurr1细胞凋亡比例明显高于SK-N-SH细胞(P=0.000),而100μmol/L6-OHDA作用6、12 h后,2株细胞均表现为毒性损伤。TEM显示,75μmol/L6-OHDA作用12 h后,部分SK-N-SH/Nurr1细胞出现了典型凋亡改变,而SK-N-SH细胞主要表现为毒性损伤。4.75μmol/L6-OHDA作用6、12 h,SK-N-SH/Nurr1细胞Caspase-3活性前体蛋白表达显著下降(P=0.000),而SK-N-SH细胞Caspase-3活性前体蛋白表达变化不明显。结论外源性nurr1基因过表达促进6-OHDA诱导的SK-N-SH/Nurr1细胞凋亡,在低剂量(≤75μmol/L)时,凋亡比例与剂量呈正相关,高剂量时6-OHDA主要诱导细胞毒性损伤。
关键词
核相关受体因子
过表达
6-羟基多巴胺
凋亡
流式细胞术
Keywords
nuclear receptor related factor1
overexpression
6-hydroxydopamine
apoptosis
flow cytometry
分类号
R332.8 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
高效液相色谱法测定大鼠血浆腺苷浓度
3
作者
吴燕川
冯秀丽
邢秀荣
何士大
机构
首都医科大学宣武医院
中心实验室
教育部
神经
变
性病
学
重点
实验室
国家人类基因组北方研究
中心
首都医科大学宣武医院
急诊科
出处
《首都医科大学学报》
CAS
2007年第5期664-665,共2页
关键词
高效液相色谱法
腺苷水平
大鼠血浆
测定方
冠状动脉血流量
二极管矩阵检测器
浓度
心血管效应
分类号
R286.0 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高效液相色谱法测定睡眠剥夺大鼠松果体内褪黑素含量
吴燕川
魏海峰
叶翠飞
何士大
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2009
1
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职称材料
2
6-OHDA诱导过表达nurr1基因的SK-N-SH细胞凋亡
刘扬
赵咏梅
张海燕
李卫红
岳云
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2011
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
高效液相色谱法测定大鼠血浆腺苷浓度
吴燕川
冯秀丽
邢秀荣
何士大
《首都医科大学学报》
CAS
2007
0
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职称材料
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