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实时定量PCR检测氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721中CHOP和GRP78 mRNA表达的影响 被引量:3
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作者 刘颖 孙世龙 +7 位作者 刘晓梅 杜海英 李鹏 杜忠君 孙磊 李阳 徐艳玲 孙志伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期847-850,共4页
目的:观察氯化镉(CdCl2)处理人肝癌SMMC-7721细胞系中CHOP和GRP78mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨氯化镉对肝癌细胞内质网应激的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721细胞为研究模型,细胞暴露于氯化镉浓度为0、5、10、20、30及40μmol... 目的:观察氯化镉(CdCl2)处理人肝癌SMMC-7721细胞系中CHOP和GRP78mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨氯化镉对肝癌细胞内质网应激的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721细胞为研究模型,细胞暴露于氯化镉浓度为0、5、10、20、30及40μmol·L-1的培养液中24h,0μmol·L-1组为对照组。采用SYBR荧光实时定量PCR法检测CHOP和GRP78mRNA表达,相对定量采用比较CT值法。结果:随着氯化镉剂量的增加,CHOPmRNA表达水平有逐渐增多的趋势,各组mRNA表达均高于对照组,其中10、20和40μmol·L-1组与对照组比较差异有显著性(P<0.05);GRP78mRNA表达有逐渐增多的趋势,各组mRNA表达均高于对照组,其中5、20和40μmol·L-1组与对照组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:氯化镉可诱导人肝癌SMMC-7721细胞中CHOP和GRP78mRNA表达增多。 展开更多
关键词 氯化镉 SMMC 7721 CHOP 葡萄糖调节蛋白78
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CaN抑制剂对H2O2诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 冯星 金明华 +3 位作者 刘晓梅 孙磊 杜海英 孙志伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期249-253,共5页
目的:探讨过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡以及钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂他罗利姆(FK506)对细胞的保护作用,为心肌缺血/再灌注所致的心肌损伤及拮抗机制提供实验依据。方法:将大鼠H9c2心肌细胞株体外培养进行实验,实验分为... 目的:探讨过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡以及钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂他罗利姆(FK506)对细胞的保护作用,为心肌缺血/再灌注所致的心肌损伤及拮抗机制提供实验依据。方法:将大鼠H9c2心肌细胞株体外培养进行实验,实验分为正常对照组(n=6)和H2O2各处理组(n=6)。正常对照组采用生理盐水,实验各组分别用50、100、200和400μmol·L-1H2O2处理1、6和24h后,用罗丹明(Rhodamme-123)荧光探针检测心肌细胞线粒体膜电位(Δψmt)变化,用Annexin-Ⅴ/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;并采用100μmol·L-1H2O2处理6h建立大鼠心肌细胞凋亡的损伤模型,给予高、低剂量FK506(0.60和0.15μmol·L-1)干预,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率。结果:①100、200和400μmol·L-1H2O2处理组1h时线粒体膜电位均较对照组显著升高(P<0.01),6和24h时,200和400μmol·L-1组Δψmt值均低于100μmol·L-1组(P<0.05),且400μmol·L-1组低于200μmol·L-1组(P<0.05);②200和400μmol.L-1H2O2处理组1h时心肌细胞凋亡率和坏死率均较对照组显著增加(P<0.05),24h达高峰。③高、低剂量FK506干预组与单纯100μmol·L-1H2O2处理组比较,心肌细胞凋亡率均明显降低(P<0.01),高、低剂量组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:H2O2可损伤心肌细胞线粒体,引起线粒体膜电位下降,导致细胞凋亡。CaN抑制剂对H2O2诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡具有保护作用。 展开更多
关键词 过氧化氢 钙调神经磷酸酶 细胞凋亡 膜电位 线粒体 他罗利姆
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苯通过激活线粒体凋亡通路对小鼠骨髓细胞凋亡的诱导作用及其机制 被引量:2
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作者 于光艳 宋祥福 +2 位作者 赵淑华 刘晓梅 孙志伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期943-946,I0002,共5页
目的:建立小鼠吸入气态苯染毒模型,探讨苯对骨髓细胞凋亡的诱导作用和机制,为苯骨髓毒作用机制的研究提供实验依据。方法:将24只雄性小鼠随机分为对照组和低、中、高剂量苯染毒组(染毒剂量分别为400、800和1 600mg·m-3),每组6只。... 目的:建立小鼠吸入气态苯染毒模型,探讨苯对骨髓细胞凋亡的诱导作用和机制,为苯骨髓毒作用机制的研究提供实验依据。方法:将24只雄性小鼠随机分为对照组和低、中、高剂量苯染毒组(染毒剂量分别为400、800和1 600mg·m-3),每组6只。各剂量苯染毒组小鼠进行静式染毒,每天2h,连续染毒15d后将各组小鼠全部处死,HE染色后光镜下观察各组小鼠骨髓细胞的病理学改变,流式细胞仪测定各组小鼠骨髓细胞凋亡率及线粒体膜电位,免疫组织化学法测定各组小鼠线粒体凋亡途径中相关基因蛋白的表达。结果:低、中和高剂量苯染毒组小鼠骨髓边缘及中央处细胞数明显减少,高剂量苯染毒组小鼠骨髓还伴有大量的血窦扩张。中和高剂量苯染毒组细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(Ρ<0.01),且高剂量苯染毒组与低和中剂量苯染毒组比较差异也有统计学意义(Ρ<0.05)。低、中和高剂量苯染毒组小鼠骨髓细胞线粒体膜电位随着染毒剂量的增加明显降低,中和高剂量苯染毒组与对照组比较差异有统计学意义(Ρ<0.05或P<0.01)。不同剂量苯染毒组Bax、CytC及中、高剂量苯染毒组Caspases-9、Caspases-3阳性细胞数随染毒剂量的增加显著升高,与对照组比较差异均有统计学意义(Ρ<0.05);而各剂量苯染毒组Bcl-2阳性细胞数则明显低于对照组(Ρ<0.05),且中和高剂量苯染毒组与低剂量苯染毒组比较差异也有统计学意义(Ρ<0.05)。结论:一定剂量的苯可以诱导小鼠骨髓细胞发生凋亡,促进线粒体凋亡相关基因蛋白的表达。通过线粒体凋亡通路诱导的细胞凋亡可能是苯骨髓毒性的重要机制之一。 展开更多
关键词 细胞凋亡 线粒体膜电位 凋亡基因蛋白
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纳米SiO_2粒子特性及其在无细胞体系中氧化能力的检测及意义 被引量:1
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作者 王雯 Oberdrster Gnter +4 位作者 刘晓梅 孙磊 杜忠君 杨文胜 孙志伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期242-245,共4页
目的:检测纳米SiO2粒子的特性及其在无细胞体系中的氧化能力,为医用纳米SiO2粒子体内外毒性的预测提供依据。方法:用透射电镜观测2种纳米SiO2粒子粒径、分散性、形状;用Zeta电位粒度分析仪检测纳米粒子在不同介质(纯水、生理盐水、10%Tw... 目的:检测纳米SiO2粒子的特性及其在无细胞体系中的氧化能力,为医用纳米SiO2粒子体内外毒性的预测提供依据。方法:用透射电镜观测2种纳米SiO2粒子粒径、分散性、形状;用Zeta电位粒度分析仪检测纳米粒子在不同介质(纯水、生理盐水、10%Tween80溶液、RPMI1640培养液、含1%胎牛血清的RPMI1640细胞培养液,超声30s)溶液及不同时间(0、24、48和72h)的粒径分布及团聚状态;用DDCFH-DA法F检测粒子在无细胞体系中自发产生自由基的能力。结果:电镜结果显示,2种纳米SiO2粒子均呈球形,大小一致,分布均匀、分散性好,粒子平均粒径分别为(43.0±4.2)和(68.0±5.7)nm;在纯水、生理盐水、10%Tween80溶液、RPMI1640培养液及含1%胎牛血清的RPMI1640细胞培养液中,Si-43nm及Si-68nm粒子粒径变化很大,其中在生理盐水中的粒径最接近电镜结果,为74.0和96.7nm。超声30s后0、24、48和72h时,Si-43nm及Si-68nm粒子粒径在生理盐水中不发生团聚;在含1%胎牛血清的RPMI1640细胞培养液中发生团聚,形成相似大小的团聚体;在30~100μg的质量范围内,2种粒子自发产生自由基的能力相似但很弱,相当于2.5μmol.L-1左右H2O2当量。结论:一定粒径的纳米SiO2在细胞培养液中形成大粒径团聚体,粒子自身只有较弱的自发产生自由基的能力。 展开更多
关键词 纳米SIO2 团聚体 无细胞体系 自由基
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实时定量PCR检测镉对人肝癌细胞SMMC-7721中TRPC1和TRPC4 mRNA表达的影响
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作者 刘颖 孙世龙 +5 位作者 刘晓梅 杜海英 金明华 李鹏 凌翎 孙志伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期584-586,共3页
目的:观察氯化镉(CdCl2)处理后人肝癌SMMC-7721细胞中TRPC1和TRPC4 mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨镉对肝癌细胞钙通道的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究模型,细胞暴露于氯化镉终浓度为0、5、10、20、30及40μmol.L-1的培养液... 目的:观察氯化镉(CdCl2)处理后人肝癌SMMC-7721细胞中TRPC1和TRPC4 mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨镉对肝癌细胞钙通道的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究模型,细胞暴露于氯化镉终浓度为0、5、10、20、30及40μmol.L-1的培养液中24 h。采用SYBR荧光实时定量PCR法检测TRPC1和TRPC4 mRNA表达,相对定量采用比较CT值法。结果:随着剂量的增加,TRPC1 mRNA表达有降低的趋势,除20μmol.L-1组外,各组mRNA表达均高于对照组(P<0.01);TRPC4 mRNA表达有先增高后降低的趋势,5、10和30μmol.L-1组mRNA表达均高于对照组(P<0.01)。2个基因均在低剂量(5和10μmol.L-1)组表达增加幅度较大(P<0.01)。结论:低剂量镉可显著增加人肝癌SMMC-7721细胞中TRPC1和TRPC4的表达,镉可在mRNA水平对SMMC-7721细胞钙通道产生影响。 展开更多
关键词 SMMC-7721 TRPC1 TRPC4
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