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优化人脐血间充质干细胞方法的建立 被引量：2
1
作者 孙海梅 杨姝 +3 位作者 吴波 孙婷怡 周德山 季凤清 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第4期617-621,共5页
人脐带血（human umbilical cord blood， HUCB）是胎儿出生时脐带内及胎盘近胎儿一侧血管内的血液，已有研究证明人脐血中含有丰富的造血干细胞及间充质干细胞（mesenchymal stem cells， MSCs）。人脐血间充质干细胞（cord blood-mese... 人脐带血（human umbilical cord blood， HUCB）是胎儿出生时脐带内及胎盘近胎儿一侧血管内的血液，已有研究证明人脐血中含有丰富的造血干细胞及间充质干细胞（mesenchymal stem cells， MSCs）。人脐血间充质干细胞（cord blood-mesenchymal stem cells，CB-MSCs）其形态和生物学特点与骨髓MSCs极为相似，同样具有自我更新和多向分化的潜能，在一定的实验条件下可以分化为骨、脂肪、肌肉，甚至可以跨胚层分化为神经样细胞 ，这就为细胞移植提供了一种新的种子细胞来源。 展开更多
关键词 脐血间充质干细胞 人脐血 干细胞方法 CELLS 优化 多向分化 人脐带血 MSCS
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β淀粉样蛋白对培养海马神经元NMDA受体亚单位磷酸化及其亚细胞定位的影响 被引量：2
2
作者 张亚丽 常丽荣 +4 位作者 宋一志 吕昂初 高香红 李彦 武艳 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期479-483,共5页
目的:探讨在β淀粉样蛋白(Aβ)突触毒性作用下,N-甲基-D-天(门)冬氨酸受体(NMDA)受体亚单位的磷酸化状态及其在细胞不同部位的表达与分布,推测其所诱导突触功能紊乱的作用机制。方法:原代培养的大鼠海马神经元加入Aβ(10μmol/L)1 h后,... 目的:探讨在β淀粉样蛋白(Aβ)突触毒性作用下,N-甲基-D-天(门)冬氨酸受体(NMDA)受体亚单位的磷酸化状态及其在细胞不同部位的表达与分布,推测其所诱导突触功能紊乱的作用机制。方法:原代培养的大鼠海马神经元加入Aβ(10μmol/L)1 h后,免疫荧光检测加药组和对照组近胞体段10μm树突上PY1325NR2A和PY1472 NR2B总表达量及突触内表达量的变化。结果:Aβ作用1 h后与对照组比较,PY1325 NR2A及PY1472 NR2B表达量均显著减少;突触内PY1325 NR2A的表达量显著增加,而PY1472 NR2B表达量没有明显变化。结论:NMDA受体亚单位的磷酸化参与Aβ的突触毒性作用,提示磷酸化后的NR2A、NR2B功能可能发生变化,即NR2A可能由保护作用变为毒性作用,而NR2B则相反。 展开更多
关键词 Β淀粉样蛋白 NMDA受体 磷酸化 亚细胞定位 AD
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星形胶质细胞对β-淀粉样蛋白诱导神经元凋亡的影响 被引量：1
3
作者 宋一志 高香红 +3 位作者 常丽荣 张亚丽 陆涛 武艳 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期108-114,共7页
目的:于大鼠海马原代培养的细胞模型中明确星形胶质细胞(Astrocytes,AS)在β-淀粉样蛋白(Am-yloid-β,Aβ)诱导的神经元凋亡中是否发挥作用,以及其发挥作用的主要方式。方法:建立4天龄Wistar大鼠海马原代混合培养体系(MIX-S)、纯化原代A... 目的:于大鼠海马原代培养的细胞模型中明确星形胶质细胞(Astrocytes,AS)在β-淀粉样蛋白(Am-yloid-β,Aβ)诱导的神经元凋亡中是否发挥作用,以及其发挥作用的主要方式。方法:建立4天龄Wistar大鼠海马原代混合培养体系(MIX-S)、纯化原代AS培养体系(AS-S)及纯化原代神经元培养体系(NE-S),用Aβ处理三种不同体系细胞,24 h后收集三种培养液(MNE-Aβ24 h、MAS-Aβ24 h、MMIX-Aβ24 h)及control组三种培养液(MNE-control、MAS-control、MMix-control)。在下一批NE-S和MIX-S培养细胞中,分别用不同培养液或Aβ处理24 h后应用TUNEL法检测细胞凋亡数量的变化。结果:Aβ处理后NE-S凋亡比例显著高于MIX-S,其中MIX-S凋亡与control组相近,MIX-S表现出较弱的Aβ毒性易感性。比较Aβ处理24 h后收集的培养液(MAβ24 h,Aβ前处理)与对照组培养液(Mcontrol)再加Aβ处理(Aβ后处理)培养细胞,发现Aβ前处理(MNE-Aβ24 h、MAS-Aβ24 h)比Aβ后处理(MNE-control、MAS-control再加Aβ)诱导NE-S凋亡的效果更加显著。而Aβ前、后处理对MIX-S组神经元诱导凋亡的效果类似,接近Control组凋亡比例。结论:AS参与保护Aβ诱导的海马神经元凋亡,其保护作用依赖于AS与神经元构建的MIX-S完整性而并不是由AS分泌入培养液的成分介导。单纯AS-S在Aβ刺激下不仅失去保护功能,且释放促凋亡物质。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 AΒ 海马 凋亡 大鼠
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星形胶质细胞对天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶介导β淀粉样蛋白早期突触毒性作用的影响
4
作者 吕昂初 宋一志 +6 位作者 张亚丽 李彦 方圆 陆涛 刘津平 常丽荣 武艳 《中国卒中杂志》 2015年第3期225-230,共6页
目的探讨星形胶质细胞(astrocyte,AS)对天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)介导β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)早期突触毒性作用的影响,以期为进一步研究与血管性痴呆(vascular dementia,Va... 目的探讨星形胶质细胞(astrocyte,AS)对天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)介导β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)早期突触毒性作用的影响,以期为进一步研究与血管性痴呆(vascular dementia,Va D)的发病机制奠定基础。方法以原代培养大鼠海马纯神经元体系(NE-S)及混合培养体系(MIX-S,主要包含神经元及AS)为研究对象,各体系分为6组:对照组、caspase-8抑制剂组、caspase-9抑制剂组、Aβ处理组、caspase-8抑制剂预处理加Aβ组和caspase-9抑制剂预处理加Aβ组。免疫荧光检测各组近胞体10μm段树突中突触后密度蛋白(postsynaptic density-95,PSD95)表达量的变化。结果 1在NE-S与MIX-S中,与对照组相比,caspase-8抑制剂组、caspase-9抑制剂组PSD95的表达量均无明显差异,Aβ处理组PSD95的表达量均显著降低(P均<0.001)。2在NE-S中,与Aβ处理组相比,caspase-9抑制剂预处理加Aβ组PSD95的表达量显著回升至对照组水平,caspase-8抑制剂预处理加Aβ组则无显著改变;在MIX-S中的结果则相反,即caspase-8抑制剂预处理加Aβ组PSD95的表达量显著回升至对照组水平,而caspase-9抑制剂预处理加Aβ组则无显著改变。3MIX-S与NE-S两种培养系统间相比较,对照组间及Aβ处理组间PSD95的表达量均无显著差异,而caspase-8抑制剂预处理加Aβ组间及caspase-9抑制剂预处理加Aβ组间PSD95的表达量差异有显著性。结论在Aβ早期突触毒性作用中,AS参与caspase-8介导的死亡受体通路激活过程,且参与抑制神经元的线粒体通路。 展开更多
关键词 血管性痴呆 星形胶质细胞 Β淀粉样蛋白 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 突触
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