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题名乙醛脱氢酶高产菌株的筛选及其酶学性质
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作者
汪冉
彭政
张娟
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机构
江南大学生物工程学院
工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)/未来食品科学中心
食品合成生物技术教育部工程研究中心(江南大学)/江苏省食品合成生物技术工程研究中心
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期38-45,共8页
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基金
国家重点研发计划项目(2019YFC1605800)。
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文摘
乙醛广泛存在于食品和环境中,具有高毒性、诱变性和致癌性,对人类健康有很大的危害。乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase, ALDH)能催化多种脂肪族和芳香族的醛类转化为相应的酸,以此降低醛类物质特别是乙醛对人体的危害。以葡萄为材料,通过双硫仑抗性筛选结合酶活性测定获得1株高产ALDH的菌株,并研究了该菌株产的ALDH乙醛降解能力及酶学性质。利用形态学特征及ITS rRNA基因序列的测定与分析对其种属进行鉴定。根据NADH在340 nm的吸光值变化量计算出ALDH活性,并通过顶空气相色谱测定其乙醛降解能力。鉴定菌株为热带假丝酵母,命名为Candida tropicalis LBBE-W1。采用超声波破碎法提取菌株LBBE-W1的粗酶液,随后分离纯化得到乙醛脱氢酶(Candida tropicalis acetaldehyde dehydrogenase, CTALDH),比酶活力为181.17 U/mg。CTALDH的最适反应温度为60℃,最适反应pH为8.0~9.0,在30~60℃和pH 5.0~9.0下处理2 h显示较好的稳定性。Na+、K+、Ba2+金属离子对CTALDH的活性具有明显促进作用;Ni2+、Cu2+、Mn2+对CTALDH具有较强的抑制作用。CTALDH的底物特异性研究表明,乙醛是其最适底物。CTALDH在2 h内对乙醛的降解率达到95.12%。通过研究获得了1株C.tropicalis LBBE-W1菌株,其产生的ALDH具有较高活性、稳定性和乙醛降解能力,为食品和环境中的乙醛降解提供了可能。
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关键词
乙醛脱氢酶
热带假丝酵母
筛选
蛋白纯化
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Keywords
acetaldehyde dehydrogenase
Candida tropicalis
screening
protein purification
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分类号
TQ925
[轻工技术与工程—发酵工程]
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