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人骨髓间充质干细胞体外培养及鉴定
被引量：
12
1
作者
梁雪
粟永萍
+5 位作者
孔佩艳
陈幸华
彭贤贵
徐辉
曾东风
艾国平
《医学研究生学报》
CAS
2007年第5期459-462,466,I0001,共6页
目的:体外分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞(hBMSC)。方法:利用密度梯度离心法分离出人骨髓单个核细胞(MNC),通过贴壁筛选法建立hBMSC的体外培养体系,并通过一系列检测方法对所培养的细胞进行鉴定。结果:细胞主要呈“成纤维样”,但...
目的:体外分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞(hBMSC)。方法:利用密度梯度离心法分离出人骨髓单个核细胞(MNC),通过贴壁筛选法建立hBMSC的体外培养体系,并通过一系列检测方法对所培养的细胞进行鉴定。结果:细胞主要呈“成纤维样”,但体积较大、形状不规则、细胞质突起多,细胞核大而疏松,核仁明显。流式细胞仪检测:CD34阳性率为2.09%、CD29阳性率为94.46%;CD54及CD105表达阳性。细胞周期及透射电镜检测提示细胞处于相对原始状态。免疫细胞化学染色显示:CD14、CD45、胶原蛋白Ⅱ呈阴性;CD106、CD166、纤维连接蛋白、波形蛋白及胶原纤维酸性蛋白呈阳性。细胞化学染色:糖原染色呈强阳性;碱性磷酸酶染色呈阴性。通过诱导分化培养可诱导出成骨细胞。结论:成功建立了稳定的hBMSC体外培养体系,按照此培养体系进行培养可获得hBMSC。hBMSC可传代培养,但在培养过程中细胞逐渐出现老化现象,且不能冻存。
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关键词
人骨髓间充质干细胞
造血微环境
细胞培养
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题名
人骨髓间充质干细胞体外培养及鉴定
被引量：
12
1
作者
梁雪
粟永萍
孔佩艳
陈幸华
彭贤贵
徐辉
曾东风
艾国平
机构
第三军医大学附属新桥医院血液科
预防医学院解放军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室
出处
《医学研究生学报》
CAS
2007年第5期459-462,466,I0001,共6页
基金
创伤烧伤复合伤国家重点实验室开放基金课题资助项目(批准号:2003)
文摘
目的:体外分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞(hBMSC)。方法:利用密度梯度离心法分离出人骨髓单个核细胞(MNC),通过贴壁筛选法建立hBMSC的体外培养体系,并通过一系列检测方法对所培养的细胞进行鉴定。结果:细胞主要呈“成纤维样”,但体积较大、形状不规则、细胞质突起多,细胞核大而疏松,核仁明显。流式细胞仪检测:CD34阳性率为2.09%、CD29阳性率为94.46%;CD54及CD105表达阳性。细胞周期及透射电镜检测提示细胞处于相对原始状态。免疫细胞化学染色显示:CD14、CD45、胶原蛋白Ⅱ呈阴性;CD106、CD166、纤维连接蛋白、波形蛋白及胶原纤维酸性蛋白呈阳性。细胞化学染色:糖原染色呈强阳性;碱性磷酸酶染色呈阴性。通过诱导分化培养可诱导出成骨细胞。结论:成功建立了稳定的hBMSC体外培养体系,按照此培养体系进行培养可获得hBMSC。hBMSC可传代培养,但在培养过程中细胞逐渐出现老化现象,且不能冻存。
关键词
人骨髓间充质干细胞
造血微环境
细胞培养
Keywords
Human bone marrow mesenchymal stem cells
Hematopoietic inductive microenvironment
Cell culture
分类号
Q813.11 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人骨髓间充质干细胞体外培养及鉴定
梁雪
粟永萍
孔佩艳
陈幸华
彭贤贵
徐辉
曾东风
艾国平
《医学研究生学报》
CAS
2007
12
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