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福建梅花山圈养华南虎幼虎与成年虎肠道菌群结构的比较研究 被引量:4
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作者 孙艳发 张敏 +10 位作者 陈腾腾 傅文源 许卫华 吴琼 李焰 朱雨婷 张雪梅 刘灵宇 陈东虹 林开雄 林炜明 《野生动物学报》 北大核心 2020年第4期912-918,共7页
通过对华南虎3只幼虎和5只成年虎粪便微生物16S rRNA基因V4区域进行高通量测序,分析华南虎幼虎和成年虎肠道菌群组成和差异。结果表明,8份样品共检测到501个OTUs,包含17个门和176个属。华南虎幼虎肠道细菌物种Beta多样性显著高于成年虎(... 通过对华南虎3只幼虎和5只成年虎粪便微生物16S rRNA基因V4区域进行高通量测序,分析华南虎幼虎和成年虎肠道菌群组成和差异。结果表明,8份样品共检测到501个OTUs,包含17个门和176个属。华南虎幼虎肠道细菌物种Beta多样性显著高于成年虎(P<0.05)。幼虎肠道梭菌纲(Clostridia)、梭菌目(Clostridiales)、梭菌科(Clostridiales)、梭菌属(Clostridiales)、消化链球菌科(Peptostreptococcaceae)以及Lachnoclostridium属细菌丰度显著低于成年虎(P<0.05)。华南虎幼虎与成年虎肠道细菌组成上在纲、目、科、属水平上存在差异显著物种(LDA score>4)。幼虎与成年虎肠道菌群组成的多样性与差异,可为不同年龄阶段华南虎的食物选择提供理论依据。 展开更多
关键词 华南虎 肠道菌群 16S rRNA 高通量测序
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千里光菲灵碱诱导MEK/ERK1/2介导的宫颈癌细胞自噬效应 被引量:7
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作者 马景蕃 张燕 +2 位作者 叶甘萍 韦启良 邱龙新 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期616-623,共8页
探讨千里光菲灵碱对人宫颈癌He La、Caski细胞增殖、自噬的影响及其可能的作用机制。MTT法检测千里光菲灵碱对He La、Caski细胞增殖的影响;免疫荧光法检测GFP-LC3/He La和GFP-LC3/Caski两种细胞内自噬体的形成情况;免疫印迹法检测千里... 探讨千里光菲灵碱对人宫颈癌He La、Caski细胞增殖、自噬的影响及其可能的作用机制。MTT法检测千里光菲灵碱对He La、Caski细胞增殖的影响;免疫荧光法检测GFP-LC3/He La和GFP-LC3/Caski两种细胞内自噬体的形成情况;免疫印迹法检测千里光菲灵碱对自噬相关蛋白表达的影响;荧光共定位法检测自噬体与溶酶体的融合情况;建立荷宫颈癌He La、Caski细胞移植瘤裸鼠模型,检测千里光菲灵碱对移植瘤生长的抑制作用。结果显示,千里光菲灵碱呈时间和剂量依赖性抑制He La、Caski两种宫颈癌细胞的增殖;千里光菲灵碱可诱导He La、Caski细胞内自噬体的形成和LC3-II蛋白的增加及P62蛋白的减少,表明千里光菲灵碱可诱导He La、Caski细胞发生自噬;与单药千里光菲灵碱相比,千里光菲灵碱联合自噬下游抑制剂氯喹(CQ)显著增加了LC3-II及P62的蛋白表达,同时荧光共定位显示千里光菲灵碱诱导的自噬体可与溶酶体实现共定位,表明千里光菲灵碱可诱导完整自噬流;与单药千里光菲灵碱相比,千里光菲灵碱联合自噬上游抑制3-甲基腺嘌呤(3MA)剂显著增加了LC3-II的蛋白表达,显著降低了He La、Caski细胞的存活率,表明抑制自噬可增强千里光菲灵碱对宫颈癌细胞增殖的抑制作用;与单药千里光菲灵碱相比,千里光菲灵碱联合MEK抑制剂显著降低了P-ERK1/2的蛋白表达,减少了自噬体的形成,表明千里光菲灵碱诱导的He La、Caski细胞自噬依赖于MEK/ERK1/2途径;另外,千里光菲灵碱可显著抑制宫颈癌细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。 展开更多
关键词 千里光菲灵碱 宫颈癌 细胞增殖 自噬 MEK/ERK1/2信号通路
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副猪嗜血杆菌的分离鉴定及灭活疫苗研究 被引量:4
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作者 李晓华 林标声 +2 位作者 刘建奎 戴爱玲 杨小燕 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期95-98,共4页
从龙岩市48个规模化猪场分离到28株副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps),菌株经生化试验和PCR鉴定均符合Hps特征,血清学分型以4型、5型为流行菌株,以筛选出的4型LY04和5型LY05 2株代表性分离株为抗原研制Hps油乳剂灭活苗,免疫14日... 从龙岩市48个规模化猪场分离到28株副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps),菌株经生化试验和PCR鉴定均符合Hps特征,血清学分型以4型、5型为流行菌株,以筛选出的4型LY04和5型LY05 2株代表性分离株为抗原研制Hps油乳剂灭活苗,免疫14日龄仔猪,保护率均为66.7%。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 分离鉴定 灭活苗研究
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Apelin-13对小鼠血脂代谢的影响及其机制研究 被引量:4
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作者 张敏 李建磊 +5 位作者 朱雨婷 陈羽 林泽 吴琼 李焰 孙艳发 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2207-2215,共9页
本研究旨在探索Apelin-13调控小鼠血脂代谢的生理机制。试验选取体重相近的小鼠96只,随机分为4个处理,每个处理4个重复。对照组和3个试验组小鼠分别每天皮下注射100μL 0.9%的生理盐水、10、20和50μg·kg^-1的Apelin-13,试验期为1... 本研究旨在探索Apelin-13调控小鼠血脂代谢的生理机制。试验选取体重相近的小鼠96只,随机分为4个处理,每个处理4个重复。对照组和3个试验组小鼠分别每天皮下注射100μL 0.9%的生理盐水、10、20和50μg·kg^-1的Apelin-13,试验期为14 d。测定小鼠的生长性能、血清Apelin-13和血脂含量,并采用Illumina Novaseq测序平台进行小鼠肝组织转录组测序(RNA-seq)。结果表明,与对照组相比,皮下注射Apelin-13极显著提高了血清Apelin-13和高密度蛋白胆固醇含量(P<0.01),显著降低了血清甘油三酯含量(P<0.05)。试验组和处理组共检测到340个上调和350个下调的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。这些DEGs最显著富集的信号通路为视黄醇代谢,该通路中的细胞色素P450(Cyp)和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(Ugt)两个超家族基因大部分上调表达。试验结果表明,Apelin-13可能通过调控视黄醇代谢信号通路中的Cyp和Ugt两个超家族基因的表达来调控小鼠的血脂代谢。 展开更多
关键词 小鼠 APELIN-13 视黄醇代谢 DEGs RNA-SEQ
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猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因重组DNA疫苗的构建及其免疫效果评价 被引量:3
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作者 魏春华 黄夏玲 +8 位作者 杨圆 何乐 林志锋 徐叶 黄文琳 柳开隆 戴爱玲 杨小燕 刘建奎 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2022年第7期17-25,共9页
【目的】利用DNA改组技术(DNA shuffling)对不同谱系的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因进行体外重组,构建具有良好交叉保护作用的DNA疫苗,为研制新型PRRSV疫苗提供参考。【方法】利用DNA改组技术对PRRSV谱系1、3、5.1、8.7毒株的... 【目的】利用DNA改组技术(DNA shuffling)对不同谱系的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因进行体外重组,构建具有良好交叉保护作用的DNA疫苗,为研制新型PRRSV疫苗提供参考。【方法】利用DNA改组技术对PRRSV谱系1、3、5.1、8.7毒株的ORF5基因进行体外突变重组,筛选去除信号肽的重组突变体。将重组突变体与真核表达载体pCAGGS-HA连接,构建重组表达质粒并进行酶切和测序鉴定,经脂质体转染MARC-145细胞,利用间接免疫荧光试验(IFA)和Western blotting试验检测目的蛋白的表达情况。将重组质粒pCA-ΔORF5-8和pCA-ΔORF5-46(ORF5基因重组的DNA疫苗)免疫小鼠,试验同时设pCAGGS-HA空载体组、PBS空白对照组、弱毒疫苗组(经典弱毒疫苗Ingelvac PRRS MLV,MLV组)和pCA-ORF5-MLV组(ORF5基因来自Ingelvac PRRS MLV),评估其免疫效果。【结果】筛选到2个去除信号肽的重组突变体(ΔORF5-8和ΔORF5-46)。成功构建重组表达质粒pCA-ΔORF5-8和pCA-ΔORF5-46,其可在MARC-145细胞中表达GP5蛋白。与pCAGGS-HA空载体组和PBS空白对照组相比,pCA-ΔORF5-8和pCA-ΔORF5-46组免疫小鼠血清白介素4(IL-4)和干扰素γ(INF-γ)含量均极显著提高(P<0.01),脾淋巴细胞增殖能力均极显著增强(P<0.01),均能产生针对GP5蛋白的抗体,血清中和试验表明,免疫组小鼠血清能对异源毒株产生交叉中和抗体(抗体平均滴度为10~16)。【结论】重组DNA疫苗pCA-ΔORF5-8和pCA-ΔORF5-46均能有效刺激并诱导机体产生细胞及体液免疫应答,具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 DNA改组技术 重组DNA疫苗 交叉保护
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鹅圆环病毒研究进展 被引量:3
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作者 赵敏 李家玉 +2 位作者 何海斌 黄瑜 万春和 《福建畜牧兽医》 2021年第4期12-14,共3页
鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)属于圆环病毒科圆环病毒属成员,鹅群感染后可造成法氏囊、脾和胸腺淋巴细胞减少,从而易继发多种条件性病原二次感染,危害极大。本文从鹅圆环病毒的流行病学特点、基因组特征、致病性及诊断方法等方面... 鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)属于圆环病毒科圆环病毒属成员,鹅群感染后可造成法氏囊、脾和胸腺淋巴细胞减少,从而易继发多种条件性病原二次感染,危害极大。本文从鹅圆环病毒的流行病学特点、基因组特征、致病性及诊断方法等方面进行综述。 展开更多
关键词 鹅圆环病毒 流行病学 基因组 诊断方法 研究进展
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鹅圆环病毒JX1株ORF3基因序列分析 被引量:2
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作者 万春和 黄瑜 《福建畜牧兽医》 2020年第6期1-5,共5页
为明确鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)ORF3基因特征,本研究通过对朗德鹅源GoCV代表株(JX1株)基因组分析发现,JX1株ORF3基因全长为300 bp,编码99个氨基酸,未发现典型的核定位信号。所编码ORF3蛋白理论等电点为8.84、不稳定指数为80.... 为明确鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)ORF3基因特征,本研究通过对朗德鹅源GoCV代表株(JX1株)基因组分析发现,JX1株ORF3基因全长为300 bp,编码99个氨基酸,未发现典型的核定位信号。所编码ORF3蛋白理论等电点为8.84、不稳定指数为80.95,为不稳定蛋白;脂肪系数为89.70;总平均疏水性指数为-0.472。ORF3基因核苷酸同源性分析比较发现,JX1株与yk1株(AY633653)、yk3株(DQ192280)核苷酸同源性最高,均为100%;与DG1株(KT808650)的核苷酸同源性最低,仅为89.0%。ORF3基因遗传进化分析发现,ORF3基因的进化频率并不完全与GoCV全基因组一致,ORF3基因在遗传进化上表现出明显的地域性,但不表现出时间性。本研究首次对GoCV ORF3基因特征进行分析探讨,为后续开展GoCV ORF3基因生物学功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 鹅圆环病毒 ORF3基因 序列分析
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风柜斗草提取物通过调控脂质代谢改善小鼠肝脂质沉积症 被引量:2
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作者 王玥文 蔡凤迎 +4 位作者 薛凯航 华宝玉 郭昌 李焰 邱龙新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期925-937,共13页
旨在探究风柜斗草提取物(Sarcopyramis napalensis Wall extract,SNE)对蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食诱导的肝脏脂质沉积的作用与机制。本研究将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为6组,每组10只,设置MCS组(MCD饲料的对照饲料组)、MCS+风柜斗草提... 旨在探究风柜斗草提取物(Sarcopyramis napalensis Wall extract,SNE)对蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食诱导的肝脏脂质沉积的作用与机制。本研究将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为6组,每组10只,设置MCS组(MCD饲料的对照饲料组)、MCS+风柜斗草提取物组(400 mg·(kg·bw)^(-1))、MCD组、MCD+风柜斗草提取物低、中、高剂量组(100、200、400 mg·(kg·bw)^(-1)),造模及药物干预6周。进行肝组织切片HE染色、天狼猩红染色,检测血清碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT),肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活力水平及丙二醛(MDA)含量以评估肝脂质沉积、肝纤维化以及肝抗氧化情况。使用Western blot技术检测腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)蛋白的激活情况,使用qRT-PCR技术检测固醇调节元件结合蛋白-1C(SREBP-1c)、肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)、脂肪酸转运蛋白-3(FATP-3)、脂肪酸转运蛋白-4(FATP-4)、细胞间黏附分子-l(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-l(VCAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)mRNA表达水平,同时采用LC-MS/MS技术进行肝组织非靶向脂质组学分析。结果表明,给予200、400 mg·(kg·bw)^(-1)剂量的风柜斗草提取物时均可显著改善MCD饲料饲喂的小鼠肝脂肪变性,减少炎症簇以及肝纤维化程度。给予风柜斗草提取物100、200、400 mg·(kg·bw)^(-1)时均可显著降低MCD饲料饲喂的小鼠血清中ALT和AKP的活力以及肝组织中MDA的含量,显著提高小鼠肝中GSH-Px的活力。Western blot及qRT-PCR检测结果显示,风柜斗草提取物显著激活MCD饲料饲喂的小鼠肝组织AMPK;显著抑制MCD饲料饲喂的小鼠肝组织SREBP-1c、L-FABP、FATP-3、FATP-4、ICAM-1、VCAM-1、MMP-2、TIMP-2的mRNA表达水平。肝脂质组学检测结果显示,风柜斗草提取物显著降低MCD饲料饲喂的小鼠肝中甘油三酯(TG)、磷脂酰甘油(PG)以及神经酰胺(Cer)的相对含量;显著提高鞘磷脂(SM)以及辅酶Q9相对含量。结果提示,风柜斗草提取物可通过AMPK/SREBP-1c途径抑制TG合成,以及通过抑制FATP与L-FABP表达来减少肝对脂肪酸的摄取,从而改善MCD饲料饲喂的小鼠肝脂肪变性;通过提高MCD饲料饲喂的小鼠肝组织中SM和辅酶Q9相对含量以及降低Cer相对含量,改善肝细胞氧化应激损伤情况,进而改善MCD饮食诱导的小鼠肝炎症和纤维化,最终达到改善肝脂质沉积症的作用。 展开更多
关键词 风柜斗草 肝脂质沉积症 小鼠
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复方银杏叶中草药发酵制剂对肉鸡生长性能、免疫功能和抗氧化功能的影响 被引量:17
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作者 张敏 邱龙新 +6 位作者 林标声 戴爱玲 阮港鸿 周理政 邓强 王勋 孙艳发 《中国家禽》 北大核心 2021年第8期48-53,共6页
试验旨在研究复方银杏叶中草药发酵制剂对肉鸡生长性能、免疫功能和抗氧化功能的影响。试验选取1日龄AA肉鸡150只,随机分为5组,每组5个重复。对照组饲喂玉米-豆粕基础日粮,阳性对照组为基础日粮添加300 mg/kg饲用金霉素组,试验组为基础... 试验旨在研究复方银杏叶中草药发酵制剂对肉鸡生长性能、免疫功能和抗氧化功能的影响。试验选取1日龄AA肉鸡150只,随机分为5组,每组5个重复。对照组饲喂玉米-豆粕基础日粮,阳性对照组为基础日粮添加300 mg/kg饲用金霉素组,试验组为基础日粮分别添加0.25%、0.50%和1.00%复方银杏叶中草药发酵制剂组,饲养期为35 d。结果显示:与对照组和金霉素组相比,日粮添加复方银杏叶中草药发酵制剂对肉鸡生长性能没有显著影响,添加0.25%发酵制剂显著提高了21日龄肉鸡血清Ig G含量(P<0.05);与对照组相比,添加0.25%发酵制剂显著提高了21日龄肉鸡血清总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05);与金霉素组相比,添加0.50%发酵剂提高了21日龄肉鸡血清Ig G含量和T-AOC含量(P<0.05),添加1.00%发酵制剂极显著提高了35日龄肉鸡血清SOD含量(P<0.01)。综上所述,饲粮中添加0.25%~0.50%的复方银杏叶中草药发酵制剂能够提高肉鸡免疫功能和抗氧化能力。 展开更多
关键词 肉鸡 复方银杏叶发酵制剂 生长性能 免疫功能 抗氧化功能
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