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木薯MePP2CAa基因克隆、表达及蛋白互作分析
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作者 曾坚 李丽珍 +6 位作者 沈梓欣 林墁 刘博婷 吴春来 李冰 胡伟 曾力旺 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期141-148,共8页
为探究2C型蛋白磷酸酶(protein phosphatase 2C,PP2C)在木薯响应非生物胁迫过程中的作用,利用木薯Arg7叶片cDNA扩增MePP2CAa基因,分析该基因序列、启动子活性、不同逆境和激素处理下的表达模式以及与ABA受体PYLs之间的互作关系。序列分... 为探究2C型蛋白磷酸酶(protein phosphatase 2C,PP2C)在木薯响应非生物胁迫过程中的作用,利用木薯Arg7叶片cDNA扩增MePP2CAa基因,分析该基因序列、启动子活性、不同逆境和激素处理下的表达模式以及与ABA受体PYLs之间的互作关系。序列分析结果显示,MePP2CAa基因全长1311 bp,编码436个氨基酸,具有PP2C家族的结构域特征,与橡胶树和麻风树的PP2C序列同源性最高,分别为78.95%和74.09%,在C端保守;qRT-PCR分析结果显示,MePP2CAa基因在木薯储藏根中的表达显著高于茎、叶中的表达量;不同逆境和激素处理结果显示,甘露醇、NaCl、ABA、MeJA、低温和SA处理可以显著诱导MePP2CAa基因的表达;MePP2CAa基因启动子序列分析显示,启动子包含ABA应答元件(abscisic acid responsive element,ABRE)、MeJA响应元件、干旱诱导元件等;酵母双杂交结果显示MePP2CAa能够与MePYL1互作。以上结果表明,MePP2CAa基因可能响应木薯的非生物胁迫。 展开更多
关键词 木薯 脱落酸 2C型蛋白磷酸酶 非生物胁迫
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木薯MeERF1.2基因克隆及表达分析 被引量:3
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作者 曾坚 吴伟姗 +8 位作者 谢彩虹 沈梓欣 叶晓雪 颜彦 李冰 陈志晟 彭红元 胡伟 曾力旺 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期410-416,共7页
【目的】乙烯响应因子(Ethylene response factor,ERF)是乙烯信号转导通路的重要成员,克隆并分析其在木薯块根采后生理性变质(Post-harvest physiological deterioration,PPD)过程中的表达情况,能为进一步研究乙烯信号在木薯PPD过程中... 【目的】乙烯响应因子(Ethylene response factor,ERF)是乙烯信号转导通路的重要成员,克隆并分析其在木薯块根采后生理性变质(Post-harvest physiological deterioration,PPD)过程中的表达情况,能为进一步研究乙烯信号在木薯PPD过程中的功能提供参考。【方法】以木薯栽培品种华南8号(SC8)为材料,采用RT-PCR技术克隆木薯MeERF1.2基因,对其进行相关生物信息学分析,如遗传进化关系、结构域、蛋白质结构预测、理化性质等。对MeERF1.2基因在细胞中的亚细胞定位进行确认,并用qRT-PCR技术分析MeERF1.2基因在木薯块根PPD过程中的表达水平。【结果】克隆得到的MeERF1.2基因全长为660 bp,编码的氨基酸残基数为219,分子量和等电点分别为25.04 kD和5.61,含有AP2家族结构域,和橡胶HbERF1B-like的亲缘关系最近,序列相似性达到88.74%。MeERF1.2基因定位于细胞核。和对照0 h相比,MeERF1.2基因的表达量在木薯块根的采后过程中表现为显著上升趋势,即MeERF1.2基因的表达受到PPD过程的诱导。【结论】克隆得到的MeERF1.2基因包含ERF基因家族的保守结构域,属于ERF基因家族;MeERF1.2基因的表达在采后过程中受到诱导,可能参与了木薯块根的PPD过程,为后续进一步分析乙烯信号转导通路在PPD过程中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 木薯 乙烯 ERF 活性氧 采后生理性变质
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木薯MePP2CAb基因克隆及表达分析 被引量:2
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作者 王舒婷 杨静琳 +5 位作者 林墁 李丽珍 刘博婷 吴春来 曾坚 胡伟 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期2392-2400,共9页
2C型蛋白磷酸酶(protein phosphatase 2C,PP2C)在ABA核心信号途径中发挥着重要作用。为了研究PP2C基因在木薯响应非生物胁迫过程中的功能,本研究通过RT-PCR技术,从木薯Arg7中克隆得到MePP2CAb基因,并对其进行生物信息学分析、自激活活... 2C型蛋白磷酸酶(protein phosphatase 2C,PP2C)在ABA核心信号途径中发挥着重要作用。为了研究PP2C基因在木薯响应非生物胁迫过程中的功能,本研究通过RT-PCR技术,从木薯Arg7中克隆得到MePP2CAb基因,并对其进行生物信息学分析、自激活活性分析、启动子活性分析及不同逆境和激素处理下的表达模式分析。结果表明:(1)MePP2CAb基因的长度为1296 bp,包含431个氨基酸残基,蛋白相对分子量和理论等电点分别为47.08 kDa和5.5,具有PP2C家族的结构域特征。蛋白质序列比对结果显示,MePP2CAb与橡胶树和麻风树的PP2C序列最为相似,一致性分别为82.75%和74.01%,在C-端保守。上述结果证明MePP2CAb基因属于PP2C家族。(2)MePP2CAb基因在木薯块根中的表达最高。(3)MePP2CAb具有一定的自激活活性,MePP2CAb基因的全长启动子的活性也较高。(4)MePP2CAb基因属于ABA核心通路,启动子序列分析显示,它包含ABRE(abscisic acid responsiveness)元件、MeJA响应原件、干旱诱导元件(drought-induced motif)等元件。不同逆境和激素处理的结果也表明,MePP2CAb基因在冷处理和SA处理下受到抑制,在NaCl、mannitiol、ABA和MeJA处理的过程中受到诱导。另外酵母双杂交结果显示MePP2CAb能够与MePYL1产生互作。根据上述结果推测,MePP2CAb基因可能对木薯的非生物胁迫有响应,但其到底是正调控因子还是负调控因子尚不清楚。该结果为进一步研究解析MePP2CAb基因在ABA信号通路中的作用及提高木薯在非生物胁迫中的适应能力提供参考。 展开更多
关键词 木薯 ABA PP2C 非生物胁迫
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香蕉中ABA醛氧化酶基因家族的鉴定及其表达分析
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作者 曾坚 周洁薇 +1 位作者 王舒婷 胡伟 《山东农业科学》 北大核心 2023年第10期15-21,共7页
ABA醛氧化酶(abscisic aldehyde oxidase,AAO)在植物生长发育和对生物/非生物胁迫的响应中起着重要作用。本研究从香蕉基因组中鉴定出3个MaAAOs基因,并对其遗传进化关系、结构域、理化性质及在不同组织、不同果实发育阶段和逆境处理下... ABA醛氧化酶(abscisic aldehyde oxidase,AAO)在植物生长发育和对生物/非生物胁迫的响应中起着重要作用。本研究从香蕉基因组中鉴定出3个MaAAOs基因,并对其遗传进化关系、结构域、理化性质及在不同组织、不同果实发育阶段和逆境处理下的表达情况进行了分析。结果表明,这3个MaAAOs分为两个亚族,相同亚族的基因呈现出类似的结构域组成和基因结构,与系统发育树的构建结果相一致。MaAAO1基因在果实的发育和成熟阶段都表现出显著的高表达水平,暗示着其在香蕉果实发育过程中可能发挥着重要功能。另外,MaAAO1和MaAAO2基因可能对渗透胁迫有响应,MaAAO2基因还可能对Foc4病菌的侵染有响应。基于以上结果推断MaAAOs基因在香蕉的生长发育调控以及逆境响应中具有重要作用。该结果不仅丰富了我们对MaAAOs基因家族的认识,也为进一步揭示其在香蕉生长发育和应激响应机制方面的功能提供了线索。 展开更多
关键词 香蕉 ABA醛氧化酶(AA0) 基因鉴定 基因表达
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