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基于酿酒酵母多拷贝系统策略提高三乙酸内酯的产量
1
作者
韦欢
林苹鑫
+4 位作者
刘秀霞
刘春立
杨艳坤
李业
白仲虎
《食品与发酵工业》
北大核心
2025年第4期1-10,共10页
三乙酸内酯(triacetic acid lactone,TAL)是一种具有广泛应用前景的聚酮,可用作各种有机化合物的前体。为了提高酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中TAL的产量,该研究利用基因组重复序列整合的方法构建了S.cerevisiae多拷贝整合系统,...
三乙酸内酯(triacetic acid lactone,TAL)是一种具有广泛应用前景的聚酮,可用作各种有机化合物的前体。为了提高酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中TAL的产量,该研究利用基因组重复序列整合的方法构建了S.cerevisiae多拷贝整合系统,应用该系统提高TAL的生产。首先以绿色荧光蛋白表征多拷贝Delta1整合,通过截短遗传霉素和潮霉素B两种抗生素基因的启动子以及增加抗生素浓度的方法增加筛选压力,进而提高整合效率和拷贝数,最优参数为将抗生素基因启动子截短至15 bp的同时采用160μg/mL的抗生素。将该优化系统随后用于新的多拷贝整合位点Delta2的表征。最后应用该系统合成TAL,通过HPLC分析TAL产量。结果表明,利用Delta1和Delta2序列表征绿色荧光蛋白的最高拷贝数分别为10和7,Delta1略优于Delta2。应用该系统在S.cerevisiae中合成TAL,Delta1和Delta2的产量分别为1.50、1.17 mmol/L,比单拷贝菌株产量分别提高460%和337%。该多拷贝系统有效提高了TAL的产量,为S.cerevisiae异源途径的表达提供了一种高效、模块化的多拷贝整合方法。
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关键词
酿酒酵母
多拷贝整合
Delta整合
三乙酸内酯
启动子
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职称材料
题名
基于酿酒酵母多拷贝系统策略提高三乙酸内酯的产量
1
作者
韦欢
林苹鑫
刘秀霞
刘春立
杨艳坤
李业
白仲虎
机构
江南大学
江南大学
韩国科学技术院环境与分子微生物实验室
出处
《食品与发酵工业》
北大核心
2025年第4期1-10,共10页
基金
国家自然科学基金(21878124)。
文摘
三乙酸内酯(triacetic acid lactone,TAL)是一种具有广泛应用前景的聚酮,可用作各种有机化合物的前体。为了提高酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中TAL的产量,该研究利用基因组重复序列整合的方法构建了S.cerevisiae多拷贝整合系统,应用该系统提高TAL的生产。首先以绿色荧光蛋白表征多拷贝Delta1整合,通过截短遗传霉素和潮霉素B两种抗生素基因的启动子以及增加抗生素浓度的方法增加筛选压力,进而提高整合效率和拷贝数,最优参数为将抗生素基因启动子截短至15 bp的同时采用160μg/mL的抗生素。将该优化系统随后用于新的多拷贝整合位点Delta2的表征。最后应用该系统合成TAL,通过HPLC分析TAL产量。结果表明,利用Delta1和Delta2序列表征绿色荧光蛋白的最高拷贝数分别为10和7,Delta1略优于Delta2。应用该系统在S.cerevisiae中合成TAL,Delta1和Delta2的产量分别为1.50、1.17 mmol/L,比单拷贝菌株产量分别提高460%和337%。该多拷贝系统有效提高了TAL的产量,为S.cerevisiae异源途径的表达提供了一种高效、模块化的多拷贝整合方法。
关键词
酿酒酵母
多拷贝整合
Delta整合
三乙酸内酯
启动子
Keywords
Saccharomyces cerevisiae
multi-copy integration
Delta integration
triacetic acid lactone
promoter
分类号
TQ926 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于酿酒酵母多拷贝系统策略提高三乙酸内酯的产量
韦欢
林苹鑫
刘秀霞
刘春立
杨艳坤
李业
白仲虎
《食品与发酵工业》
北大核心
2025
0
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