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题名红三叶独脚金内酯TpD27基因表达与功能分析
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作者
杨丹
牛奎举
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机构
青海理工学院生态与环境科学学院/青海省高原气候变化及其生态环境效应重点实验室
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出处
《中国草地学报》
2025年第10期1-10,共10页
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基金
青海理工大学(筹)“昆仑英才”人才引进科研项目(2023-QLGKLYCZX-013)
青海理工学院论文延伸项目(202302lwys011)。
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文摘
D27(DWARF 27)基因编码一种含铁的β-胡萝卜素异构酶,参与植物激素独脚金内酯的合成。本研究以‘岷山红三叶’为材料,采用RT-PCR技术克隆了TpD27基因。该基因开放阅读框792 bp,编码264个氨基酸,蛋白质相对分子量29.71 kD,等电点为8.76,不稳定系数51.30,属于不稳定蛋白;亚细胞定位预测显示,该蛋白位于叶绿体;TpD27蛋白二级结构主要由α螺旋(33.71%)和无规则卷曲(55.68%)构成,与空间结构预测结果高度一致;系统发育树分析显示,TpD27蛋白与蒺藜苜蓿MtD27属于同一分支,亲缘关系最近。时空表达分析显示,TpD27基因表达具有明显的组织特异性,在花中表达量最高,根中表达量最低。非生物胁迫表达分析显示,TpD27基因表达量在镉、盐和干旱胁迫下显著下调,在低温胁迫下呈先下调后上调再下调趋势。本研究构建pCAMBIA2300-TpD27过表达载体,采用农杆菌介导花序浸染法转化拟南芥发现,过表达TpD27转基因拟南芥植株的分枝数显著低于野生型。
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关键词
红三叶
TpD27基因
表达分析
基因克隆
遗传转化
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Keywords
Trifolium pratense
TpD27 gene
Expression analysis
Gene cloning
Genetic transformation
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分类号
S541.2
[农业科学]
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