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棘球属绦虫线粒体基因组全序列生物信息学分析 被引量:9
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作者 张耀刚 马艳艳 +2 位作者 曹得萍 姜博璠 樊海宁 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期271-277,共7页
目的利用生物信息学技术分析棘球属绦虫线粒体基因组全序列碱基组成、基因的结构组成及排列、蛋白基因核苷酸序列变异位点、密码子使用情况及偏好性、系统发育等,为研究棘球绦虫系统起源、演化、分类及亲缘关系等提供理论基础。方法从Ge... 目的利用生物信息学技术分析棘球属绦虫线粒体基因组全序列碱基组成、基因的结构组成及排列、蛋白基因核苷酸序列变异位点、密码子使用情况及偏好性、系统发育等,为研究棘球绦虫系统起源、演化、分类及亲缘关系等提供理论基础。方法从GenBank数据库下载12种棘球属绦虫线mtDNA全序列,并以猪带绦虫作为外类群,构建系统发育树。利用OGDRAW在线分析网站及Vector NTI Express软件,分析mtDNA的组成及排列情况。用Clust-X软件对多个相似序列进行多重序列比对分析;使用Mega4.0软件选择邻接法构建进化树,并分析密码子使用情况;利用RNAfold在线预测网站使用minimum free energy (MFE) and partition function算法预测l-rRNA和s-rRNA二级结构。结果除Eg G1外,棘球绦虫属mtDNA有36个编码基因,包括22个转运RNA基因、12个蛋白基因、2个核糖体RNA基因;但Eg G1 mtDNA最小,只有30个编码基因,在起始编码区缺少6个编码转运RNA的基因,且第一个编码基因不是ND5,而是COX3;编码蛋白的基因核苷酸序列变异率为27.9%~42.7%,其中COX1最为保守,ND5变异率最大达到42.7%;棘球属绦虫线粒体蛋白质编码基因起始密码子除atg,也有一些蛋白质以gtg作为起始密码子,终止密码子以taa和tag常见,但也有以ttt作为终止密码子的;棘球绦虫属使用的密码子为密码表9,使用频率最高的密码子是UUG(2.72%),频率最低的是CUC(1%)、CGC(1%),编码亮氨酸、精氨酸的密码子最多达6个,编码甲硫氨酸、色氨酸最少只有一个,亮氨酸也是棘球属绦虫最偏好的氨基酸达到6%;棘球属绦虫核糖体基因有两个长度大小分别为977~985 bp、700~727 bp,两个基因的位置十分靠近中间只隔一个trnC基因;系统进化树中Ev、Eo单独为一枝,Em、Es及Eg G1、Ef形成姐妹枝,细粒棘球绦虫G4、G5、G6、G7、G8、G10亚型聚为一枝,进化距离较近。结论本研究将为棘球属绦虫mtDNA的研究、分子进化和分子诊断等方面提供诸多信息,并为种系鉴定起到一定的指导作用。 展开更多
关键词 棘球属绦虫 线粒体基因组 生物信息学分析 系统发育
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维生素A与儿童呼吸道感染关系的研究进展 被引量:9
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作者 张轩 侯静 +2 位作者 曹海霞 李志琴 马艳艳(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1980-1985,共6页
维生素A是机体生长发育必需的营养素,在维持视觉功能、促进上皮细胞增殖分化、增强机体免疫应答等方面发挥重要作用。儿童免疫系统发育不成熟,尤其是体液免疫功能处于早期阶段,极易患呼吸道感染。研究显示机体维生素A水平与儿童反复呼... 维生素A是机体生长发育必需的营养素,在维持视觉功能、促进上皮细胞增殖分化、增强机体免疫应答等方面发挥重要作用。儿童免疫系统发育不成熟,尤其是体液免疫功能处于早期阶段,极易患呼吸道感染。研究显示机体维生素A水平与儿童反复呼吸道感染关系密切。本文通过查阅大量文献,主要从维生素A影响机体免疫系统的作用机制及对呼吸系统的免疫调控两方面对维生素A与儿童呼吸道感染的关系进行综述,为儿童呼吸道感染防治提供支撑。 展开更多
关键词 维生素A 呼吸道感染 免疫机制 儿童
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细粒棘球蚴脂肪酸转运蛋白生物学特性分析 被引量:1
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作者 田美媛 张耀刚 +9 位作者 李志琴 樊海宁 侯静 李建华 黄登亮 孙莉 江源 童思贤 张文诗 马艳艳 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第2期93-99,共7页
本研究根据NCBI GenBank数据库中的Eg-FATP氨基酸序列,采用生物信息学方法分析细粒棘球蚴脂肪酸转运蛋白(Eg-FATP)理化性质,亚细胞定位、抗原表位、信号肽、跨膜区二级和三级结构、系统进化树、蛋白互作网络等,并通过qPCR方法探究其在... 本研究根据NCBI GenBank数据库中的Eg-FATP氨基酸序列,采用生物信息学方法分析细粒棘球蚴脂肪酸转运蛋白(Eg-FATP)理化性质,亚细胞定位、抗原表位、信号肽、跨膜区二级和三级结构、系统进化树、蛋白互作网络等,并通过qPCR方法探究其在原头蚴和包囊壁的差异表达,旨在为后期相关的研究提供理论支持和数据参考。结果显示,Eg-FATP蛋白无信号肽,无跨膜区,亚细胞定位于细胞质;该蛋白有10个B细胞线性表位和14个CTL细胞表位;系统发育分析显示:细粒棘球蚴的FATP蛋白与多房棘球蚴亲缘关系较近,细粒棘球蚴中国株和英国株之间的氨基酸序列同一性较高,为97%左右。预测的互作功能蛋白可能参与胆固醇代谢的调节、脂肪酸跨血屏障的转运等过程;GO和KEGG富集分析结果显示,Eg-FATP对长链和超长链脂肪酸具有酰基辅酶A连接酶活性;qPCR结果显示,FATP基因在原头蚴阶段转录水平较高于包囊壁,具有统计学意义(P<0.05)。本研究对细粒棘球蚴FATP基因的生物学特性进行了初步分析,为进一步揭示其生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 脂肪酸转运蛋白 生物信息学 抗原表位
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维生素A对呼吸道上皮细胞线粒体功能的作用机制 被引量:1
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作者 张轩 侯静 +4 位作者 曹海霞 黄登亮 张耀刚 袁馥梅 马艳艳 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第11期1126-1131,共6页
目的维生素A(VA)能够促进呼吸道上皮细胞增殖.分化,但作用机制尚不明确,文章旨在探索VA是否通过调控线粒体功能影响人正常主支气管上皮细胞生长代谢以及初步的作用机制。方法采用CCK-8检测VA对细胞增殖及毒性影响并结合VA缺乏的诊断标... 目的维生素A(VA)能够促进呼吸道上皮细胞增殖.分化,但作用机制尚不明确,文章旨在探索VA是否通过调控线粒体功能影响人正常主支气管上皮细胞生长代谢以及初步的作用机制。方法采用CCK-8检测VA对细胞增殖及毒性影响并结合VA缺乏的诊断标准确定VA给药量,将人主支气管上皮细胞分为4组,即对照组、VA-0.1 mg/L组、VA-0.5 mg/L组、VA-2 mg/L组,培养24.48 h。采用细胞能量代谢仪检测不同浓度VA对细胞线粒体有氧代谢的影响;qPCR分析细胞线粒体DNA拷贝数及线粒体自噬相关P62基因表达水平。结果VA处理HNTEC细胞24h后线粒体耗氧量相较于对照组增高,处理浓度为0.5mg/L时细胞线粒体耗氧量最高、ATP生成最多、最大呼吸潜能最高、质子漏增加;处理48h,0.1.0.5 mg/L处理组的结果与24h-致。VA-0.5 mg/L组、VA-2 mg/L组24 h线粒体拷贝数(328 333.00±66 583.28、3553 333.00±262 742.00)较对照组(2813 333.00±40 414.52)和VA-0.1 mg/L(2953 333.00±40 414.52)明显升高(P<0.01);VA-2 mg/L组.VA-0.5 mg/L组24 h线粒体拷贝数较VA-0.1 mg/L组明显升高(P<0.01);VA-2 mg/L组24 h线粒体拷贝数较VA-0.5 mg/L组明显升高(P<0.05)。VA-0.1 mg/L组48 h线粒体拷贝数(8475715.00+44489.78)较对照组(8331 365.00±5 435.18)明显升高(P<0.01);VA-2 mg/L组.VA-0.5 mg/L组48 h线粒体拷贝数较VA-0.1 mg/L组明显降低(P<0.01);VA-2 mg/L组48 h线粒体拷贝数较VA-0.5 mg/L组明显降低(P<0.01)。VA处理24.48 h后,P62基因的表达较对照组明显升高,且随着VA浓度的增加而增加.差异有统计学意义(P<0.01),但在48h,干预浓度为2mg/L较0.5mg/L P62基因表达稍降低(P<0.05)。结论VA可以通过降低线粒体自噬及增加线粒体DNA拷贝数影响呼吸道上皮细胞线粒体功能。 展开更多
关键词 维生素A 呼吸道上皮细胞 线粒体能量代谢 线粒体DNA拷贝数 自噬
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大鼠感染泡球蚴后外周血及脾脏中滤泡辅助T淋巴细胞的变化
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作者 张耀刚 李建华 +7 位作者 侯静 孙莉 田美媛 江源 黄登亮 张涛 马艳艳 樊海宁 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2021年第7期1657-1661,共5页
目的分析泡球蚴感染宿主后外周血和脾脏中滤泡辅助T淋巴细胞(Tfh)水平与包虫病进展的关系。方法20只SD大鼠随机分为正常对照组和模型组,每组10只,模型组开腹直视下在右肝接种约2000个原头节,对照组不做任何处理,3个月后麻醉处死SD大鼠,... 目的分析泡球蚴感染宿主后外周血和脾脏中滤泡辅助T淋巴细胞(Tfh)水平与包虫病进展的关系。方法20只SD大鼠随机分为正常对照组和模型组,每组10只,模型组开腹直视下在右肝接种约2000个原头节,对照组不做任何处理,3个月后麻醉处死SD大鼠,取外周血和脾脏细胞,以CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)为Tfh细胞的标记,使用流式细胞术检测外周血和脾脏中Tfh细胞的水平。使用t检验比较两组之间Tfh细胞的差异。结果大鼠感染泡球蚴3个月后,肝脏可见明显病灶,HE染色显示病灶中可见原头节。泡球蚴感染模型组外周血中CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)Tfh细胞在CD4+细胞中的平均占比为25.63%±3.47%,正常对照组为11.12%±2.94%,2组比较差异有统计学意义(t=10.230,P<0.001),模型组CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)Tfh细胞在所有细胞中所占的比例较正常对照组下降显著(0.08%±0.02%vs 0.18%±0.05%,t=5.520,P<0.001);在所有细胞中,模型组脾脏中CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)Tfh细胞所占的比例(3.00%±0.42%)显著低于正常对照组(5.30%±1.40%)(t=4.769,P<0.001)。结论外周血中Tfh细胞与包虫病进展密切相关,有望成为反应泡球蚴感染的指标。 展开更多
关键词 棘球蚴病 T淋巴细胞 大鼠 Sprague-Dawley
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