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利用细胞色素氧化酶亚单位Ⅰ分析青海藏区细粒棘球绦虫系统发育学 被引量:7
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作者 曹得萍 樊海宁 +2 位作者 毋德芳 赵海龙 白海燕 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1048-1051,共4页
目的囊型包虫病是一种广泛流行且危害严重的人兽共患寄生虫病。本文旨在分析流行于青南地区细粒棘球绦虫系统发育学及基因多态性。方法本文利用线粒体DNA细胞色素氧化酶亚单位Ⅰ(COXⅠ)分子对收集到的流行于青海省的59例包虫病样本进行... 目的囊型包虫病是一种广泛流行且危害严重的人兽共患寄生虫病。本文旨在分析流行于青南地区细粒棘球绦虫系统发育学及基因多态性。方法本文利用线粒体DNA细胞色素氧化酶亚单位Ⅰ(COXⅠ)分子对收集到的流行于青海省的59例包虫病样本进行测序。总计71条序列(其中12条来自GenBank)碱基通过Clustal X软件比对,构建贝叶斯进化树。结果流行于青海省包虫病样本大部分与细粒棘球绦虫G1型聚在一枝,还有三个样本与多房棘球绦虫(AB018440)聚在一枝。虽大部分棘球绦虫基因型属于G1型,但各自的基因型各不相同,具有丰富的多样性。结论流行于青海省细粒棘球绦虫系统发育学比我们想象复杂。 展开更多
关键词 青海藏区 细粒棘球绦虫分离株 系统发育关系 细胞色素氧化酶亚单位I(cox I)基因
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几种乳酸菌S-层蛋白的普查以及slp基因的克隆与序列分析 被引量:5
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作者 双杰 包秋华 +3 位作者 永胜 王艳霞 张和平 格日勒图 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2010年第8期8-10,31,共4页
从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-lay... 从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-layers pro-tein,SLP)的普查和slp基因的检测。结果表明:在各种乳酸菌中,经SDS-PAGE电泳方法检测,只有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和其标准菌株的样品中出现膜外蛋白的可疑条带,大小为44~66ku之间,与文献报道的slp基因表达产物大小范围是一致;经PCR方法检测,只有嗜酸乳杆菌和其标准菌株L.acidophilus ATCC4356中扩增出slp基因可疑条带,其大小约为1 300 bp。并对嗜酸乳杆菌slp基因进行克隆、基因序列测序和分析。 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌 S-层蛋白 slp基因 克隆与序列分析
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细粒棘球蚴和多房泡球蚴在人体内蛋白质表达谱初步分析 被引量:3
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作者 张耀刚 李超群 +1 位作者 毋德芳 曹得萍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期21-23,共3页
目的 初步掌握流行于青海省细粒棘球绦虫幼虫棘球蚴(原头节、囊壁、囊液)和多房棘球绦虫幼虫泡球蚴在中间宿主人体内蛋白质表达情况。方法 利用SDS-PAGE和Western-blot分析棘球蚴原头节、囊壁、囊液蛋白质和泡球蚴总蛋白表达谱。结果... 目的 初步掌握流行于青海省细粒棘球绦虫幼虫棘球蚴(原头节、囊壁、囊液)和多房棘球绦虫幼虫泡球蚴在中间宿主人体内蛋白质表达情况。方法 利用SDS-PAGE和Western-blot分析棘球蚴原头节、囊壁、囊液蛋白质和泡球蚴总蛋白表达谱。结果 细粒棘球蚴原头节的蛋白质浓集在分子量72kDa处,囊壁的蛋白质浓集在72kDa、26kDa和17kDa处,囊液的蛋白浓集在72kDa、43~55kDa、26kDa和17kDa;泡球蚴总蛋白质浓集在分子量72kDa、55~72kDa和26kDa处。结论 不同地区细粒棘球蚴在人体内蛋白的表达存在差异;不同亚种泡球蚴原头节蛋白的表达存在差异。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 多房泡球蚴 蛋白质表达谱
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超声造影剂对高强度聚焦超声破坏棘球蚴囊壁的增强作用 被引量:2
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作者 蔡辉 赵海龙 +4 位作者 叶彬 刘爱波 陈露露 张静 王梦莹 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期135-139,共5页
目的观察高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)联用超声造影剂(ultrasound contrast agent,UCA)辐照细粒棘球蚴包囊后囊壁的损伤情况。方法 15个直径为30mm左右的包囊随机分为3组:对照组,接受超声假照;单纯HIFU组,接... 目的观察高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)联用超声造影剂(ultrasound contrast agent,UCA)辐照细粒棘球蚴包囊后囊壁的损伤情况。方法 15个直径为30mm左右的包囊随机分为3组:对照组,接受超声假照;单纯HIFU组,接受100W HIFU辐照;HIFU+UCA组,注入0.1mL UCA后进行HIFU辐照。辐照后观察超声图像的灰度变化和囊壁的肉眼变化,并取囊壁组织制作病理切片、扫描电镜切片和透射电镜切片,观察其病理改变。结果 100 W HIFU辐照可破坏囊壁的部分生发层和角质层;加入UCA后进行100W HIFU辐照,生发层几乎无残留,角质层也遭到更严重的破坏。结论 UCA能增强HIFU对离体细粒棘球蚴囊壁的破坏作用。 展开更多
关键词 超声造影剂 高强度聚焦超声 囊型包虫病 棘球蚴
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犬蛔虫眼病病人血清中特异性IgG和IgE抗体水平的测定(英文) 被引量:1
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作者 曹得萍 赤尾信明 太田伸生 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期696-698,共3页
目的研究犬蛔虫眼病病人血清中特异性IgG和IgE的抗体的水平。方法应用ELISA和Western-blotting。从东京医科齿科大学国际环境寄生虫学分野实验室储存的脉络膜炎的眼病病人血清中随意抽取105份血清,检测犬蛔虫抗体。结果通过ELISA法,105... 目的研究犬蛔虫眼病病人血清中特异性IgG和IgE的抗体的水平。方法应用ELISA和Western-blotting。从东京医科齿科大学国际环境寄生虫学分野实验室储存的脉络膜炎的眼病病人血清中随意抽取105份血清,检测犬蛔虫抗体。结果通过ELISA法,105份血清中有82份IgG和IgE均为阴性(78 .1 %) ,12例血清仅IgG阳性(11 .4 %) ,3例血清仅IgE阳性(2 .9 %) ,8例血清IgG和IgE均为阳性。所有的IgG和IgE阳性的血清,进一步进行Western-blot。IgG的反应带分布在幼虫分泌排泄抗原分子重量(97 .2 -14 .3kDa)的整个范围内,IgE的反应带分布在幼虫分泌排泄抗原分子重量(97 .2—14 .3kDa)的相对狭窄的范围内(29 -45kDa)。结论在这个研究中,我们清楚的说明了一些脉络膜炎病例血清中IgE抗体比IgG抗体具有特异性,因此IgE在眼犬蛔虫病的诊断中具有特异性,IgE在眼犬蛔虫病诊断中的价值还要进行进一步的研究。 展开更多
关键词 犬蛔虫 plate-ELISA IgG IGE WESTERN-BLOT
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高强度聚焦超声诱导阿苯达唑热敏脂质体杀伤原头蚴的实验研究
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作者 王梦莹 张静 +3 位作者 叶彬 张潞渝 赵毅峰 赵海龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期2358-2362,共5页
目的探索高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)诱导阿苯达唑热敏脂质体(Albendazolethermosensitive liposomes,TSL-ABZ)杀伤原头蚴的效果。方法采用薄膜分散法制备阿苯达唑热敏脂质体。设立假照超声组,单纯HIFU组,H... 目的探索高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)诱导阿苯达唑热敏脂质体(Albendazolethermosensitive liposomes,TSL-ABZ)杀伤原头蚴的效果。方法采用薄膜分散法制备阿苯达唑热敏脂质体。设立假照超声组,单纯HIFU组,HIFU+ABZ水剂100μL组,HIFU+TSL-ABZ 100μL组,HIFU+TSL-ABZ 200μL组,HIFU+TSL-ABZ 300μL组,HIFU+TSL-ABZ 600μL组,HIFU+TSL-ABZ 1 000μL组,实验组为原头蚴悬液1 m L加入含不同浓度的脂质体PBS缓冲液1 m L,每组均予以HIFU 75W×12 s进行照射,处理后悬液行伊红染色,光镜下观察原头蚴形态改变并计数死亡率;琼脂糖固定原头蚴切片,HE染色观察。结果制备的阿苯达唑热敏脂质体形态规则且分散性良好,与高强度聚焦超声联合使用后,对原头蚴的杀伤有很好的效果。其中HIFU+TSL-ABZ 1 000μL组杀伤效果最为显著,形态观察可见皮层破坏严重,钙颗粒消失,空泡化明显,头钩脱落,部分结构甚至消失,死亡率较其他各组更高[(88.25±0.01),(P<0.01)]。结论 HIFU联合TSL-ABZ对原头蚴的杀伤效果均优于单纯使用HIFU照射。HIFU功率一定时,在一定TSL-ABZ浓度范围内,原头蚴的死亡率随药物浓度的增加而升高。 展开更多
关键词 原头蚴 高强度聚焦超声 阿苯达唑 热敏脂质体
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绵羊肝脏、肺脏细粒棘球蚴原头节差异蛋白质表达分析
7
作者 彭文军 曹得萍 +3 位作者 张耀刚 刘燕 姜博璠 赵海龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期807-812,共6页
目的探讨绵羊肝脏和肺脏细粒棘球蚴原头节差异蛋白质表达谱,为虫体生长、发育调控特异性蛋白筛选奠定基础。方法提取寄生于绵羊肝脏与肺脏棘球蚴原头节蛋白质样本进行SDS-PAGE分析后,利用iTRAQ和液相色谱法以及串联质谱分析(LC-MS/MS)... 目的探讨绵羊肝脏和肺脏细粒棘球蚴原头节差异蛋白质表达谱,为虫体生长、发育调控特异性蛋白筛选奠定基础。方法提取寄生于绵羊肝脏与肺脏棘球蚴原头节蛋白质样本进行SDS-PAGE分析后,利用iTRAQ和液相色谱法以及串联质谱分析(LC-MS/MS)寄生于绵羊肝脏和肺脏细粒棘球蚴原头节蛋白质表达谱,通过Mascot软件和GO软件分析寄生于绵羊肝脏和肺脏棘球蚴原头节的差异表达蛋白质。结果本研究共鉴定了1229个有意义的蛋白质点,通过肝脏与肺脏比较有无差异性(肝脏原头节VS肺脏原头节)和调节趋势后获得217个差异表达蛋白质,在肝脏上调蛋白74个(脂肪酸绑定蛋白、ɑ纤维蛋白原、环氧化物酶、过氧化氢酶、酰基COA合成酶、载脂蛋白A4、磷酸化酶、6-磷酸葡萄糖内脂酶、乙酰辅酶酰基转移酶、还有一些未鉴定的蛋白等);下调蛋白143个(乳酸脱氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、内质网氧化还原酶、肌动蛋白、肌球蛋白、天冬酰胺酶、铁蛋白、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶、热休克蛋白90、胶原纤维I,胶原纤维IV、波形蛋白、玻连蛋白、磷脂转运蛋白、磷酸甘油酸激酶)。结论本研究发现寄生于绵羊肝脏和肺脏棘球蚴原头节蛋白质表达存在差异。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 原头节 蛋白质组学 iTRAQ技术 二维液相色谱串联质谱
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细粒棘球绦虫在人体内棘球蚴原头节、囊壁蛋白质表达谱分析
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作者 曹得萍 樊海宁 +2 位作者 毋德芳 白海燕 赵海龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期575-577,582,共4页
目的初步掌握流行于青海省细粒棘球绦虫幼虫棘球蚴(原头节、囊壁)在中间宿主人体内蛋白质表达情况。方法利用SDS-PAGE和western-blot分析棘球蚴原头节和囊壁蛋白质表达谱,进一步利用2DE和MALDI-TOF质谱分析技术对原头节和囊壁蛋白质构... 目的初步掌握流行于青海省细粒棘球绦虫幼虫棘球蚴(原头节、囊壁)在中间宿主人体内蛋白质表达情况。方法利用SDS-PAGE和western-blot分析棘球蚴原头节和囊壁蛋白质表达谱,进一步利用2DE和MALDI-TOF质谱分析技术对原头节和囊壁蛋白质构成情况进行全面的研究分析。结果在原头蚴、囊壁组织的双向电泳图中,各蛋白点通过MALDI-TOF-MS检测,原头蚴和囊壁分别有40个蛋白质点和8个蛋白质点得以初步鉴定,包括有:(1)细胞骨架蛋白:肌动蛋白、原肌球蛋白。(2)代谢相关酶类:苹果酸脱氢酶;磷酸丙糖异构酶;脯氨酸氧化酶;谷胱甘肽-S-转移酶;类胡萝卜脱氢酶;肽基脯氨酰顺反异构酶;(3)物质转运相关蛋白:载脂蛋白A-I;(4)应激反应蛋白(HSP70,HSP20相关蛋白)。结论初步鉴定了寄生人体细粒棘球蚴原头蚴、囊壁组织中的部分蛋白质点,其中,原头蚴中共有40个蛋白点,囊壁中有8个蛋白点。这些蛋白可能与细粒棘球蚴运动、生长、发育、代谢调控等方面有关。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 棘球蚴原头节 囊壁 蛋白质表达谱
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